| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-34页 |
| 1 类胡萝卜素的生物合成及其调控研究进展 | 第13-18页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第13页 |
| ·类胡萝卜素生物合成的主要酶及其基因 | 第13-16页 |
| ·影响类胡萝卜素合成的因子 | 第16-17页 |
| ·类胡萝卜素的基因工程研究 | 第17-18页 |
| 2 类胡萝卜素合成酶基因分离研究进展 | 第18-22页 |
| ·IPI(IPP异构酶基因) | 第18-19页 |
| ·GGPS(GGPP合成酶基因) | 第19-20页 |
| ·PSY(八氢番茄红素合成酶基因) | 第20页 |
| ·PDS(八氢番茄红素脱饱和酶基因) | 第20-21页 |
| ·ZDS((-胡萝卜素脱饱和酶基因) | 第21页 |
| ·LycB和LycE(番茄红素β-环化酶基因和ε-环化酶基因) | 第21页 |
| ·BCH(β-胡萝卜素羟化酶基因) | 第21页 |
| ·CCS(辣椒红／辣椒玉红素合成酶基因) | 第21-22页 |
| ·ZEP(玉米黄素环氧酶基因) | 第22页 |
| ·VDE(堇菜黄素脱环氧酶基因) | 第22页 |
| ·VP14(紫黄质裂解酶基因) | 第22页 |
| 3 植物cDNA文库构建研究进展 | 第22-26页 |
| ·芥蓝cDNA文库的构建及文库质量检测 | 第23页 |
| ·番茄幼苗cDNA文库的构建与植酸酶基因筛选 | 第23页 |
| ·水稻原胚和刚启动分化的幼胚cDNA文库的构建与分析 | 第23-24页 |
| ·玉米叶片cDNA文库的构建及Cab基因克隆 | 第24页 |
| ·水稻cDNA文库的构建及巯基抑制剂cDNA的分离 | 第24页 |
| ·光敏核不育籼稻Hs-1可育和不育幼穗cDNA文库的构建 | 第24-25页 |
| ·应用cDNA文库快速构建法克隆高粱肌动蛋白基因 | 第25页 |
| ·与油梨成熟有关的mRNA的分离及cDNA文库的构建 | 第25页 |
| ·水稻成熟花粉cDNA文库的构建与分析 | 第25页 |
| ·水稻精细胞cDNA文库的构建与分析 | 第25页 |
| ·白粉菌诱导的小黑麦异多附加系M17特异cDNA克隆的研究 | 第25页 |
| ·向日葵恢复系R_9花蕾cDNA文库的构建及Rf_1恢复基因的研究 | 第25-26页 |
| ·缺铁玉米根cDNA文库的构建及蛋白和cDNA差异比较 | 第26页 |
| ·欧洲油菜花粉cDNA文库的构建 | 第26页 |
| 4 植物基因的分离方法研究进展 | 第26-34页 |
| ·序列克隆法 | 第27-28页 |
| ·功能克隆法 | 第28-29页 |
| ·图位克隆法 | 第29-30页 |
| ·减法杂交和差异筛选 | 第30-31页 |
| ·mRNA差别显示PCR法(DDRT-PCR) | 第31页 |
| ·代表性差式分析法(RDA法) | 第31-32页 |
| ·抑制削减杂交法(SSH) | 第32-34页 |
| 第二部分 研究内容 | 第34-71页 |
| 实验一 枸杞叶片cDNA文库的构建 | 第34-56页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·枸杞苗的栽培 | 第34页 |
| ·试剂盒 | 第34-35页 |
| ·各种酶类、生化试剂及化学试剂 | 第35页 |
| ·主要设备 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-49页 |
| ·枸杞叶片总RNA的提取与检测 | 第35-37页 |
| ·mRNA的纯化 | 第37-39页 |
| ·cDNA双链的合成与检测 | 第39-43页 |
| ·cDNA克隆进λExCell噬菌体 | 第43-44页 |
| ·文库容量及重组效率的测定 | 第44-46页 |
| ·cDNA插入片段分析 | 第46-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-51页 |
| ·RNA的提取与mRNA的分离 | 第49页 |
| ·cDNA的合成及小片段的去除 | 第49-50页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| ·建立枸杞叶片cDNA文库的意义 | 第51-52页 |
| ·总RNA的提取与mRNA的分离 | 第52-53页 |
| ·cDNA的合成和纯化 | 第53页 |
| ·载体的选择 | 第53页 |
| ·cDNA文库的完整性 | 第53页 |
| ·λ噬菌体原种的保存 | 第53-56页 |
| 实验二 枸杞果实cDNA文库的构建 | 第56-62页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·枸杞果实 | 第56页 |
| ·试剂盒 | 第56-57页 |
| ·各种酶类、生化试剂及化学试剂 | 第57页 |
| ·主要设备 | 第57页 |
| 2 方法 | 第57-58页 |
| ·总RNA的提取 | 第57页 |
| ·mRNA的纯化 | 第57页 |
| ·cDNA双链的合成与检测 | 第57-58页 |
| ·cDNA克隆进λExCell噬菌体 | 第58页 |
| ·文库容量及重组效率的测定 | 第58页 |
| ·cDNA插入片段分析 | 第58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-59页 |
| ·总RNA的提取及mRNA的分离 | 第58页 |
| ·cDNA的合成与纯化 | 第58页 |
| ·cDNA文库的构建及文库滴度与重组效率的测定 | 第58-59页 |
| ·cDNA插入片段的分析 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| ·总RNA的提取 | 第59页 |
| ·枸杞果实cDNA文库的完整性 | 第59-62页 |
| 实验三 类胡萝卜素生物合成酶基因的分离 | 第62-71页 |
| 1 材料 | 第62-63页 |
| ·试剂盒 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62-63页 |
| ·仪器设备 | 第63页 |
| 2 方法 | 第63-67页 |
| ·药剂配制 | 第63-64页 |
| ·探针的标记 | 第64-65页 |
| ·探针标记后检测 | 第65页 |
| ·噬菌斑DNA转膜 | 第65-66页 |
| ·噬菌斑原位杂交 | 第66-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-68页 |
| ·探针的地高辛标记 | 第67-68页 |
| ·cDNA阳性克隆的筛选 | 第68页 |
| 4 讨论 | 第68-71页 |
| ·本研究的意义 | 第68页 |
| ·基因分离方法的选择 | 第68-69页 |
| ·探针的标记 | 第69页 |
| ·杂交效率和杂交背景 | 第69-70页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81-82页 |
| 英文摘要 | 第82-83页 |
| 附录 | 第83-88页 |
