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根癌农杆菌介导人乳铁蛋白基因转化中国水仙的初步研究

1 引言第1-23页
   ·花卉基因工程研究进展第7-12页
     ·花卉花色基因工程第7-8页
     ·花卉花形基因工程第8-9页
     ·花卉香味基因工程第9页
     ·花卉保鲜基因工程第9-10页
     ·花卉抗性基因工程第10-11页
     ·花卉基因工程与花卉传统育种的关系第11-12页
   ·乳铁蛋白第12-18页
     ·乳铁蛋白的来源与分布第12页
     ·人乳铁蛋白的结构第12-13页
     ·乳铁蛋白的主要生物学功能第13-16页
     ·人乳铁蛋白基因第16页
     ·人乳铁蛋白基因异源表达的研究进展第16-18页
   ·农杆菌介导的植物遗传转化研究第18-21页
     ·农杆菌介导的基因转化法的特点第18-19页
     ·农杆菌转化方法的适用范围及局限性第19-20页
     ·农杆菌介导单子叶植物遗传转化的研究进展第20-21页
     ·农杆菌介导的基因转化应注意的问题第21页
   ·本研究的目的与意义第21-23页
2 材料与方法第23-32页
   ·实验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·菌株和质粒第23页
     ·主要试剂和仪器第23-24页
       ·主要试剂第23页
       ·主要仪器第23-24页
     ·培养基第24页
   ·实验方法第24-32页
     ·中国水仙再生体系的建立第24-26页
       ·水仙低温预处理效果试验第24-25页
       ·植物生长调节剂对诱导小鳞茎及愈伤组织的影响第25页
       ·愈伤组织分化第25页
       ·继代培养第25页
       ·生根培养与移栽实验第25-26页
     ·中国水仙遗传转化体系的建立与优化第26-27页
       ·水仙对卡那霉素的基础抗性测定第26页
       ·菌液的制备第26页
       ·转化第26页
       ·GUS检测第26-27页
     ·人乳铁蛋白基因在中国水仙中的转化及分子检测第27-32页
       ·冻融法将携带有hLFc基因的质粒导入农杆菌第27-29页
         ·农杆菌感受态细胞的制备与转化第27-28页
         ·农杆菌质粒DNA的提取与鉴定第28-29页
       ·农杆菌介导的水仙转化第29-30页
         ·材料的预培养第29页
         ·菌液的制备第29页
         ·转化第29页
         ·转化体的筛选及再生培养第29-30页
       ·转基因植株的PCR检测第30-32页
         ·PCR模板的制备第30页
         ·PCR所用引物第30页
         ·PCR检测第30-32页
3 结果与分析第32-45页
   ·中国水仙再生体系的建立第32-36页
     ·低温预处理对水仙鳞茎诱导的效果第32页
     ·植物生长调节剂对诱导水仙小鳞茎的影响第32-34页
     ·植物生长调节剂对愈伤组织的诱导及分化的影响第34-35页
     ·植物生长调节剂对继代培养的效果第35-36页
     ·不同浓度萘乙酸对水仙小鳞茎生根的影响第36页
     ·移栽实验第36页
   ·中国水仙遗传转化体系的建立与优化第36-42页
     ·卡那霉素基础抗性测定第36-37页
     ·预培养天数对转化效率的影响第37-38页
     ·农杆菌菌株及共培养时间对转化效率的影响第38-39页
     ·农杆菌菌液浓度对转化效率的影响第39-40页
     ·侵染时间对转化效率的影响第40页
     ·抑菌剂的抑菌效果第40-41页
     ·AS添加浓度对转化效率的影响第41-42页
   ·人乳铁蛋白基因在中国水仙中的转化及分子检测第42-45页
     ·质粒pBIhLFc导入农杆菌第42-43页
     ·转化体的筛选与植株再生第43-44页
     ·转基因水仙的PCR鉴定第44-45页
4 讨论第45-52页
   ·中国水仙基因转化受体系统的建立第45-46页
   ·中国水仙遗传转化体系的建立与优化第46-48页
   ·转化体的选择方式第48-50页
   ·PCR鉴定中的假阳性现象第50页
   ·后续研究工作与展望第50-52页
缩写词第52-53页
参考文献第53-59页
图版说明第59-60页
中文摘要第60-64页
致谢第64页

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