| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 英文名称及缩写 | 第9-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12页 |
| 植物几丁质酶及其在抗病基因工程中的应用 | 第12-19页 |
| 1 植物几丁质酶的生物化学与分子生物学研究 | 第12-16页 |
| 1．1 几丁质酶的酶学特性 | 第12页 |
| 1．2 几丁质酶的分布定位 | 第12-13页 |
| 1．3 几丁质酶的活性诱导 | 第13页 |
| 1．4 几丁质酶的分离纯化 | 第13页 |
| 1．5 几丁质酶的分类特征 | 第13-15页 |
| 1．5．1 几丁质酶的三种分类方法 | 第13页 |
| 1．5．2 四类几丁质酶的结构特征 | 第13-15页 |
| 1．6 几丁质酶的基因结构 | 第15-16页 |
| 2 植物几丁质酶的生物功能及其在抗真菌病基因工程中的应用 | 第16-18页 |
| 2．1 几丁质酶的生物功能 | 第16-17页 |
| 2．1．1 抑制真菌菌丝生长和孢子萌发 | 第16-17页 |
| 2．1．2 释放信号分子 | 第17页 |
| 2．1．3 参与发育调控 | 第17页 |
| 2．1．4 参与共生固氮调控 | 第17页 |
| 2．1．5 抑制细菌生长、虫类消化和发育 | 第17页 |
| 2．2 几丁质酶在抗真菌病基因工程中的应用 | 第17-18页 |
| 3 植物几丁质酶的研究展望 | 第18-19页 |
| 第二篇 研究报告 | 第19页 |
| 豇豆几丁质酶的基因克隆、序列分析及其植物表达载体的构建 | 第19-50页 |
| 1 材料与方法 | 第19-31页 |
| 1．1 材料 | 第19-21页 |
| 1．1．1 用于DNA提取 | 第19页 |
| 1．1．2 用于PCR扩增 | 第19-20页 |
| 1．1．3 用于基因克隆 | 第20-21页 |
| 1．1．4 用于基因序列分析 | 第21页 |
| 1．1．5 用于植物表达载体构建 | 第21页 |
| 1．2 方法 | 第21-31页 |
| 1．2．1 豇豆和菜豆总DNA的提取 | 第21-22页 |
| 1．2．1．1 植物材料的培养 | 第21-22页 |
| 1．2．1．2 DNA的提取 | 第22页 |
| 1．2．2 豇豆几丁质酶成熟蛋白基因和菜豆几丁质酶信号肽基因的PCR扩增 | 第22-23页 |
| 1．2．2．1 PCR反应体系中各种反应物浓度的优化 | 第22-23页 |
| 1．2．2．2 豇豆几丁质酶成熟蛋白基因和菜豆几丁质酶信号肽基因的PCR扩增 | 第23页 |
| 1．2．3 PCR产物的克隆 | 第23-27页 |
| 1．2．3．1 PCR产物的纯化回收 | 第23页 |
| 1．2．3．2 回收产物与T载体的连接 | 第23-24页 |
| 1．2．3．3 重组载体对大肠杆菌的转化 | 第24页 |
| 1．2．3．4 转化体的检测鉴定 | 第24-27页 |
| 1．2．4 几丁质酶基因的序列测定 | 第27页 |
| 1．2．5 几丁质酶基因的序列分析 | 第27页 |
| 1．2．6 植物表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 1．2．7 植物表达载体中外源片段序列的测定 | 第28-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-46页 |
| 2．1 不同器官、提取方法对DNA提取及其PCR扩增效果的影响 | 第31-32页 |
| 2．2 PCR反应条件的优化 | 第32-33页 |
| 2．3 用优化条件PCR扩增豇豆几丁质酶成熟蛋白基因和菜豆几丁质酶信号肽基因 | 第33-34页 |
| 2．4 豇豆几丁质酶成熟蛋白基因和菜豆几丁质酶信号肽基因的克隆与鉴定 | 第34-35页 |
| 2．5 克隆基因的序列测定 | 第35页 |
| 2．6 克隆基因的序列分析 | 第35-46页 |
| 2．6．1 酶切位点的分析 | 第35页 |
| 2．6．2 与有代表性的几种主要植物几丁质酶成熟蛋白基因序列的比较 | 第35-37页 |
| 2．6．3 与有代表性的几种主要植物几丁质酶成熟蛋白氨基酸序列的比较 | 第37-39页 |
| 2．6．4 与两近缘种植物几丁质酶成熟蛋白基因序列和氨基酸序列的比较 | 第39-46页 |
| 2．7 植物表达载体的构建及酶切鉴定 | 第46页 |
| 2．8 植物表达载体中外源片段的序列测定 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| 3．1 关于植物材料总DNA的提取 | 第46-47页 |
| 3．2 关于PCR扩增产物等的电泳分离检测 | 第47页 |
| 3．3 关于完整目的基因的重组及其植物表达载体的构建 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-60页 |
| 全文结论 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-65页 |
| 附录Ⅰ | 第62-64页 |
| 附录Ⅱ | 第64-65页 |
