| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1 实验材料 | 第12-17页 |
| ·菌株 | 第12页 |
| ·培养基 | 第12页 |
| ·诱导培养基 | 第12页 |
| ·麦芽汁培养基 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12-16页 |
| ·玻珠破壁缓冲液 | 第12页 |
| ·Lowry试剂 | 第12-13页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳工作液 | 第13-14页 |
| ·非变性凝胶电泳工作液 | 第14-15页 |
| ·考马斯亮蓝染色储存液 | 第15页 |
| ·标准蛋白 | 第15-16页 |
| ·介质 | 第16页 |
| ·正向反应液 | 第16页 |
| ·透析袋处理液 | 第16页 |
| ·透析袋保存液 | 第16页 |
| ·仪器设备 | 第16-17页 |
| 2 实验方法 | 第17-24页 |
| ·酶的纯化 | 第17-22页 |
| ·菌种的活化 | 第17页 |
| ·测定菌株生长与PAL酶活关系 | 第17页 |
| ·菌株的培养与收集 | 第17-18页 |
| ·粗酶的提取 | 第18页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第18页 |
| ·脱盐 | 第18-19页 |
| ·凝胶过滤 | 第19-20页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析 | 第20页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第20-22页 |
| ·酶活性测定 | 第22页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第22页 |
| ·酶的性质研究 | 第22-24页 |
| ·温度对PAL的影响 | 第22-23页 |
| ·pH对PAL的影响 | 第23页 |
| ·米氏常数(Km)的测定 | 第23页 |
| ·亚基分子量测定 | 第23页 |
| ·不同金属离子对酶活性的影响 | 第23-24页 |
| 3 结果与讨论 | 第24-34页 |
| ·酶的分离纯化 | 第24-28页 |
| ·菌株的活化 | 第24页 |
| ·粘红酵母CIBAS A1401生长情况与PAL活性的关系 | 第24页 |
| ·菌体的培养与收集 | 第24-25页 |
| ·粗酶液的提取 | 第25页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第25-26页 |
| ·凝胶过滤 | 第26页 |
| ·DEAE-Sepherose Fast Flow柱层析 | 第26-27页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
| ·粘红酵母CIBAS A1401 PAL的分离纯化结果 | 第27页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第27-28页 |
| ·酶活性测定 | 第28页 |
| ·PAL的性质研究 | 第28-34页 |
| ·最适温度和热稳定性 | 第28-30页 |
| ·最适pH值和酸碱稳定性 | 第30页 |
| ·米氏常数(Km值)的测定 | 第30-31页 |
| ·亚基分子量测定 | 第31-32页 |
| ·不同金属离子对酶活性的影响 | 第32-34页 |
| 小结: | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 文献综述 苯丙氨酸解氨酶的研究进展 | 第39-67页 |
| 摘要 | 第39-40页 |
| 1 PAL的存在和分布 | 第40-41页 |
| 2 PAL的分离纯化和性质 | 第41页 |
| 3 PAL对植物生理代谢的意义 | 第41-43页 |
| 4 PAL在植物抗逆境中的作用 | 第43-45页 |
| 5 微生物PAL的作用 | 第45-46页 |
| 6 微生物PAL酶源菌种的筛选 | 第46-48页 |
| 7 微生物PAL酶源菌种的改良 | 第48-53页 |
| 8 L-苯丙氨酸生物合成概况 | 第53-56页 |
| 9 PAL的分子生物学研究 | 第56-61页 |
| 10 结束语 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 声明 | 第67-25页 |
| 图目录 | 第25-27页 |
| 图1 粘红酵母CIBAS A1401PAL活性与细胞生长关系图 | 第25-26页 |
| 图2 DEAE-Sepharose FF柱层析~酶活力图 | 第26-28页 |
| 图3 Lowry检测法标准曲线 | 第28-29页 |
| 图4 粘红酵母CIBAS A1401PAL的温度~酶活曲线 | 第29页 |
| 图5 粘红酵母CIBAS A1401PAL的热稳定 | 第29-30页 |
| 图6 a.粘红酵母CIBAS A1401PAL的pH~酶活曲线 | 第30-31页 |
| b.粘红酵母CIBAS A1401PAL的酸碱稳定性曲线 | 第30-31页 |
| 图7 Lineweaver-Burk作图 | 第31页 |
| 图8 A.粘红酵母CIBAS A1401 PAL的SDS-聚丙烯酰胺凝胶谱 | 第31-32页 |
| B.粘红酵母CIBAS A1401 PAL的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱 | 第31-32页 |
| 图9 粘红酵母CIBAS A1401 PAL亚基分子量分析图 | 第32-27页 |
| 表目录 | 第27-67页 |
| 表1 粘红酵母 CIBAS A1401 PAL的纯化 | 第27-33页 |
| 表2 金属离子对酶活性的影响 | 第33-67页 |