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萝卜细胞质雄性不育胞质和核基因的分子标记的开发及其分子特征

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-11页
缩略词表第11-12页
第一章 十字花科植物雄性不育及育性恢复研究进展第12-31页
   ·十字花科植物雄性不育的来源第12-16页
     ·天然雄性不育第12-13页
     ·杂交产生的雄性不育第13-14页
     ·原生质体融合获得雄性不育第14-15页
     ·基因工程获得雄性不育第15-16页
   ·植物雄性不育的遗传学说第16-17页
     ·三型学说第16页
       ·核质互作型第16页
       ·胞质型第16页
       ·核作用型第16页
     ·二型学说第16页
     ·变异基因假说第16-17页
       ·细胞质雄性不育第16页
       ·细胞核雄性不育第16-17页
       ·核质互作雄性不育第17页
       ·基因型-环境互作雄性不育第17页
     ·多种核质基因对应学说第17页
   ·十字花科植物雄性不育的遗传第17-21页
     ·细胞质雄性不育第17页
     ·细胞核雄性不育第17-21页
       ·显性细胞核雄性不育第18-20页
       ·隐性细胞核雄性不育第20-21页
   ·十字花科作物雄性不育的细胞学研究第21-22页
   ·十字花科作物雄性不育的生理生化研究第22-26页
     ·同工酶第23-24页
     ·物质代谢第24页
     ·植物激素第24-26页
   ·十字花科作物雄性不育的分子生物学研究第26-30页
     ·线粒体基因组与CMS第26-28页
     ·叶绿体基因组与细胞质雄性不育性第28页
     ·十字花科恢复基因对CMS相关基因的调控第28-29页
     ·十字花科植物CMS恢复基因的分子特征第29页
     ·人工创造雄性不育突变体研究第29-30页
   ·本研究的目的与内容第30-31页
     ·研究的目的第30页
     ·研究的内容第30-31页
第二章 萝卜CMS系胞质不育相关基因及分子标记的鉴别第31-44页
   ·前言第31-32页
   ·材料与方法第32-38页
     ·材料第32页
     ·基因组DNA抽提第32-33页
       ·大量抽提法第32-33页
       ·DNA的浓度和质量检测第33页
     ·特异PCR引物合成第33页
     ·特异引物PCR扩增反应体系与程序第33-34页
     ·特异PCR片段的回收第34-35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第35页
     ·特异PCR片段的克隆第35-38页
     ·特异PCR片段的测序第38页
     ·序列分析软件第38页
   ·结果与分析第38-42页
     ·萝卜orf138基因在CMS系统中的表现第38-40页
       ·PCR扩增结果第38-39页
       ·PCR产物的克隆及测序第39-40页
     ·引物组合NWB-F/R扩增产物在CMS系统中的表现第40-42页
       ·PCR扩增结果第40-41页
       ·PCR产物的克隆及测序第41-42页
   ·小结第42-44页
第三章 萝卜细胞质雄性不育核基因的PCR标记的开发及其特征第44-66页
   ·前言第44-45页
   ·材料与方法第45-50页
     ·材料第45页
     ·育性鉴定及取材第45页
     ·基因组DNA抽提第45-46页
       ·大量抽提法第45页
       ·小量抽提法第45页
       ·DNA的浓度和质量检测第45-46页
     ·总RNA的提取和快速检测(供返转录用)第46-47页
     ·RACEs第47-48页
       ·第一链返转录第47页
       ·5'和3' RACE第47-48页
     ·基因池的建立第48页
     ·RAPD-PCR分析第48-49页
     ·扩增产物的检测第49页
     ·遗传距离的计算第49页
     ·目的RAPD-PCR和特异PCR片段的回收克隆测序第49页
     ·序列信息分析软件第49-50页
   ·结果与分析第50-64页
     ·植株育性鉴定结果第50页
     ·RAPD分析结果第50-51页
     ·恢复基因Rfw连锁的SCAR标记的开发第51-53页
     ·SCAR标记SCC06-1894的序列分析第53-54页
     ·CMS核基因rfw连锁SCAR标记的开发第54-56页
     ·恢复基因Rfw连锁的PCR标记的开发第56-57页
     ·CMS恢复基因Rfw与Ogu CMS恢复基因Rfo的关系第57-58页
     ·CMS恢复系9802H中恢复基因Rfo cDNA信息的获得第58-59页
     ·Rfo-like基因的发现第59-62页
     ·Rfo基因与Rfo-like基因表达谱分析第62-64页
   ·小结第64-66页
第四章 萝卜CMS恢复基因的连锁基因—硫酸盐转运蛋白基因的克隆及其特征第66-78页
   ·前言第66-67页
   ·材料与方法第67-69页
     ·材料第67页
       ·鉴定基因拷贝数的群体建立第67页
       ·供Northern杂交分析的植株处理方法第67页
     ·基因组DNA抽提及DNA的浓度和质量检测第67页
     ·RNA提取第67-68页
       ·异硫氰酸胍法抽提(Northern杂交用)第67-68页
       ·总RNA的提取和快速检测(供返转录用)第68页
     ·RACEs第68页
     ·Northern杂交分析(见附录A)第68页
     ·序列分析软件第68-69页
   ·结果与分析第69-77页
     ·CMS恢复系9802H中RSultr3.2A cDNA的克隆第69页
     ·RSultr3.2A cDNA的分子特征第69-71页
     ·RSultr3.2A基因组结构特征第71-73页
     ·RSultr3.2A在萝卜基因组中的拷贝数第73页
     ·缺硫对RSultr3.2A基因表达的影响第73-74页
     ·RSultr3.2A基因表达谱分析第74-75页
     ·cDNA RSultr3.2B的克隆及其分子特征第75-76页
     ·cDNA RSultr3.2B来源分析第76-77页
   ·小结第77-78页
第五章 讨论第78-89页
   ·本实验CMS与NWB CMS和OGU CMS系统不育胞质之间的关系第78-80页
   ·萝卜CMS育性遗传研究第80-83页
   ·植物CMS恢复基因的分子标记第83-84页
   ·植物CMS恢复基因的克隆第84-86页
   ·萝卜CMS恢复基因的连锁基因第86-87页
   ·后续研究展望第87-89页
参考文献第89-108页
附录A NORTHERN杂交分析第108-110页
附录B第110-111页
附录C第111-114页
附录D第114-117页
附录E:发表论文第117-118页
致谢第118页

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