摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
·Cre/lox位点特异性重组系统及其在植物上的应用 | 第10-15页 |
·Cre/lox特异重组系统的构成及特点 | 第10-11页 |
·Cre/lox重组系统在植物中的应用 | 第11-15页 |
·乙醇诱导系统及其在植物中的应用 | 第15-20页 |
·化学诱导基因表达系统 | 第15-16页 |
·乙醇诱导系统的组成及其特性 | 第16-17页 |
·乙醇诱导系统在植物中的应用 | 第17-20页 |
第二章 引言 | 第20-22页 |
·研究的目的和意义 | 第20页 |
·研究内容 | 第20-21页 |
·乙醇调控的Cre重组酶表达载体以及报告基因激活表达载体的获得 | 第20-21页 |
·PCA13alcRCre、PCA23GUSBar表达载体共转化转基因烟草的获得#12 | 第21页 |
·共转化转基因植株报告基因的表达检测 | 第21页 |
·乙醇诱后报告基因的表达及分子检测 | 第21页 |
·论文新意 | 第21-22页 |
第三章 实验材料与方法 | 第22-32页 |
·材料与方法 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株、质粒 | 第22页 |
·主要缓冲液与细菌培养基 | 第22-23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-32页 |
·PCA13alcRCre、PCA23GusBar共转化烟草及转基因烟草的PCR检测 | 第23-25页 |
·转基因植株的除草剂抗性检测以及GUS表达分析 | 第25页 |
·转基因植株的乙醇诱导处理 | 第25页 |
·乙醇诱导下的Cre基因RT-PCR及Q-PCR表达分析 | 第25-28页 |
·重组删除区域序列的克隆及测序分析 | 第28页 |
·目的片段回收及连接 | 第28-29页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第29-32页 |
第四章 结果与分析 | 第32-42页 |
·PCA13alcRCre和PCA23GusBar共转化转基因烟草的获得 | 第32页 |
·PCA13alcRCre和PCA23GusBar共转化转基因烟草Basta抗性以及Gus表达分析 | 第32-34页 |
·PCA13alcRCre和PCA23GusBar共转化转基因烟草的Basta抗性分析 | 第32-33页 |
·PCA13alcRCre和PCA23GusBar共转化转基因烟草的GUS表达分析#24 | 第33-34页 |
·PCA13alcRCre和PCA23GusBar共转化转基因烟草的分子检测 | 第34-35页 |
·GUS基因乙醇诱导删除及Bar基因的激活表达 | 第35-36页 |
·PCA13alcRCre和PCA23GusBar共转化转基因烟草植株Cre基因表达分析 | 第36-39页 |
·自动诱导植株的Cre基因的本底表达分析 | 第36-37页 |
·乙醇诱导条件下的Cre基因表达的半定量和定量表达分析 | 第37-39页 |
·乙醇诱导Cre/lox系统实现DNA片段的精确重组删除 | 第39-42页 |
第五章 讨论 | 第42-44页 |
第六章 结论 | 第44-46页 |
·基于乙醇调控的Cre/lox重组系统可以用于功能基因的表达调控 | 第44页 |
·乙醇调控的Cre/lox重组系统具有明显的背景表达,应用中需筛选低背景、表达严格受乙醇诱导调控的植株 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-54页 |
附录 | 第54-55页 |
附录Ⅰ 缩写词 | 第54-55页 |
附录Ⅱ 在学期间所发表的论文以及参加的项目 | 第55页 |