| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·木糖操纵子及 xylA、xylB 基因的研究 | 第11-17页 |
| ·木糖利用基因操纵子的研究 | 第11-14页 |
| ·xylA 与 xylB 的研究 | 第14-17页 |
| ·运动发酵单胞菌代谢及启动子的研究 | 第17-18页 |
| ·木糖异构酶、木酮糖激酶基因在运动发酵单胞菌中的表达及运动发酵单胞菌利用木糖的研究 | 第18-20页 |
| ·本课题的研究目的及研究内容 | 第20-21页 |
| ·研究目的 | 第20-21页 |
| ·研究内容 | 第21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第22-40页 |
| ·实验材料 | 第22-26页 |
| ·菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·质粒提取所需溶液的配制 | 第24-25页 |
| ·酶活测定用试剂的配制 | 第25页 |
| ·蛋白质浓度测定用试剂 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE所需试剂的配制 | 第26页 |
| ·主要设备及仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-40页 |
| ·菌体培养 | 第26-28页 |
| ·大肠杆菌的培养条件 | 第26-28页 |
| ·Z.mobilis CP4 的培养条件 | 第28页 |
| ·考马斯亮蓝G-250 染色测定蛋白质浓度 | 第28-29页 |
| ·超声波处理菌体，制备粗酶液 | 第28-29页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第29页 |
| ·SDS—聚丙烯酰氨凝胶电泳 | 第29-30页 |
| ·木糖异构酶酶活测定 | 第30-31页 |
| ·D-木酮糖标准曲线的测定 | 第30-31页 |
| ·木糖异构酶酶活测定 | 第31页 |
| ·木酮糖激酶酶活测定 | 第31-33页 |
| ·PCR反应 | 第33-34页 |
| ·基因组的提取 | 第33页 |
| ·引物设计与合成 | 第33页 |
| ·PCR反应体系 | 第33-34页 |
| ·酶切反应 | 第34-35页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| ·核酸的乙醇沉淀纯化、回收 | 第35页 |
| ·脱磷反应 | 第35页 |
| ·连接反应 | 第35页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·重组质粒大肠杆菌感受态细胞转化与转化子的筛选 | 第36页 |
| ·重组质粒电穿孔转化Z.mobilis CP4 和转化子的筛选 | 第36页 |
| ·质粒的提取 | 第36-38页 |
| ·SDS-碱裂解法提取大肠杆菌质粒 | 第36-37页 |
| ·Nester 法小量提取 Z.mobilis 质粒 | 第37-38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳中DNA片段的回收 | 第38页 |
| ·菌落PCR筛选Z.mobilis CP4 转化子 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第40-58页 |
| ·pZB21-Peno-xylAB 的构建 | 第40-46页 |
| ·pBSKS-Peno-X的构建 | 第40-44页 |
| ·第一次PCR合成CP4 的eno基因启动子Peno | 第41-42页 |
| ·第二次PCR | 第42页 |
| ·第三次PCR | 第42-43页 |
| ·pBEI(pBSKS-Peno-X)的构建 | 第43-44页 |
| ·pZB21-Peno-xylAB的构建 | 第44-45页 |
| ·pZB21-Peno-xylAB电穿孔转化CP4 | 第45-46页 |
| ·pZB21-Pgap-xylAB 及 pZA22-Pgap- xylAB 的构建 | 第46-54页 |
| ·pBGAP（pBSKS-Pgap）的构建 | 第46-48页 |
| ·Pgap的扩增 | 第46-47页 |
| ·pBGAP(pBSKS-Pgap)的构建 | 第47-48页 |
| ·pBSKS-Pgap-xylAB的构建 | 第48-50页 |
| ·pZB21-Pgap-xylAB及pZA22-Pgap- xylAB的构建 | 第50-52页 |
| ·pZB21-Pgap-xylAB的构建 | 第50-51页 |
| ·pZA22-Pgap-xylAB的构建 | 第51-52页 |
| ·pZB21-Pgap-xylAB电穿孔转化CP4 | 第52-53页 |
| ·pZA22-Pgap-xylAB电穿孔转化CP4 | 第53-54页 |
| ·酶活测定 | 第54-56页 |
| ·CP4（pZB21-Peno-xylAB）的酶活测定 | 第54页 |
| ·CP4（pZB21-Pgap-xylAB）和CP4（pZA22-Pgap-xylAB）的酶活测定 | 第54-55页 |
| ·培养时间对转化子酶活的影响 | 第55-56页 |
| ·SDS-PAGE | 第56-58页 |
| 第四章 结论 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·建议 | 第58-59页 |
| 符号表 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录一 文中涉及到的质粒的酶切图谱 | 第65-71页 |
| 附录二 D- 木酮糖标准曲线 | 第71-72页 |
| 附录三 PBEI测序结果（一） | 第72-73页 |
| 附录四 PBEI测序结果（二） | 第73-74页 |
| 附录五 PBGAP测序结果 | 第74-75页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
