甘蔗与黑穗病菌互作的基因差异表达研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-17页 |
| ·甘蔗黑穗病研究现状及其研究意义 | 第8-11页 |
| ·甘蔗黑穗病侵染流行特点的研究 | 第8页 |
| ·甘蔗黑穗病菌生理小种的研究 | 第8-9页 |
| ·甘蔗对黑穗病抗性机制的研究 | 第9-10页 |
| ·甘蔗黑穗病抗性鉴定 | 第10-11页 |
| ·差异显示技术及其应用 | 第11-17页 |
| ·差异显示技术的原理和实验程序 | 第12-13页 |
| ·差异显示技术的应用 | 第13-15页 |
| ·基因的鉴定与克隆 | 第13页 |
| ·研究激素对植物发育的影响 | 第13页 |
| ·研究植物发育过程 | 第13-14页 |
| ·研究抗病机制 | 第14页 |
| ·研究次生代谢途径 | 第14页 |
| ·研究抗冷机理 | 第14-15页 |
| ·DDRT-PCR技术的优点 | 第15-16页 |
| ·差异显示技术的缺陷 | 第16页 |
| ·DDRT-PCR技术的改进 | 第16-17页 |
| ·引物的设计 | 第16-17页 |
| ·假阳性的排除 | 第17页 |
| 2 供试材料与方法 | 第17-25页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| ·供试材料 | 第18-19页 |
| ·仪器与试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·DNA提取(采用SDS碱裂解法) | 第19页 |
| ·接种鉴定 | 第19-20页 |
| ·RNA提取 | 第20页 |
| ·引物的选择 | 第20-21页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第21-22页 |
| ·DD-PCR | 第22页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22页 |
| ·重扩增 | 第22-23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23页 |
| ·连接反应与转化 | 第23-24页 |
| ·质粒的提取 | 第24页 |
| ·质粒PCR扩增 | 第24页 |
| ·测序 | 第24页 |
| ·半定量RT-PCR | 第24-25页 |
| 3 实验结果与分析 | 第25-40页 |
| ·接种鉴定结果与分析 | 第25-26页 |
| ·RNA提取结果与分析 | 第26-27页 |
| ·引物的选择 | 第27-28页 |
| ·差异显示结果 | 第28-29页 |
| ·重扩增差异片段 | 第29-30页 |
| ·阳性克隆的筛选结果 | 第30页 |
| ·插入片段的检测 | 第30-31页 |
| ·测序结果与分析 | 第31-40页 |
| ·RI1序列 | 第31-33页 |
| ·RI2序列 | 第33页 |
| ·RI3序列 | 第33-34页 |
| ·RI4序列 | 第34-35页 |
| ·SI1序列 | 第35-36页 |
| ·SI2序列 | 第36-37页 |
| ·SI3序列 | 第37-38页 |
| ·SI4序列 | 第38页 |
| ·SI5序列 | 第38-39页 |
| ·SI6序列 | 第39页 |
| ·S01序列 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR验证结果 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| ·所用技术方法的特点和改进 | 第40-41页 |
| ·材料的选择 | 第41页 |
| ·接种方法的选择 | 第41页 |
| ·RNA提取方法的改进 | 第41-42页 |
| ·差异条带选择的原则 | 第42页 |
| ·DDRT-PCR技术注意事项 | 第42页 |
| ·RT-PCR技术验证阳性的可行性 | 第42页 |
| ·抗感黑穗病相关基因的意义 | 第42-43页 |
| ·获得全长序列的可用策略 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 缩写词 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |