| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| ·活性氧的产生、危害及其清除 | 第9-15页 |
| ·活性氧的产生机制 | 第9页 |
| ·活性氧的危害 | 第9-10页 |
| ·活性氧清除机制 | 第10-15页 |
| ·非酶促清除系统 | 第10-11页 |
| ·酶促清除系统 | 第11-15页 |
| ·植物基因克隆的研究方法 | 第15-19页 |
| ·化学合成法获得目的基因 | 第15-16页 |
| ·PCR 技术获取目的基因 | 第16-18页 |
| ·反转录PCR | 第16页 |
| ·依据基因部分序列信息获得基因全长序列 | 第16-18页 |
| ·筛选基因文库获取目的基因 | 第18页 |
| ·转座子标签法获得目的基因 | 第18页 |
| ·图位克隆获得目的基因 | 第18页 |
| ·mRNA 差别显示技术获得差异表达的基因 | 第18-19页 |
| ·本试验的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 材料和方法 | 第20-31页 |
| ·试验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌种与载体 | 第20页 |
| ·酶及生化试剂 | 第20页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·试验方法 | 第21-31页 |
| ·苹果叶片总RNA 的提取 | 第21-22页 |
| ·APX 基因的获得 | 第22-26页 |
| ·反转录 | 第22页 |
| ·APX 基因中间片段的获得 | 第22-23页 |
| ·APX 基因3’端的获得 | 第23页 |
| ·APX 基因5’端的获得 | 第23-25页 |
| ·APX 基因全长的获得 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR 扩增产物的克隆 | 第26-28页 |
| ·目的DNA 片段的获得 | 第26页 |
| ·目的DNA 与pMD18-T 载体的连接 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·重组质粒导入大肠杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第27-28页 |
| ·基因序列的测定及分析 | 第28页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第28-31页 |
| ·构建过程 | 第28页 |
| ·表达载体的PCR 鉴定 | 第28页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第28-30页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第30页 |
| ·农杆菌鉴定 | 第30-31页 |
| 第三章 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·苹果叶片总RNA 的提取结果 | 第31页 |
| ·APX 基因cDNA 中间片段的克隆 | 第31-32页 |
| ·APX 基因cDNA 中间片段的获得 | 第31页 |
| ·APX 基因cDNA 中间片段重组质粒的鉴定 | 第31-32页 |
| ·APX 基因cDNA 中间片段的测序结果 | 第32页 |
| ·APX 基因cDNA 3’端的克隆 | 第32-34页 |
| ·DHAR 基因3’端的获得 | 第32-33页 |
| ·APX 基因cDNA 3’端片段重组质粒的鉴定 | 第33页 |
| ·APX 基因cDNA 3’端片段的序列测定 | 第33-34页 |
| ·APX 基因cDNA5’端的克隆 | 第34-36页 |
| ·APX 基因cDNA 5’端的获得 | 第34-35页 |
| ·APX 基因cDNA 5’端片段重组质粒的鉴定 | 第35页 |
| ·APX 基因cDNA 5’端片段的序列测定 | 第35-36页 |
| ·APX 基因cDNA 全长的克隆 | 第36-39页 |
| ·APX 基因cDNA 全长的获得 | 第36页 |
| ·APX 基因cDNA 全长重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
| ·APX 基因cDNA 全长的序列测定及结果分析 | 第37-39页 |
| ·植物表达载体pUAm+pSB166－APX 的构建及其鉴定 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-43页 |
| ·苹果APX 基因克隆的意义 | 第41页 |
| ·关于RNA 的提取 | 第41页 |
| ·关于PCR 扩增的问题 | 第41-42页 |
| ·关于巢式PCR 扩增的问题 | 第42页 |
| ·关于RACE 技术 | 第42-43页 |
| 第五章 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |