一、本研究的目的、意义及技术路线 | 第1-14页 |
·本研究的目的、意义 | 第11-13页 |
·技术路线 | 第13-14页 |
·农杆菌介导的PPO 反义基因导入马铃薯 | 第13页 |
·转基因植株的大田鉴定 | 第13-14页 |
二、文献综述 | 第14-30页 |
1 马铃薯生产现状 | 第14-16页 |
·世界马铃薯生产现状 | 第14页 |
·中国马铃薯生产现状 | 第14-15页 |
·中国马铃薯加工业发展状况 | 第15-16页 |
2 中国马铃薯育种研究进展 | 第16-22页 |
·基因工程技术在马铃薯育种中的应用 | 第17-20页 |
·抵抗生物逆境基因工程 | 第17-19页 |
·抵抗非生物逆境基因工程 | 第19页 |
·改善马铃薯产量和品质的基因工程 | 第19-20页 |
·反义RNA 技术 | 第20-22页 |
·反义调节的基本原理 | 第20-21页 |
·反义RNA 技术在植物基因工程领域中的应用 | 第21-22页 |
·抑制果实成熟 | 第21页 |
·植物抗病 | 第21页 |
·花色控制 | 第21页 |
·控制植物淀粉的合成 | 第21页 |
·控制油料植物种子中脂肪酸的合成 | 第21-22页 |
·调空雄性不育 | 第22页 |
·其它方面的应用 | 第22页 |
3 植物遗传转化研究进展 | 第22-24页 |
·载体法(农杆菌Ti或Ri质粒介导法) | 第22-23页 |
·外源DNA 直接转化法 | 第23-24页 |
4 多酚氧化酶(POLYPHENOL OXIDASE,简称PPO)的研究进展 | 第24-30页 |
·多酚氧化酶的细胞和组织定位 | 第24-25页 |
·植物多酚氧化酶的生理功能 | 第25-27页 |
·PPO 对植物颜色的影响 | 第25页 |
·PPO 在植物组织内的活性表现及对组织的影响 | 第25页 |
·PPO 与植物抗病性的关系 | 第25-26页 |
·PPO 与植物体生理活性物质的关系 | 第26-27页 |
·植物PPO 的时空表达 | 第27-28页 |
·PPO 分子特点及生物合成 | 第28页 |
·影响PPO 活性的外在因素 | 第28-30页 |
三、农杆菌介导的PPO 反义基因导入马铃薯的研究 | 第30-42页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
·实验材料 | 第30页 |
·实验药品 | 第30页 |
·实验方法 | 第30-34页 |
·马铃薯高频再生系统的获得 | 第30-31页 |
·Kan 敏感性实验 | 第31页 |
·农杆菌工程菌转化马铃薯 | 第31-32页 |
·愈伤组织的继代培养 | 第32页 |
·转化植株诱导生根和继代培养 | 第32页 |
·转化植株的PCR 鉴定 | 第32-34页 |
2 结果与分析 | 第34-39页 |
·马铃薯高频再生系统的获得 | 第34页 |
·外植体材料的卡那霉素(Kan)敏感性实验 | 第34-35页 |
·外植体预培养时间的确定 | 第35-36页 |
·农杆菌工程菌液侵染时间的确定 | 第36-37页 |
·共培养时间的确定 | 第37页 |
·不同外植体的转化效率 | 第37-38页 |
·转化植株的PCR 鉴定 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-42页 |
四、转基因品系的大田生理活性鉴定及同工酶分析 | 第42-54页 |
1 材料与方法 | 第42-45页 |
·材料繁殖 | 第42页 |
·转基因品系生理活性测定及同工酶分析 | 第42-45页 |
·地上茎、叶片、块茎PPO 活性测定 | 第42-43页 |
·块茎蛋白质含量的测定 | 第43页 |
·块茎褐变强度(BD 值)的测定 | 第43页 |
·块茎多酚含量的测定 | 第43-44页 |
·转基因品系过氧化氢酶(CAT)活性的测定 | 第44页 |
·转基因植株叶片与块茎的PPO 同工酶分析 | 第44页 |
·转基因品系叶片与块茎的POD 同工酶分析 | 第44-45页 |
·转基因品系的室内考种 | 第45页 |
2 结果分析 | 第45-52页 |
·转基因马铃薯地上茎PPO 活性的差异 | 第45页 |
·转基因马铃薯叶片PPO 活性的动态变化规律 | 第45-46页 |
·转基因马铃薯块茎PPO 活性动态变化规律 | 第46-47页 |
·转基因马铃薯不同组织间PPO 活性的差异 | 第47页 |
·转基因品系块茎褐变强度与PPO 活性的关系 | 第47-48页 |
·转基因品系块茎褐变强度(BD)与多酚含量的关系 | 第48页 |
·转基因马铃薯叶片CAT 活性变化 | 第48-49页 |
·转基因品系块茎中可溶性蛋白质含量 | 第49页 |
·转基因品系PPO、POD 同工酶分析 | 第49-51页 |
·转基因品系叶片PPO 同工酶分析 | 第49页 |
·转基因品系叶片POD 同工酶分析 | 第49-50页 |
·转基因品系块茎PPO 同工酶分析 | 第50-51页 |
·转基因品系块茎POD 同工酶分析 | 第51页 |
·转基因马铃薯的室内考种 | 第51-52页 |
3 讨论 | 第52-54页 |
图版Ⅰ | 第54-55页 |
图版Ⅱ | 第55-56页 |
图版说明 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
作者简介 | 第64-65页 |
导师简介 | 第65-67页 |
独创性声明 | 第67页 |