| 引言 | 第1-33页 |
| 1 胸腺苷酸合成酶的研究进展 | 第9-17页 |
| 2 斑马鱼—一理想的模式生物 | 第17-21页 |
| 3 斑马鱼与人类疾病模型的研究 | 第21-25页 |
| 4 RNA干扰及其应用的研究进展 | 第25-31页 |
| 5 实验技术路线 | 第31-33页 |
| 第一章 斑马鱼胸腺苷酸合成酶基因的克隆与原核表达 | 第33-65页 |
| 第一节 斑马鱼胸腺苷酸合成酶基因的克隆 | 第33-52页 |
| 1.材料与方法 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-41页 |
| 2.实验结果 | 第41-52页 |
| ·总RNA的检测结果 | 第41-42页 |
| ·斑马鱼TS部分cDNA序列的获得 | 第42-43页 |
| ·3’-RACE结果 | 第43-45页 |
| ·5’-RAC结果 | 第45-46页 |
| ·斑马鱼TS序列分析 | 第46-52页 |
| 第二节 斑马鱼胸腺苷酸合成酶的原核表达 | 第52-65页 |
| 1.材料与方法 | 第52-56页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-56页 |
| 2.实验结果 | 第56-62页 |
| ·TS表达载体的构建 | 第56-59页 |
| ·斑马鱼TS蛋白在大肠杆菌的诱导表达 | 第59-60页 |
| ·斑马鱼TS蛋白的纯化 | 第60-61页 |
| ·斑马鱼TS的活性和动力学研究 | 第61-62页 |
| 3 讨论 | 第62-63页 |
| 小结 | 第63-65页 |
| 第二章 TS在斑马鱼不同胚胎发育时期的表达 | 第65-72页 |
| 1.材料与方法 | 第65-68页 |
| ·实验材料 | 第65页 |
| ·实验方法 | 第65-68页 |
| 2.实验结果 | 第68-70页 |
| ·Western检测人的TS抗体和斑马鱼TS蛋白的亲和性 | 第68-69页 |
| ·Western检测斑马鱼不同胚胎时期的TS蛋白的表达 | 第69-70页 |
| 3.讨论 | 第70页 |
| 小结 | 第70-72页 |
| 第三章 Ts基因沉默对斑马鱼胚胎发育的影响 | 第72-82页 |
| 1.材料与方法 | 第72-77页 |
| ·实验材料 | 第72页 |
| ·实验方法 | 第72-77页 |
| 2.实验结果 | 第77-80页 |
| ·shRNA表达载体的酶切鉴定 | 第77页 |
| ·RNAi对斑马鱼胚胎发育的影响 | 第77-79页 |
| ·RNAi对TS蛋白表达的影响 | 第79-80页 |
| 3.讨论 | 第80-81页 |
| 小结 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-104页 |
| 发表文章 | 第104-105页 |
| 附录 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |