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香榧AFLP实验体系的优化

中文摘要第1-6页
文献综述第6-20页
 1 分子标记技术的快速发展第6-7页
 2 AFLP的基本原理和技术要点第7-11页
  2.1 AFLP选择性扩增原理第7-8页
  2.2 AFLP分析过程第8页
  2.3 影响AFLP成功的关键因素第8-10页
   2.3.1 限制性内切酶的选择和组合第8-9页
   2.3.2 接头设计第9页
   2.3.3 引物设计第9页
   2.3.4 DNA模板质量和浓度要求第9页
   2.3.5 PCR产物的检测第9-10页
  2.4 AFLP技术特点第10-11页
   2.4.1 技术特点第10页
   2.4.2 AFLP作为DNA指纹技术的评价第10-11页
 3 AFLP分子标记的新进展第11-18页
  3.1 AFLP分子标记在植物研究中的新进展第11-16页
   3.1.1 AFLP在植物遗传图谱中的应用第11-12页
   3.1.2 AFLP在植物分类与鉴定上的应用第12-13页
   3.1.3 AFLP与植物目的基因定位和克隆第13-14页
   3.1.4 AFLP与植物分子标记辅助选择育种第14-15页
   3.1.5 利用AFLP技术研究植物基因表达与调控第15页
   3.1.6 AFLP与植物遗传多样性第15-16页
  3.2 AFLP与微生物研究第16页
   3.2.1 AFLP与微生物遗传图谱构建第16页
  3.2.2 AFLP与微生物遗传多样性研究第16-17页
  3.3 AFLP与动物研究第17-18页
 4 展望第18-20页
正文第20-45页
 1 CTAB法抽提香榧种子胚乳DNA第20-21页
 2 材料与方法第21-23页
  2.1 实验材料第21页
  2.2 实验用品第21页
  2.3 实验试剂第21页
  2.4 实验方法第21-23页
 3 结果与分析第23-27页
  3.1 DNA纯度第23-27页
  3.2 DNA浓度第27页
  3.3 DNA含量、产量第27页
 4 结论与讨论第27-31页
  4.1 香榧种子胚乳DNA抽提方法的可行性第27页
  4.2 有关DNA纯度的讨论第27-28页
  4.3 香榧DNA样品的保存第28页
  4.4 CTAB法抽提香榧DNA注意事项第28-31页
 5 材料与方法第31-37页
  5.1 实验材料第31页
  5.2 实验方法第31-37页
   5.2.1 全量胚乳DNA的提取第32页
   5.2.2 基因组DNA酶切第32页
   5.2.3 连接反应第32-33页
    5.2.3.1 EcoRI—adapter和MseI—adapter的处理第32页
    5.2.3.2 连接反应体系第32-33页
   5.2.4 预扩增第33页
   5.2.5 选择性扩增第33-34页
   5.2.6 变聚丙烯酰胺凝胶电泳第34-36页
    5.2.6.1 前处理第34页
    5.2.6.2 凝胶液的制备第34-35页
    5.2.6.3 凝胶聚合第35页
    5.2.6.4 电泳第35-36页
   5.2.7 银染第36-37页
    5.2.7.1 固定:第36-37页
    5.2.7.2 洗涤第37页
    5.2.7.3 染色和显影第37页
    5.2.7.4 停影第37页
    5.2.7.5 真空干胶第37页
 6 结果与分析第37-42页
  6.1 模板DNA质量和浓度对酶切反应的影响第37-38页
  6.2 酶切反应第38-40页
   6.2.1 酶切反应体系的探索:第38-39页
   6.2.2 反应混合物的组分对酶切反应的影响第39页
   6.2.3 酶浓度对酶切反应的影响第39-40页
   6.2.4 反应时间对酶切效果的影响第40页
   6.2.5 反应温度对酶切反应的影响第40页
  6.3 连接反应的优化第40-41页
     ·反应装置第40-41页
   6.3.2 T_4DNA ligase浓度第41页
   6.3.3 连接反应各组分的重要程度第41页
  6.4 构建香榧指纹图谱的尝试第41-42页
 7 结论与讨论第42-45页
  7.1 DNA模板质量要求第42-43页
  7.2 酶切条件优化第43页
  7.3 DNA连接条件的优化第43-44页
  7.4 构建香榧指纹图谱的尝试第44-45页
ABSTRACT第45-46页
参考文献第46-53页
致谢第53页

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