致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
第一篇 文献综述 | 第15-45页 |
第一章 植物与微生物的互作和微生物生态研究 | 第15-24页 |
1 根系分泌物对微生物的影响 | 第15-17页 |
2 微生物对植物的影响 | 第17-19页 |
3 引起黄瓜土传病害的重要病原菌及生态研究 | 第19-21页 |
·腐霉菌及其生态学研究 | 第19-20页 |
·引起黄瓜枯萎病的尖孢子镰刀菌及其生态学研究 | 第20-21页 |
4 拮抗菌及其生态学研究 | 第21-24页 |
·拮抗菌的种类 | 第22-23页 |
·拮抗菌在根围与叶围的定殖 | 第23页 |
·影响拮抗细菌种群变化的因子 | 第23-24页 |
第二章 植物病害生物防治的研究概况 | 第24-27页 |
第三章 植物病害生物防治的研究现状 | 第27-31页 |
·生防真菌的开发利用 | 第28-29页 |
·木霉属真菌 | 第28页 |
·毛壳属真菌 | 第28-29页 |
·酵母菌 | 第29页 |
·淡紫拟青霉菌、厚壁孢子轮枝菌及节从菌属真菌 | 第29页 |
·菌根真菌 | 第29页 |
·生防细菌的开发利用 | 第29-30页 |
·植物促生菌(Plant growth-promoting rhizobacteria,简称PGPR) | 第29-30页 |
·放射性土壤农杆菌属(Agrobacterium) | 第30页 |
·巴氏杆菌(Pasteurella) | 第30页 |
·放线菌(Actinomycetes)的开发利用 | 第30页 |
·病原菌无致病力菌株的开发利用 | 第30页 |
·病毒的弱毒株系 | 第30-31页 |
第四章 PGPR的作用机制的研究 | 第31-42页 |
·PGPR促进植物生长的机制 | 第31-33页 |
·植物生长调节作用 | 第31-33页 |
·促进植物的营养功能来促进植物生长 | 第33页 |
·抑制微效病原菌间接促进植物生长 | 第33页 |
·PGPR生物防治的机制 | 第33-42页 |
·抗生作用(Antibiosis) | 第34-35页 |
·营养与空间的竞争 | 第35-39页 |
·营养的竞争 | 第36-37页 |
·空间的竞争 | 第37-39页 |
·重寄生(Parasitism) | 第39页 |
·诱导系统抗性(ISR) | 第39-42页 |
·抗真菌代谢活动 | 第42页 |
·.6 产生抗真菌酶类 | 第42页 |
第五章 目前生物防治中存在的问题及其对策 | 第42-45页 |
·生防菌在植物病害防治中存在的问题 | 第43页 |
·生防菌在田间自然条件下定殖能力差 | 第43页 |
·生防菌的抗药能力差 | 第43页 |
·菌株稳定性问题 | 第43页 |
·解决生防菌在植物病害防治中存在问题的对策 | 第43-44页 |
·展望 | 第44-45页 |
第二篇 研究报告 | 第45-115页 |
第一章 黄瓜根际重要病原与其拮抗菌消长规律的研究 | 第45-52页 |
1 材料与方法 | 第45-47页 |
·供试材料 | 第45-46页 |
·供试黄瓜品种 | 第45页 |
·目标病原菌株 | 第45-46页 |
·培养基 | 第46页 |
·土样的采集 | 第46页 |
·研究方法 | 第46-47页 |
·试验地设计 | 第46页 |
·根际土壤悬浮液制备 | 第46页 |
·病原菌分离、培养和纯化 | 第46-47页 |
·病原菌(Pythium spp.)分离、培养和纯化 | 第46-47页 |
·病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)分离、培养和纯化 | 第47页 |
·拮抗菌筛选、培养和纯化 | 第47页 |
·数据分析方法 | 第47页 |
2 结果 | 第47-50页 |
·不同生育期根围腐霉种群数量变化 | 第47-48页 |
·不同生育期根围尖孢镰刀菌种群数量变化 | 第48-49页 |
·根围病原菌(Pythium spp.& Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum)种群数量与其拮抗菌的相互关系 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
第二章 黄瓜PGPR的分离筛选及对黄瓜苗期病害生物防治的研究 | 第52-63页 |
1 材料与方法 | 第53-56页 |
·材料 | 第53页 |
·土样的采集 | 第53页 |
·供试黄瓜品种 | 第53页 |
·目标病原菌株 | 第53页 |
·培养基 | 第53页 |
·试验方法 | 第53-56页 |
·黄瓜根围细菌的分离 | 第53-54页 |
·PGPR菌株筛选 | 第54-56页 |
·促生筛选法: | 第54-55页 |
·抑菌圈筛选法: | 第55页 |
·PGPR筛选菌株用于田间试验 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-60页 |
·根围细菌的分离 | 第56页 |
·PGPR菌株的筛选 | 第56-60页 |
·促生筛选法: | 第56-59页 |
·PGPR筛选菌株生防效果的田间试验 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
·关于生防细菌的筛选 | 第60-61页 |
·PGPR与植物病害生物防治 | 第61-63页 |
第三章 PGPR菌株的分类鉴定 | 第63-78页 |
1 材料与方法 | 第63-70页 |
·材料 | 第63-64页 |
·供试菌株 | 第63页 |
·试剂 | 第63页 |
·引物合成 | 第63-64页 |
·方法 | 第64-70页 |
·菌株CH1、CH2和CH3形态特征观察和生理生化指标(Buchanan et al.,1984;方中达,1998)测定。 | 第64-67页 |
·格兰氏染色 | 第64页 |
·鞭毛的观察 | 第64页 |
·荧光色素观察 | 第64页 |
·芽孢染色 | 第64-65页 |
·氧化酶反应 | 第65页 |
·接触酶反应 | 第65页 |
·好氧性和厌氧性 | 第65页 |
·碳水化合物发酵 | 第65页 |
·淀粉水解 | 第65-66页 |
·精氨酸双水解 | 第66页 |
·明胶液化 | 第66页 |
·V-P测定 | 第66页 |
·7%NaCl耐盐生长 | 第66页 |
·反硝化 | 第66页 |
·柠檬酸盐的利用 | 第66-67页 |
·丙二酸盐的利用 | 第67页 |
·菌株CH1和CH2基因组DNA的提取(Sambrook et al,2002) | 第67页 |
·16S rDNA基因序列的克隆 | 第67-68页 |
·PCR产物的纯化与回收(参照产品说明书) | 第68页 |
·克隆与筛选 | 第68-70页 |
·16S rDNA基因片段与克隆质粒pGEM-T Vector连接(参照产品说明书) | 第68-69页 |
·感受态细胞的制备(Sambrook et al,2002) | 第69页 |
·连接产物的转化(Sambrook et al,2002) | 第69页 |
·碱裂解法少量提取质粒(Sambrook et al,2002) | 第69-70页 |
·酶切鉴定阳性克隆 | 第70页 |
·16S rDNA序列测定及分析 | 第70页 |
2.结果 | 第70-75页 |
·形态学特征 | 第70-71页 |
·部分生理生化特征 | 第71-72页 |
·菌株CH1和CH2的16S rDNA序列扩增及阳性克隆的鉴定 | 第72页 |
·16S rDNA序列测定及分析 | 第72-75页 |
3 讨论 | 第75-78页 |
第四章 促生菌CH1诱导黄瓜抗猝倒病过程中对活性氧清除系统的影响 | 第78-89页 |
1 材料与方法 | 第78-81页 |
·供试材料与接种处理 | 第78-80页 |
·供试品种 | 第78页 |
·供试菌株 | 第78-79页 |
·病原菌接种体的制备 | 第79页 |
·CH1细菌悬浮液的制备 | 第79页 |
·黄瓜植株的准备 | 第79页 |
·分根试验 | 第79页 |
·接种处理 | 第79页 |
·CH1诱导接种 | 第79-80页 |
·病原菌挑战接种 | 第80页 |
·实验方法 | 第80-81页 |
·丙二醛(MDA)含量测定 | 第80页 |
·超氧阴离子产生速率测定 | 第80页 |
·H_2O_2含量测定 | 第80-81页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)测定 | 第81页 |
·过氧化物酶(POD)测定 | 第81页 |
·过氧化氢酶(CAT)测定 | 第81页 |
2 结果与分析 | 第81-86页 |
·促生菌CH1处理黄瓜对猝倒病的诱抗效果 | 第81-82页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部MDA活性的变化 | 第82页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部超氧阴离子产生速率的变化 | 第82-83页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部H_2O_2含量的变化 | 第83-84页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部SOD活性的变化 | 第84-85页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部POD活性的变化 | 第85页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部CAT活性的变化 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-89页 |
第五章 促生菌诱导黄瓜对猝倒病的抗性时对黄瓜幼苗生长及品质和影响 | 第89-97页 |
1 材料与方法 | 第89-92页 |
·供试材料与接种处理 | 第89-90页 |
·供试品种 | 第89页 |
·供试菌株 | 第89页 |
·CH1细菌悬浮液的制备 | 第89页 |
·黄瓜植株的准备 | 第89-90页 |
·实验方法 | 第90-92页 |
·促芽测定 | 第90页 |
·生长测定 | 第90页 |
·生理指标测定 | 第90-92页 |
·超氧阴离子产生速率测定 | 第90-91页 |
·H_2O_2含量测定 | 第91页 |
·丙二醛(MDA)含量测定 | 第91页 |
·叶片叶绿素含量 | 第91页 |
·蛋白质含量测定 | 第91页 |
·可溶性糖含量测定 | 第91-92页 |
·Vc含量测定 | 第92页 |
2 结果与分析 | 第92-93页 |
·促芽生长平皿试验 | 第92页 |
·植物促生菌CH1对黄瓜生长的影响 | 第92-93页 |
·植物促生菌CH1与CH2对黄瓜幼苗组织中叶绿素、蛋白质、可溶性糖和Vc含量的影响 | 第93页 |
·植物促生菌CH1与CH2对黄瓜幼苗组织中超氧阴离子产生速率、H_2O_2和丙二醛(MDA)含量的影响 | 第93页 |
3 讨论 | 第93-97页 |
第六章 促生菌对黄瓜酚类物质代谢的影响及与抗猝倒病的关系 | 第97-107页 |
1 材料与方法 | 第98-100页 |
·材料及处理 | 第98页 |
·供试品种 | 第98页 |
·供试菌株 | 第98页 |
·试验处理 | 第98页 |
·测定方法 | 第98-100页 |
·苯丙氨酸解氨酶(PAL)测定 | 第98-99页 |
·多酚氧化酶(PPO)测定 | 第99页 |
·阿魏酸的测定 | 第99页 |
·绿原酸的测定 | 第99页 |
·木质素含量测定 | 第99-100页 |
·酚类物质含量的测定 | 第100页 |
·类黄酮含量测定 | 第100页 |
2 结果与分析 | 第100-105页 |
·硅处理对黄瓜叶片PAL活性的影响 | 第100-101页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部PPO活性的变化 | 第101页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部阿魏酸含量的变化 | 第101-102页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部绿原酸含量的变化 | 第102-103页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部木质素含量的变化 | 第103-104页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部总酚含量的变化 | 第104页 |
·CH1处理后黄瓜幼苗根部与叶部类黄酮含量的变化 | 第104-105页 |
3 讨论 | 第105-107页 |
第七章 根围促生菌CH1诱导黄瓜抗炭疽病的研究 | 第107-115页 |
1 材料与方法 | 第107-110页 |
·材料 | 第107-108页 |
·供试黄瓜品种 | 第107页 |
·诱导菌株 | 第107页 |
·挑战病原菌株 | 第107-108页 |
·方法 | 第108-110页 |
·诱导物细菌悬浮液的制备 | 第108页 |
·病菌培养 | 第108页 |
·黄瓜植株的准备 | 第108页 |
·诱导处理 | 第108页 |
·挑战接菌 | 第108页 |
·PGPR菌株CH1对黄瓜炭疽病菌的平板测定 | 第108-109页 |
·不同PGPR菌株对黄瓜炭疽病的诱导 | 第109页 |
·促生菌CH1不同处理方法对诱导黄瓜抗炭疽病的影响 | 第109页 |
·促生菌诱处理后抗炭疽病的持效期的测定 | 第109页 |
·几丁质酶活性测定 | 第109页 |
·β-1,3-葡聚糖酶活性变化 | 第109-110页 |
2 结果与分析 | 第110-112页 |
·PGPR菌株CH1对黄瓜炭疽病菌的平板测定 | 第110页 |
·不同PGPR菌株对黄瓜炭疽病的诱导 | 第110页 |
·促生菌CH1不同处理方法对诱导黄瓜抗炭疽病的影响 | 第110-111页 |
·促生菌CH1诱导黄瓜抗炭疽病持效期的测定 | 第111-112页 |
·CH1处理后接种炭疽病菌的黄瓜根部与叶部中几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性变化 | 第112页 |
3 讨论 | 第112-115页 |
参考文献 | 第115-128页 |
全文小结 | 第128-130页 |
附录A 主要培养基 | 第130-132页 |
附录B 主要溶液与试剂 | 第132-134页 |
附录C 菌株CH1和CH216S rDNA序列的Blast结果 | 第134-136页 |