| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| ·炭疽的致病机制与途径 | 第11-13页 |
| ·炭疽的感染模式 | 第13-14页 |
| ·炭疽的表面粘附蛋白BslA蛋白 | 第14-16页 |
| ·炭疽芽胞杆菌疫苗的研究现状 | 第16-18页 |
| ·论文研究立题意义与研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-36页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·质粒、菌株、细胞株与实验动物 | 第19页 |
| ·酶、试剂与培养基 | 第19页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳试剂 | 第19页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂 | 第19-20页 |
| ·Western blot相关试剂 | 第20页 |
| ·ProBondTM Purification system相关试剂 | 第20-21页 |
| ·ELISA相关试剂 | 第21页 |
| ·间接免疫荧光相关试剂耗材 | 第21页 |
| ·实验主要仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-36页 |
| ·炭疽杆菌的培养 | 第22页 |
| ·炭疽杆菌的基因组提取 | 第22-24页 |
| ·PCR引物及反应条件 | 第24-25页 |
| ·质粒提取 | 第25-26页 |
| ·酶切反应 | 第26页 |
| ·核酸回收 | 第26-27页 |
| ·PCR与酶切产物的纯化 | 第27页 |
| ·连接反应 | 第27页 |
| ·化学转化 | 第27-28页 |
| ·测序和DNA序列分析 | 第28页 |
| ·重组蛋白可溶性诱导表达 | 第28页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第29页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
| ·间接ELISA法测量小鼠血清抗体效价 | 第30页 |
| ·Western blot | 第30-31页 |
| ·细胞的培养与传代 | 第31页 |
| ·间接免疫荧光实验 | 第31-32页 |
| ·流式细胞实验 | 第32页 |
| ·细菌粘附抑制试验 | 第32-33页 |
| ·荧光显微镜实验 | 第33-34页 |
| ·SWISS-MODEL蛋白质结构预测 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-59页 |
| ·炭疽芽胞杆菌BslA_((260-652))蛋白的表达纯化与黏附功能鉴定 | 第36-44页 |
| ·pET28a-BslA表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·重组BslA_((260-652))蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·BslA_((260-652))重组蛋白的纯化 | 第38-39页 |
| ·动物免疫和抗血清制备 | 第39页 |
| ·抗血清生物活性分析 | 第39-40页 |
| ·间接免疫荧光分析重组BslA_((260-652))黏附功能分析 | 第40-41页 |
| ·流式细胞分析重组BslA_((260-652))黏附功能 | 第41页 |
| ·BslA_((260-652))蛋白及其多抗对炭疽杆菌A16R黏附功能的影响 | 第41-44页 |
| ·EGFP重组菌的构建、表达、纯化与功能鉴定 | 第44-46页 |
| ·pET28a-EGFP载体构建 | 第44-45页 |
| ·重组pET28a-EGFP蛋白表达、纯化与功能验证 | 第45-46页 |
| ·BslA蛋白核心结构域的鉴定 | 第46-57页 |
| ·第一次截短与重组菌的构建 | 第48-49页 |
| ·三个重组蛋白表达、纯化 | 第49-50页 |
| ·三段截短片段的功能鉴定 | 第50-52页 |
| ·第二次截短与重组菌的构建 | 第52-53页 |
| ·二次截短重组蛋白表达、纯化 | 第53-54页 |
| ·二次截短重组蛋白的功能鉴定 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士期间发表文章 | 第65页 |
