| 1． 综述 | 第1-21页 |
| 1．1． 反义RNA研究概述 | 第7-12页 |
| 1．1．1． 反义RNA | 第7-8页 |
| 1．1．2． 反义RNA的调控方式 | 第8-9页 |
| 1．1．2．1． 在DNA复制水平上 | 第9页 |
| 1．1．2．2． 在转录水平上 | 第9页 |
| 1．1．2．3． 在翻译水平上的调控 | 第9页 |
| 1．1．3． 反义RNA的功能 | 第9-10页 |
| 1．1．3．1． 调控细菌基因的表达 | 第10页 |
| 1．1．3．2． 噬菌体溶菌/溶源状态的控制 | 第10页 |
| 1．1．3．3． IS10转位作用的抑制 | 第10页 |
| 1．1．4． 反义RNA的应用 | 第10-12页 |
| 1．1．4．1． 反义RNA在植物上的应用 | 第11-12页 |
| 1．1．4．1．1． 果实成熟的控制 | 第11页 |
| 1．1．4．1．2． 在植物抗病性方面 | 第11页 |
| 1．1．4．1．3． 在改变花卉的颜色方面 | 第11页 |
| 1．1．4．1．4． 植物淀粉合成的控制 | 第11-12页 |
| 1．1．4．1．5． 油料植物种子中脂肪酸合成的控制 | 第12页 |
| 1．1．4．2． 反义RNA在动物及人类抗病毒研究中的应用 | 第12页 |
| 1．2． 动物转基因研究概述 | 第12-16页 |
| 1．2．1． 动物转基因原理 | 第12-13页 |
| 1．2．2． 动物转基因方法 | 第13-16页 |
| 1．2．2．1． DNA显微注射法 | 第13-14页 |
| 1．2．2．2． 逆转录病毒感染法 | 第14页 |
| 1．2．2．3． 胚胎干细胞介导法 | 第14页 |
| 1．2．2．4． 精子载体介导法 | 第14-15页 |
| 1．2．2．5． 电穿孔法 | 第15页 |
| 1．2．2．6． 基因枪法 | 第15-16页 |
| 1．2．2．7． 微束激光转基因法 | 第16页 |
| 1．3． 水产养殖动物基因工程育种研究 | 第16-19页 |
| 1．3．1． 鱼类基因工程育种 | 第17-18页 |
| 1．3．1．1． 鱼类转基因方法 | 第17页 |
| 1．3．1．2． 鱼类转基因育种中采用的外源基因 | 第17-18页 |
| 1．3．1．3． 受精卵转基因的分子机制 | 第18页 |
| 1．3．2． 虾类基因工程育种 | 第18-19页 |
| 1．4． 本文研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 2． 材料与方法 | 第21-30页 |
| 2．1． 材料 | 第21-23页 |
| 2．2． 常用溶液、培养基的配制 | 第23-24页 |
| 2．3． 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2．4． 方法 | 第25-30页 |
| 2．4．1． 基本方法 | 第25-27页 |
| 2．4．2． 日本对虾肌动蛋白基因启动子和终止子的克隆方法 | 第27-30页 |
| 2．4．2．1． 提取日本对虾染色体 | 第27页 |
| 2．4．2．2． 日本对虾染色体分别用六种平端酶完全酶切 | 第27-28页 |
| 2．4．2．3． 接头制备 | 第28页 |
| 2．4．2．4． 日本对虾染色体酶切片段与接头连接 | 第28页 |
| 2．4．2．5． PCR扩增 | 第28-30页 |
| 3． 结果和分析 | 第30-59页 |
| 3．1． 日本对虾肌动蛋白基因启动子和终止子的克隆 | 第30-45页 |
| 3．1．1． 日本对虾肌动蛋白基因部分cDNA片段的克隆 | 第30-34页 |
| 3．1．2． 日本对虾肌动蛋白基因启动子和终止子的克隆 | 第34-45页 |
| 3．1．2．1． 接头及其引物设计 | 第34页 |
| 3．1．2．2． 日本对虾肌动蛋白基因特异性引物设计 | 第34-35页 |
| 3．1．2．3． 日本对虾肌动蛋白基因启动子的克隆 | 第35-42页 |
| 3．1．2．4． 日本对虾肌动蛋白基因终止子的克隆 | 第42-45页 |
| 3．2． 白斑杆状病毒DNA聚合酶基因的鉴定及其序列特征分析 | 第45-48页 |
| 3．3． 反义RNA转录载体构建 | 第48-51页 |
| 3．3．1．1． 引物设计 | 第48-50页 |
| 3．3．1．2． 片段扩增及酶切 | 第50页 |
| 3．3．1．3． 构建载体 | 第50-51页 |
| 3．4． 带有报告基因的反义RNA转录载体构建 | 第51-53页 |
| 3．5． 转基因实验 | 第53-59页 |
| 3．5．1． 转基因载体的制备 | 第53页 |
| 3．5．2． 日本对虾卵的准备 | 第53-55页 |
| 3．5．3． 转化介质的选择 | 第55-56页 |
| 3．5．4． 转化电压的选定 | 第56页 |
| 3．5．5． 日本对虾转基因实验结果 | 第56-59页 |
| 4． 讨论 | 第59-63页 |
| 4．1． 肌动蛋白基因启动子在转基因载体构建中的应用 | 第59-60页 |
| 4．2． 日本对虾转基因研究的难点 | 第60-61页 |
| 4．3． 关于报告基因 | 第61-63页 |
| 5． 小结 | 第63-64页 |
| 6． 参考文献 | 第64-70页 |
| 7． 致谢 | 第70页 |
