| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 人工染色体转基因研究进展综述 | 第10-25页 |
| 1 YAC转基因的研究 | 第10-14页 |
| ·YACs导入动物细胞的方法 | 第10-12页 |
| ·YAC转基因生产转基因嵌合小鼠 | 第12页 |
| ·YAC作为转基因载体的优点 | 第12-13页 |
| ·YAC作为转基因载体的不足 | 第13-14页 |
| 2 PACs、BACs转基因研究 | 第14-16页 |
| ·PACs、BACs来源及组成元件 | 第14页 |
| ·以BACs为载体生产转基因动物的关键技术 | 第14-16页 |
| 3 MACs、HACs转基因的研究 | 第16-20页 |
| ·构建HACs需要的原件 | 第16页 |
| ·HACs构建类型 | 第16-17页 |
| ·HACs基因表达及表达影响因素 | 第17-20页 |
| ·HAC研究中有待解决的问题 | 第20页 |
| 4 人工染色体转基因小结 | 第20-21页 |
| 5 参考文献 | 第21-25页 |
| 第二章 构建hBMP-7cDNA酵母内打靶载体 | 第25-39页 |
| 1 材料与方法 | 第25-31页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·方法 | 第27-31页 |
| 2 结果 | 第31-36页 |
| ·RT-PCR获得hBMP-7cDNA | 第31-32页 |
| ·PCR产物凝胶回收，T／A克隆到pGEM-T载体，测序结果 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增同源臂 | 第33页 |
| ·5’同源臂、3’同源臂测序结果 | 第33-34页 |
| ·打靶载体构建结果 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| ·RT-PCR获得hBMP-7 cDNA | 第36-37页 |
| ·hBMP-7打靶载体的特征 | 第37页 |
| ·同源臂选择与打靶效率 | 第37-38页 |
| 4 参考文献 | 第38-39页 |
| 第三章 酵母内打靶改造hLF YAC获得hBMP-7嵌合YAC | 第39-53页 |
| 1 材料与方法 | 第39-45页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-45页 |
| 2 结果 | 第45-49页 |
| ·NotI线性化打靶载体 | 第45-46页 |
| ·酵母内同源重组示意图 | 第46页 |
| ·PCR鉴定阳性克隆 | 第46-47页 |
| ·Southern鉴定PCR为阳性的重组子 | 第47-48页 |
| ·脉冲电泳鉴定嵌合YAC的存在 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| ·筛选方法讨论 | 第49-50页 |
| ·PCR鉴定阳性克隆的分析 | 第50页 |
| ·Southern鉴定结果分析 | 第50-51页 |
| ·hBMP-7嵌合体YAC分析 | 第51页 |
| 4 参考文献 | 第51-53页 |
| 第四章 酵母原生质体与山羊胎儿成纤维细胞的融合 | 第53-58页 |
| 1 材料与方法 | 第53-55页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55页 |
| ·G418筛选得到一个抗性细胞单克隆 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| ·YAC转染到动物细胞的方法探讨 | 第55-56页 |
| ·细胞融合法的条件摸索 | 第56页 |
| 4 参考文献 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |