| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 第一章 结核分支杆菌特异的PE/PPE蛋白应用于结核病血清学诊断的研究 | 第13-55页 |
| 第一节 比较基因组学和生物信息学筛选研究的靶基因及技术路线和实验方案的设计 | 第13-16页 |
| 一 靶基因的选择 | 第13-15页 |
| 二 技术路线和实验方案 | 第15-16页 |
| 第二节 基因工程技术研制重组蛋白抗原 | 第16-40页 |
| 一 实验材料和试剂 | 第16-19页 |
| (一) 菌株 | 第16页 |
| (二) 质粒载体 | 第16页 |
| (三) 实验材料和试剂盒 | 第16页 |
| (四) 实验试剂 | 第16-18页 |
| (五) 主要的仪器设备 | 第18-19页 |
| 二 实验方法 | 第19-27页 |
| (一) RNA提取和RT—PCR | 第19-22页 |
| (二) 抗原指数计算 | 第22页 |
| (三) 在E.coil中克隆、表达和纯化重组蛋白 | 第22-27页 |
| (四) Bradford检测法测定纯化后蛋白浓度 | 第27页 |
| (五) 高效液相色谱(HPLC)分析 | 第27页 |
| (六) 质谱分析 | 第27页 |
| 三 实验结果 | 第27-39页 |
| (一) RT-PCR分析检测PE/PPE基因mRNA在体外液体培养M.tuberculosis H37Rv时的表达情况 | 第27页 |
| (二) 抗原指数分析结果 | 第27-30页 |
| (三) 目的基因插入PUC18质粒后测序结果 | 第30页 |
| (四) PCR和酶切鉴定重组质粒 | 第30页 |
| (五) 重组蛋白在大肠杆菌BL21 CodonPlus(DE3)-RP中的表达 | 第30-35页 |
| (六) His-重组蛋白的纯化 | 第35页 |
| (七) 重组蛋白的透析及复性 | 第35页 |
| (八) Bradford检测法测定纯化后蛋白浓度 | 第35页 |
| (九) 高效液相色谱(HPLC)和质谱分析 | 第35-39页 |
| 四.讨论 | 第39-40页 |
| 第三节 重组蛋白抗原在检测临床血清学标本中的应用 | 第40-49页 |
| 一 材料和试剂 | 第40-41页 |
| (一) 临床血清标本 | 第40页 |
| (二) ELISA检测试剂和材料 | 第40-41页 |
| (三) 主要的仪器设备 | 第41页 |
| 二 实验方法 | 第41-42页 |
| (一) ELISA检测重组抗原的血清学特性 | 第41页 |
| (二) 统计方法 | 第41-42页 |
| 三 实验结果 | 第42-46页 |
| 四 讨论 | 第46-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 第二章 综述-结核及结核抗原的研究概况 | 第55-79页 |
| 第一节 结核概况 | 第55-57页 |
| 第二节 分子生物技术与结核新型疫苗和诊断试剂的研究 | 第57-65页 |
| 第三节 结核分支杆菌PE/PPE家族蛋白的研究进展 | 第65-70页 |
| 参考文献 | 第70-79页 |
| 附录 | 第79-92页 |
| 博士在读期间的主要工作 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
