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马铃薯反义PPO基因遗传转化体系的优化及转基因植株PPO活性、同工酶的分析

一、本研究的目的、意义及技术路线第1-14页
   ·本研究的目的、意义第11-13页
   ·技术路线第13-14页
     ·农杆菌介导的PPO 反义基因导入马铃薯第13页
     ·转基因植株的大田鉴定第13-14页
二、文献综述第14-30页
 1 马铃薯生产现状第14-16页
   ·世界马铃薯生产现状第14页
   ·中国马铃薯生产现状第14-15页
   ·中国马铃薯加工业发展状况第15-16页
 2 中国马铃薯育种研究进展第16-22页
   ·基因工程技术在马铃薯育种中的应用第17-20页
     ·抵抗生物逆境基因工程第17-19页
     ·抵抗非生物逆境基因工程第19页
     ·改善马铃薯产量和品质的基因工程第19-20页
   ·反义RNA 技术第20-22页
     ·反义调节的基本原理第20-21页
     ·反义RNA 技术在植物基因工程领域中的应用第21-22页
       ·抑制果实成熟第21页
       ·植物抗病第21页
       ·花色控制第21页
       ·控制植物淀粉的合成第21页
       ·控制油料植物种子中脂肪酸的合成第21-22页
       ·调空雄性不育第22页
       ·其它方面的应用第22页
 3 植物遗传转化研究进展第22-24页
   ·载体法(农杆菌Ti或Ri质粒介导法)第22-23页
   ·外源DNA 直接转化法第23-24页
 4 多酚氧化酶(POLYPHENOL OXIDASE,简称PPO)的研究进展第24-30页
   ·多酚氧化酶的细胞和组织定位第24-25页
   ·植物多酚氧化酶的生理功能第25-27页
     ·PPO 对植物颜色的影响第25页
     ·PPO 在植物组织内的活性表现及对组织的影响第25页
     ·PPO 与植物抗病性的关系第25-26页
     ·PPO 与植物体生理活性物质的关系第26-27页
   ·植物PPO 的时空表达第27-28页
   ·PPO 分子特点及生物合成第28页
   ·影响PPO 活性的外在因素第28-30页
三、农杆菌介导的PPO 反义基因导入马铃薯的研究第30-42页
 1 材料与方法第30-34页
   ·实验材料第30页
   ·实验药品第30页
   ·实验方法第30-34页
     ·马铃薯高频再生系统的获得第30-31页
     ·Kan 敏感性实验第31页
     ·农杆菌工程菌转化马铃薯第31-32页
     ·愈伤组织的继代培养第32页
     ·转化植株诱导生根和继代培养第32页
     ·转化植株的PCR 鉴定第32-34页
 2 结果与分析第34-39页
   ·马铃薯高频再生系统的获得第34页
   ·外植体材料的卡那霉素(Kan)敏感性实验第34-35页
   ·外植体预培养时间的确定第35-36页
   ·农杆菌工程菌液侵染时间的确定第36-37页
   ·共培养时间的确定第37页
   ·不同外植体的转化效率第37-38页
   ·转化植株的PCR 鉴定第38-39页
 3 讨论第39-42页
四、转基因品系的大田生理活性鉴定及同工酶分析第42-54页
 1 材料与方法第42-45页
   ·材料繁殖第42页
   ·转基因品系生理活性测定及同工酶分析第42-45页
     ·地上茎、叶片、块茎PPO 活性测定第42-43页
     ·块茎蛋白质含量的测定第43页
     ·块茎褐变强度(BD 值)的测定第43页
     ·块茎多酚含量的测定第43-44页
     ·转基因品系过氧化氢酶(CAT)活性的测定第44页
     ·转基因植株叶片与块茎的PPO 同工酶分析第44页
     ·转基因品系叶片与块茎的POD 同工酶分析第44-45页
     ·转基因品系的室内考种第45页
 2 结果分析第45-52页
   ·转基因马铃薯地上茎PPO 活性的差异第45页
   ·转基因马铃薯叶片PPO 活性的动态变化规律第45-46页
   ·转基因马铃薯块茎PPO 活性动态变化规律第46-47页
   ·转基因马铃薯不同组织间PPO 活性的差异第47页
   ·转基因品系块茎褐变强度与PPO 活性的关系第47-48页
   ·转基因品系块茎褐变强度(BD)与多酚含量的关系第48页
   ·转基因马铃薯叶片CAT 活性变化第48-49页
   ·转基因品系块茎中可溶性蛋白质含量第49页
   ·转基因品系PPO、POD 同工酶分析第49-51页
     ·转基因品系叶片PPO 同工酶分析第49页
     ·转基因品系叶片POD 同工酶分析第49-50页
     ·转基因品系块茎PPO 同工酶分析第50-51页
     ·转基因品系块茎POD 同工酶分析第51页
   ·转基因马铃薯的室内考种第51-52页
 3 讨论第52-54页
图版Ⅰ第54-55页
图版Ⅱ第55-56页
图版说明第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-64页
作者简介第64-65页
导师简介第65-67页
独创性声明第67页

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