中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-12页 |
1 实验材料 | 第12-17页 |
·菌株 | 第12页 |
·培养基 | 第12页 |
·诱导培养基 | 第12页 |
·麦芽汁培养基 | 第12页 |
·试剂 | 第12-16页 |
·玻珠破壁缓冲液 | 第12页 |
·Lowry试剂 | 第12-13页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳工作液 | 第13-14页 |
·非变性凝胶电泳工作液 | 第14-15页 |
·考马斯亮蓝染色储存液 | 第15页 |
·标准蛋白 | 第15-16页 |
·介质 | 第16页 |
·正向反应液 | 第16页 |
·透析袋处理液 | 第16页 |
·透析袋保存液 | 第16页 |
·仪器设备 | 第16-17页 |
2 实验方法 | 第17-24页 |
·酶的纯化 | 第17-22页 |
·菌种的活化 | 第17页 |
·测定菌株生长与PAL酶活关系 | 第17页 |
·菌株的培养与收集 | 第17-18页 |
·粗酶的提取 | 第18页 |
·硫酸铵分级沉淀 | 第18页 |
·脱盐 | 第18-19页 |
·凝胶过滤 | 第19-20页 |
·DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析 | 第20页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20-22页 |
·酶活性测定 | 第22页 |
·蛋白质含量测定 | 第22页 |
·酶的性质研究 | 第22-24页 |
·温度对PAL的影响 | 第22-23页 |
·pH对PAL的影响 | 第23页 |
·米氏常数(Km)的测定 | 第23页 |
·亚基分子量测定 | 第23页 |
·不同金属离子对酶活性的影响 | 第23-24页 |
3 结果与讨论 | 第24-34页 |
·酶的分离纯化 | 第24-28页 |
·菌株的活化 | 第24页 |
·粘红酵母CIBAS A1401生长情况与PAL活性的关系 | 第24页 |
·菌体的培养与收集 | 第24-25页 |
·粗酶液的提取 | 第25页 |
·硫酸铵分级沉淀 | 第25-26页 |
·凝胶过滤 | 第26页 |
·DEAE-Sepherose Fast Flow柱层析 | 第26-27页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
·粘红酵母CIBAS A1401 PAL的分离纯化结果 | 第27页 |
·蛋白质含量测定 | 第27-28页 |
·酶活性测定 | 第28页 |
·PAL的性质研究 | 第28-34页 |
·最适温度和热稳定性 | 第28-30页 |
·最适pH值和酸碱稳定性 | 第30页 |
·米氏常数(Km值)的测定 | 第30-31页 |
·亚基分子量测定 | 第31-32页 |
·不同金属离子对酶活性的影响 | 第32-34页 |
小结: | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
文献综述 苯丙氨酸解氨酶的研究进展 | 第39-67页 |
摘要 | 第39-40页 |
1 PAL的存在和分布 | 第40-41页 |
2 PAL的分离纯化和性质 | 第41页 |
3 PAL对植物生理代谢的意义 | 第41-43页 |
4 PAL在植物抗逆境中的作用 | 第43-45页 |
5 微生物PAL的作用 | 第45-46页 |
6 微生物PAL酶源菌种的筛选 | 第46-48页 |
7 微生物PAL酶源菌种的改良 | 第48-53页 |
8 L-苯丙氨酸生物合成概况 | 第53-56页 |
9 PAL的分子生物学研究 | 第56-61页 |
10 结束语 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
声明 | 第67-25页 |
图目录 | 第25-27页 |
图1 粘红酵母CIBAS A1401PAL活性与细胞生长关系图 | 第25-26页 |
图2 DEAE-Sepharose FF柱层析~酶活力图 | 第26-28页 |
图3 Lowry检测法标准曲线 | 第28-29页 |
图4 粘红酵母CIBAS A1401PAL的温度~酶活曲线 | 第29页 |
图5 粘红酵母CIBAS A1401PAL的热稳定 | 第29-30页 |
图6 a.粘红酵母CIBAS A1401PAL的pH~酶活曲线 | 第30-31页 |
b.粘红酵母CIBAS A1401PAL的酸碱稳定性曲线 | 第30-31页 |
图7 Lineweaver-Burk作图 | 第31页 |
图8 A.粘红酵母CIBAS A1401 PAL的SDS-聚丙烯酰胺凝胶谱 | 第31-32页 |
B.粘红酵母CIBAS A1401 PAL的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱 | 第31-32页 |
图9 粘红酵母CIBAS A1401 PAL亚基分子量分析图 | 第32-27页 |
表目录 | 第27-67页 |
表1 粘红酵母 CIBAS A1401 PAL的纯化 | 第27-33页 |
表2 金属离子对酶活性的影响 | 第33-67页 |