| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor α TNF α)研究简介 | 第10-19页 |
| ·研究内容简介 | 第10-14页 |
| ·研究方法简介 | 第14-19页 |
| ·基因的克隆: | 第14-16页 |
| ·基因重组技术: | 第16-17页 |
| ·蛋白纯化技术: | 第17-19页 |
| 第二章 黑鲷肿瘤坏死因子cDNA的克隆及特征分析 | 第19-40页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·实验鱼: | 第19页 |
| ·主要化学试剂与仪器 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-29页 |
| ·黑鲷RNA的提取: | 第20-21页 |
| ·RNA产率和质量鉴定 | 第21-22页 |
| ·RACE扩增 | 第22-25页 |
| ·琼脂糖凝胶纯化PCR产物 | 第25-26页 |
| ·目的DNA片段的连接: | 第26页 |
| ·转化及筛选 | 第26-28页 |
| ·测序: | 第28页 |
| ·表达研究 | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28-29页 |
| ·结果 | 第29-38页 |
| ·总RNA的提取及鉴定 | 第29页 |
| ·简并引物扩增 | 第29-30页 |
| ·序列相似性分析 | 第30-31页 |
| ·3’RACE与5’RACE扩增结果 | 第31-33页 |
| ·黑鲷cDNA全序列 | 第33-34页 |
| ·序列分析 | 第34-36页 |
| ·黑鲷TNF α的预测空间结构 | 第36页 |
| ·系统进化树 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR技术分析黑鲷TNF α基因的组织表达和分布 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 黑鲷肿瘤坏死因子(TNF α)基因的体外重组与纯化的研究 | 第40-57页 |
| ·材料 | 第40-43页 |
| ·主要化学试剂: | 第40-41页 |
| ·蛋白提取及SDS电泳溶液的配制: | 第41-43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-49页 |
| ·黑鲷TNF α成熟肽片段的扩增、克隆及鉴定 | 第43-46页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第46-49页 |
| ·结果 | 第49-54页 |
| ·重组rTNF α的克隆 | 第49-51页 |
| ·重组rTNF α的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·rTNF α重组蛋白的纯化 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 总结 | 第57-59页 |
| 主要结论 | 第57页 |
| 其它相关研究工作: | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
