| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| ·抑制消减杂交技术及其应用现状 | 第13-14页 |
| ·抑制消减杂交技术 | 第13页 |
| ·抑制消减杂交技术应用现状 | 第13-14页 |
| ·新基因功能预测的理论及方法 | 第14-19页 |
| ·新基因及其功能的预测 | 第14-16页 |
| ·蛋白质结构与功能预测及方法 | 第16-19页 |
| ·乳脂肪的功能及乳脂肪球的分泌 | 第19-26页 |
| ·乳脂肪的功能及生理活性物质 | 第19-22页 |
| ·乳脂肪球的分泌机制 | 第22-26页 |
| ·嗜乳脂蛋白基因及其研究进展 | 第26-30页 |
| ·BTN1A1 的结构及物种间相似性 | 第26-28页 |
| ·BTN1A1 基因的研究进展 | 第28-30页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第30-31页 |
| 第二章 西农萨能奶山羊泌乳中期和后期乳腺组织差异表达基因的筛选及相对定量分析 | 第31-48页 |
| ·材料与方法 | 第31-40页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-44页 |
| ·泌乳中期和后期乳腺组织中RNA 的定量分析 | 第40页 |
| ·消减效率分析 | 第40-41页 |
| ·文库质量鉴定 | 第41页 |
| ·消减文库的测序和分析 | 第41-43页 |
| ·实时定量PCR 检测差异表达基因 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| ·关于乳腺退化的分析 | 第44页 |
| ·关于M-L 和L-M 消减cDNA 文库中功能基因的分析 | 第44-47页 |
| ·关于实验动物样本数选择的问题 | 第47-48页 |
| 第三章 GBTN1A1 基因的克隆及生物信息学分析 | 第48-75页 |
| ·材料和方法 | 第48-55页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-55页 |
| ·结果 | 第55-71页 |
| ·山羊乳腺总RNA 的提取 | 第55页 |
| ·山羊嗜乳脂蛋白基因（gBTN1A1）CDs 区的克隆 | 第55页 |
| ·gBTN1A1 基因3'非翻译区（UTR）和5'非翻译区（UTR）的克隆 | 第55-56页 |
| ·gBTN1A1 基因全长cDNA 序列分析 | 第56页 |
| ·gBTN1A1 基因内含子克隆及分析 | 第56页 |
| ·gBTN1A1 基因外显子与内含子结构分析 | 第56-57页 |
| ·序列分析 | 第57-64页 |
| ·gBTN1A1 结构预测 | 第64-71页 |
| ·讨论 | 第71-75页 |
| 第四章 GBTN1A1 基因的表达量分析及其在MCF-7 细胞内的定位 | 第75-85页 |
| ·材料与方法 | 第75-79页 |
| ·材料 | 第75-76页 |
| ·方法 | 第76-79页 |
| ·结果 | 第79-83页 |
| ·RNA 提取结果 | 第79-80页 |
| ·实时定量PCR | 第80页 |
| ·RT-PCR 方法扩增gBTN1A1 基因 | 第80-81页 |
| ·pGEM-T-gBTN1A1 阳性转化子的菌液PCR 筛选与双酶切鉴定 | 第81-82页 |
| ·pEGFP-C1-gBTN1A1 阳性转化子的菌落PCR 筛选与双酶切鉴定 | 第82页 |
| ·gBTN1A1 在MCF-7 细胞内的定位 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| 第五章 GBTN1A1 基因原核表达载体的构建及表达 | 第85-95页 |
| ·材料和方法 | 第85-89页 |
| ·材料 | 第85页 |
| ·方法 | 第85-89页 |
| ·结果 | 第89-93页 |
| ·gBTN1A1 基因扩增及pGEM-T-gBTN1A1 重组子的构建 | 第89页 |
| ·pET-32a(+)-gBTN1A1 重组子的构建及鉴定 | 第89-90页 |
| ·目的蛋白的检测 | 第90-93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| ·关于原核表达系统的问题 | 第93页 |
| ·关于稀有密码子的问题 | 第93-95页 |
| 第六章 GBTN1A1 与脂肪酸合成代谢的关系及其对MCF-7 细胞生长的影响 | 第95-105页 |
| ·材料与方法 | 第95-98页 |
| ·材料 | 第95-96页 |
| ·方法 | 第96-98页 |
| ·结果 | 第98-103页 |
| ·RT-PCR 方法扩增gBTN1A1 基因 | 第98页 |
| ·pGEM-T-gBTN1A1 阳性转化子的菌液PCR 筛选与双酶切鉴定 | 第98页 |
| ·pcDNA3.1 | 第98-99页 |
| ·gBTN1A1 表达及其对MCF-7 细胞肪酸组成的影响 | 第99-102页 |
| ·gBTN1A1 对细胞生长的影响 | 第102-103页 |
| ·讨论 | 第103-105页 |
| ·关于机体内脂肪酸合成的问题 | 第103页 |
| ·关于gBTN1A1 蛋白调控MCF-7 细胞系中脂肪酸代谢的问题 | 第103-104页 |
| ·关于gBTN1A1 影响MCF-7 细胞增殖问题 | 第104-105页 |
| 第七章 GBTN1A1 基因启动子的克隆及活性分析 | 第105-119页 |
| ·材料和方法 | 第105-108页 |
| ·材料 | 第105页 |
| ·方法 | 第105-108页 |
| ·结果 | 第108-116页 |
| ·gBTN1A1 基因启动子BTNP1 和PTNP2 的克隆 | 第108-110页 |
| ·pCAT3-Basic-BTNP1、pCAT3-Basic-BTNP2 重组质粒双酶切鉴定 | 第110页 |
| ·BTNP1 和BTNP2 活性分析 | 第110-111页 |
| ·PRL 对BTNP1 启动子的调控分析 | 第111-112页 |
| ·BTN1A1 基因5'侧翼区域及5'UTR 序列特征分析 | 第112-116页 |
| ·讨论 | 第116-119页 |
| ·关于CAT 报告基因灵敏度分析 | 第116-117页 |
| ·关于BTNP1 和BTNP2 启动子活性分析 | 第117页 |
| ·关于催乳素对BTNP1 活性的影响 | 第117页 |
| ·关于不同物种BTN1A1 基因启动子结构分析 | 第117-119页 |
| 第八章 结论、创新点及进一步研究计划 | 第119-121页 |
| ·结论 | 第119-120页 |
| ·创新点 | 第120页 |
| ·下一步研究计划 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-136页 |
| 缩略词 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 作者简介 | 第138页 |
