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粘红酵母(Rhodotorula glutinis)CIBAS A1401苯丙氨酸解氨酶(PAL)的分离纯化与性质研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
前言第10-12页
1 实验材料第12-17页
   ·菌株第12页
   ·培养基第12页
     ·诱导培养基第12页
     ·麦芽汁培养基第12页
   ·试剂第12-16页
     ·玻珠破壁缓冲液第12页
     ·Lowry试剂第12-13页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳工作液第13-14页
     ·非变性凝胶电泳工作液第14-15页
     ·考马斯亮蓝染色储存液第15页
     ·标准蛋白第15-16页
     ·介质第16页
     ·正向反应液第16页
     ·透析袋处理液第16页
     ·透析袋保存液第16页
   ·仪器设备第16-17页
2 实验方法第17-24页
   ·酶的纯化第17-22页
     ·菌种的活化第17页
     ·测定菌株生长与PAL酶活关系第17页
     ·菌株的培养与收集第17-18页
     ·粗酶的提取第18页
     ·硫酸铵分级沉淀第18页
     ·脱盐第18-19页
     ·凝胶过滤第19-20页
     ·DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析第20页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第20-22页
     ·酶活性测定第22页
     ·蛋白质含量测定第22页
   ·酶的性质研究第22-24页
     ·温度对PAL的影响第22-23页
     ·pH对PAL的影响第23页
     ·米氏常数(Km)的测定第23页
     ·亚基分子量测定第23页
     ·不同金属离子对酶活性的影响第23-24页
3 结果与讨论第24-34页
   ·酶的分离纯化第24-28页
     ·菌株的活化第24页
     ·粘红酵母CIBAS A1401生长情况与PAL活性的关系第24页
     ·菌体的培养与收集第24-25页
     ·粗酶液的提取第25页
     ·硫酸铵分级沉淀第25-26页
     ·凝胶过滤第26页
     ·DEAE-Sepherose Fast Flow柱层析第26-27页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第27页
     ·粘红酵母CIBAS A1401 PAL的分离纯化结果第27页
     ·蛋白质含量测定第27-28页
     ·酶活性测定第28页
   ·PAL的性质研究第28-34页
     ·最适温度和热稳定性第28-30页
     ·最适pH值和酸碱稳定性第30页
     ·米氏常数(Km值)的测定第30-31页
     ·亚基分子量测定第31-32页
     ·不同金属离子对酶活性的影响第32-34页
小结:第34-35页
参考文献第35-38页
致谢第38-39页
文献综述 苯丙氨酸解氨酶的研究进展第39-67页
 摘要第39-40页
 1 PAL的存在和分布第40-41页
 2 PAL的分离纯化和性质第41页
 3 PAL对植物生理代谢的意义第41-43页
 4 PAL在植物抗逆境中的作用第43-45页
 5 微生物PAL的作用第45-46页
 6 微生物PAL酶源菌种的筛选第46-48页
 7 微生物PAL酶源菌种的改良第48-53页
 8 L-苯丙氨酸生物合成概况第53-56页
 9 PAL的分子生物学研究第56-61页
 10 结束语第61-62页
 参考文献第62-67页
声明第67-25页
图目录第25-27页
 图1 粘红酵母CIBAS A1401PAL活性与细胞生长关系图第25-26页
 图2 DEAE-Sepharose FF柱层析~酶活力图第26-28页
 图3 Lowry检测法标准曲线第28-29页
 图4 粘红酵母CIBAS A1401PAL的温度~酶活曲线第29页
 图5 粘红酵母CIBAS A1401PAL的热稳定第29-30页
 图6 a.粘红酵母CIBAS A1401PAL的pH~酶活曲线第30-31页
  b.粘红酵母CIBAS A1401PAL的酸碱稳定性曲线第30-31页
 图7 Lineweaver-Burk作图第31页
 图8 A.粘红酵母CIBAS A1401 PAL的SDS-聚丙烯酰胺凝胶谱第31-32页
  B.粘红酵母CIBAS A1401 PAL的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱第31-32页
 图9 粘红酵母CIBAS A1401 PAL亚基分子量分析图第32-27页
表目录第27-67页
 表1 粘红酵母 CIBAS A1401 PAL的纯化第27-33页
 表2 金属离子对酶活性的影响第33-67页

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