第一章 前言 | 第1-14页 |
·甲烷利用细菌定义及分类 | 第6页 |
·MMO的类型及在细胞中的分布 | 第6页 |
·甲烷氧化细菌在环保上的意义 | 第6-9页 |
·甲烷氧化细菌所产的sMMO在生物过程上潜在应用评估 | 第9-10页 |
·sMMO的基因编码及基因结构 | 第10-11页 |
·sMMO的研究进展: | 第11-13页 |
·本工作的目的 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-30页 |
·材料 | 第14页 |
·培养基及培养条件 | 第14-15页 |
·常用溶液、缓冲液 | 第15-16页 |
·仪器 | 第16-17页 |
·DNA的提取 | 第17-20页 |
·质粒DNA的转化 | 第20-22页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
·电洗脱法回收DNA片段 | 第22-23页 |
·试剂盒法快速回收DNA片段 | 第23-24页 |
·DNA的连接 | 第24-25页 |
·DNA-DNA杂交 | 第25-27页 |
·PCR扩增DNA片段 | 第27-28页 |
·ABI DNA自动测序系统测定DNA序列 | 第28页 |
·苯酚含量的测定 | 第28页 |
·TCE含量的测定 | 第28页 |
·苯胺的测定 | 第28-30页 |
第三章 甲烷利用细菌的筛选及优化培养 | 第30-35页 |
·土壤样品的采集 | 第30-31页 |
·菌株的分离和初筛 | 第31页 |
·甲烷氧化细菌菌株的复筛 | 第31-32页 |
·YZ[83]生长条件的优化 | 第32-34页 |
·讨论: | 第34-35页 |
第四章 Y2(83)菌株的鉴定 | 第35-45页 |
·Y2(83)菌种初步鉴定 | 第35-36页 |
·Y2(83)菌株的165 r DNA序列分析 | 第36-38页 |
·PCR产物的连接与转化 | 第38页 |
·16srDNA PCR扩增产物的测序 | 第38-39页 |
·Y2(83)菌株的16SrDNA序列同源性比较 | 第39-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第五章 sMMO gene cluster中mmoX基因的部分克隆和序列分析 | 第45-51页 |
·引物设计 | 第45-47页 |
·PCR扩增及产物回收 | 第47页 |
·PCR产物的连接与转化 | 第47-48页 |
·sMMO gene cluster中mmoX基因同源片段的序列测定 | 第48页 |
·Y2(83)mmoX基因片段同源性分析 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第六章 Y2(83)菌株DNA文库的构建 | 第51-58页 |
·Southern blotting探针的制备 | 第51页 |
·Y2(83)总DNA EcoRI酶切的Southern杂交 | 第51页 |
·Y2(83)Z总DNA的部分酶切 | 第51-54页 |
·sMMO gene cluster基因文库的构建 | 第54-55页 |
·基因文库的菌落原位杂交 | 第55页 |
·菌落原位杂交阳性印迹的验证 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-58页 |
第七章 总结 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-65页 |