| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| ·引言 | 第13-14页 |
| ·Group Ⅱ intron的研究进展 | 第14-24页 |
| ·Group Ⅱ intron的分布 | 第14-15页 |
| ·Group Ⅱ intron的结构 | 第15页 |
| ·GroupⅡ intron的剪接反应 | 第15-17页 |
| ·Group Ⅱ intron的移动反应 | 第17页 |
| ·天然Group Ⅱ intron的多样性 | 第17-22页 |
| (1) 细胞器group Ⅱ intron | 第17-20页 |
| (2) 细菌group Ⅱ intron | 第20-22页 |
| ·Group Ⅱ intron的进化 | 第22-23页 |
| ·Group Ⅱ intron在生物技术中的应用 | 第23-24页 |
| ·课题研究的内容、目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第25-38页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·酶与试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·培养基和常用试剂的配制 | 第27-29页 |
| ·实验方法 | 第29-36页 |
| ·Ecoli DH5α菌种的培养 | 第29页 |
| ·质粒提取 | 第29-30页 |
| ·酶切反应 | 第30-31页 |
| ·电泳分析与分离 | 第31页 |
| ·酶切片断的胶回收 | 第31-32页 |
| ·连接反应 | 第32页 |
| ·E.coli DH5a的化学感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·重组质粒的转化 | 第32-33页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第33页 |
| ·诱导与表达 | 第33-34页 |
| ·总RNA的提取 | 第34页 |
| ·甲醛变性电泳 | 第34-35页 |
| ·逆转录反应 | 第35-36页 |
| ·实验流程 | 第36-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-56页 |
| ·含有intron的载体(pDR-1D)的构建 | 第38-43页 |
| ·质粒DNA(pTR-1DE1)的提取 | 第38-39页 |
| ·含有intron一段序列的获得 | 第39页 |
| ·与载体的连接反应 | 第39-40页 |
| ·通过α—互补筛选转化子 | 第40-41页 |
| ·含有intron的重组质粒(pDR-1D)的双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·质粒(pDR-1D)的构建图 | 第42-43页 |
| ·含有成熟酶基因的质粒(pAR-RTL2)的构建 | 第43-49页 |
| ·含有成熟酶的一段基因的获得 | 第43-44页 |
| ·与载体的连接反应 | 第44页 |
| ·质粒pTR-1DE2的双酶切反应 | 第44-45页 |
| ·载体pAR3的双酶切反应 | 第45-46页 |
| ·两种双酶切产物的连接 | 第46-47页 |
| ·重组质粒pAR-RTL2的酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pAR-RTL2的构建图 | 第48-49页 |
| ·含有双质粒菌株的获得 | 第49-50页 |
| ·含有单质粒菌株的获得 | 第49页 |
| ·含有双质粒菌株获得的方法 | 第49页 |
| ·含有双质粒菌株的获得 | 第49-50页 |
| ·诱导表达条件的选择 | 第50-51页 |
| ·含有双质粒菌株的总RNA的提取 | 第51页 |
| ·RTL蛋白对Intron I1自剪接的作用 | 第51-53页 |
| ·RTLm对intron I1自剪接的作用 | 第53-54页 |
| ·RTL蛋白对intron dnaN1～4自剪接的作用 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-61页 |
| ·R/R基因的确定 | 第56-58页 |
| ·Trichodesmium erythraeum中多种intron和intein的发现 | 第56-57页 |
| ·编码多种intron和intein的Ter RIR基因的鉴定 | 第57-58页 |
| ·intron序列的分析和鉴定 | 第58页 |
| ·dnaN基因和它的intron | 第58-59页 |
| ·Group Ⅱ intron分布与传统认识相悖 | 第59页 |
| ·intron和intein共同存在于一个基因 | 第59页 |
| ·基因表达调控 | 第59页 |
| ·Group Ⅱ intron研究在进化上的意义 | 第59-60页 |
| ·两种group Ⅱ intron可能分别来自于不同的祖先 | 第60页 |
| ·在生物技术上的应用前景 | 第60-61页 |
| 第五章 结论 | 第61-62页 |
| 1.结论 | 第61页 |
| 2.创新点 | 第61页 |
| 3.展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
