中文摘要 | 第1-6页 |
文献综述 | 第6-20页 |
1 分子标记技术的快速发展 | 第6-7页 |
2 AFLP的基本原理和技术要点 | 第7-11页 |
2.1 AFLP选择性扩增原理 | 第7-8页 |
2.2 AFLP分析过程 | 第8页 |
2.3 影响AFLP成功的关键因素 | 第8-10页 |
2.3.1 限制性内切酶的选择和组合 | 第8-9页 |
2.3.2 接头设计 | 第9页 |
2.3.3 引物设计 | 第9页 |
2.3.4 DNA模板质量和浓度要求 | 第9页 |
2.3.5 PCR产物的检测 | 第9-10页 |
2.4 AFLP技术特点 | 第10-11页 |
2.4.1 技术特点 | 第10页 |
2.4.2 AFLP作为DNA指纹技术的评价 | 第10-11页 |
3 AFLP分子标记的新进展 | 第11-18页 |
3.1 AFLP分子标记在植物研究中的新进展 | 第11-16页 |
3.1.1 AFLP在植物遗传图谱中的应用 | 第11-12页 |
3.1.2 AFLP在植物分类与鉴定上的应用 | 第12-13页 |
3.1.3 AFLP与植物目的基因定位和克隆 | 第13-14页 |
3.1.4 AFLP与植物分子标记辅助选择育种 | 第14-15页 |
3.1.5 利用AFLP技术研究植物基因表达与调控 | 第15页 |
3.1.6 AFLP与植物遗传多样性 | 第15-16页 |
3.2 AFLP与微生物研究 | 第16页 |
3.2.1 AFLP与微生物遗传图谱构建 | 第16页 |
3.2.2 AFLP与微生物遗传多样性研究 | 第16-17页 |
3.3 AFLP与动物研究 | 第17-18页 |
4 展望 | 第18-20页 |
正文 | 第20-45页 |
1 CTAB法抽提香榧种子胚乳DNA | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-23页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.2 实验用品 | 第21页 |
2.3 实验试剂 | 第21页 |
2.4 实验方法 | 第21-23页 |
3 结果与分析 | 第23-27页 |
3.1 DNA纯度 | 第23-27页 |
3.2 DNA浓度 | 第27页 |
3.3 DNA含量、产量 | 第27页 |
4 结论与讨论 | 第27-31页 |
4.1 香榧种子胚乳DNA抽提方法的可行性 | 第27页 |
4.2 有关DNA纯度的讨论 | 第27-28页 |
4.3 香榧DNA样品的保存 | 第28页 |
4.4 CTAB法抽提香榧DNA注意事项 | 第28-31页 |
5 材料与方法 | 第31-37页 |
5.1 实验材料 | 第31页 |
5.2 实验方法 | 第31-37页 |
5.2.1 全量胚乳DNA的提取 | 第32页 |
5.2.2 基因组DNA酶切 | 第32页 |
5.2.3 连接反应 | 第32-33页 |
5.2.3.1 EcoRI—adapter和MseI—adapter的处理 | 第32页 |
5.2.3.2 连接反应体系 | 第32-33页 |
5.2.4 预扩增 | 第33页 |
5.2.5 选择性扩增 | 第33-34页 |
5.2.6 变聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-36页 |
5.2.6.1 前处理 | 第34页 |
5.2.6.2 凝胶液的制备 | 第34-35页 |
5.2.6.3 凝胶聚合 | 第35页 |
5.2.6.4 电泳 | 第35-36页 |
5.2.7 银染 | 第36-37页 |
5.2.7.1 固定: | 第36-37页 |
5.2.7.2 洗涤 | 第37页 |
5.2.7.3 染色和显影 | 第37页 |
5.2.7.4 停影 | 第37页 |
5.2.7.5 真空干胶 | 第37页 |
6 结果与分析 | 第37-42页 |
6.1 模板DNA质量和浓度对酶切反应的影响 | 第37-38页 |
6.2 酶切反应 | 第38-40页 |
6.2.1 酶切反应体系的探索: | 第38-39页 |
6.2.2 反应混合物的组分对酶切反应的影响 | 第39页 |
6.2.3 酶浓度对酶切反应的影响 | 第39-40页 |
6.2.4 反应时间对酶切效果的影响 | 第40页 |
6.2.5 反应温度对酶切反应的影响 | 第40页 |
6.3 连接反应的优化 | 第40-41页 |
·反应装置 | 第40-41页 |
6.3.2 T_4DNA ligase浓度 | 第41页 |
6.3.3 连接反应各组分的重要程度 | 第41页 |
6.4 构建香榧指纹图谱的尝试 | 第41-42页 |
7 结论与讨论 | 第42-45页 |
7.1 DNA模板质量要求 | 第42-43页 |
7.2 酶切条件优化 | 第43页 |
7.3 DNA连接条件的优化 | 第43-44页 |
7.4 构建香榧指纹图谱的尝试 | 第44-45页 |
ABSTRACT | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
致谢 | 第53页 |