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抗猪轮状病毒VP6单克隆抗体的制备与鉴定

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-9页
1 前言第9-17页
   ·轮状病毒病原特性第9-12页
     ·病毒粒子的结构第9-10页
     ·轮状病毒的抗原及分型第10页
     ·轮状病毒的培养特性第10页
     ·轮状病毒的遗传变异第10-11页
     ·轮状病毒结构蛋白及其功能第11-12页
   ·轮状病毒诊断方法第12-13页
     ·轮状病毒诊断方法及特点第12-13页
     ·猪轮状病毒诊断第13页
   ·抗PRV 单克隆抗体的研究进展第13-15页
     ·国外抗PRV 单克隆抗体的研究进展第14-15页
     ·国内抗PRV 单克隆抗体的研究进展第15页
   ·本课题研究的目的意义第15-17页
2 材料与方法第17-24页
   ·实验材料第17-18页
     ·动物与细胞第17页
     ·病毒第17页
     ·免疫原第17页
     ·主要试剂和溶液第17-18页
     ·主要仪器与耗材第18页
   ·实验方法第18-24页
     ·免疫抗原PRV VP6 的制备第18页
     ·动物免疫第18-19页
     ·间接ELISA 检测方法的建立第19-20页
     ·细胞融合第20-21页
     ·阳性杂交瘤细胞株筛选第21页
     ·杂交瘤细胞的克隆化第21页
     ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第21页
     ·单克隆抗体的大量制备及效价测定第21-22页
     ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第22-23页
     ·PRV VP6 单克隆抗体免疫荧光法检测病毒感染细胞实验第23-24页
3 实验结果第24-30页
   ·抗原的制备第24页
   ·ELISA 检测方法的建立第24-26页
     ·最佳抗原及抗体工作浓度的确定第24-25页
     ·酶标二抗最佳作用时间的确定第25页
     ·最佳封闭液的确定第25页
     ·底物液最佳作用时间的确定第25-26页
   ·细胞融合与筛选第26页
     ·细胞融合率的计算第26页
     ·单克隆抗体的筛选与单克隆杂交瘤细胞株的建立第26页
   ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第26-27页
     ·PRV VP6 特异性单克隆抗体效价第26页
     ·染色体分析结果第26-27页
     ·抗体亚类鉴定结果第27页
     ·杂交瘤细胞株抗体分泌稳定性的测定第27页
   ·单克隆抗体特异性实验第27-28页
   ·免疫荧光实验第28-30页
4 讨论第30-34页
   ·抗PRV VP6 单克隆抗体的特异性及其初步应用效果第30-31页
   ·单克隆抗体制备过程中的几个重要环节第31-34页
5 结论第34-35页
参考文献第35-40页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第40-41页
致谢第41页

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