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猪抗病相关基因IRGC、MX1的鉴定、多态性分析及在优质猪品系中的应用研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第12-13页
资源家系测定性状的英文缩写第13-14页
第一章 文献综述第14-29页
 1 常用分子遗传标记第15-17页
   ·RFLP标记第15页
   ·DNA指纹标记第15-16页
   ·RAPD标记第16页
   ·微卫星标记第16页
   ·AFLP标记第16-17页
   ·PCR-SSCP标记第17页
 2 新基因分离方法第17-21页
   ·根据EST分离基因第17-20页
   ·比较基因组学在分离新基因中的应用第20页
   ·位置克隆在分离新基因中的应用第20-21页
 3.抗性的遗传与抗病育种第21-25页
   ·抗性的遗传第21页
   ·抗性基因第21-24页
     ·主要组织相容性复合体第22页
     ·NRAMP1基因第22-23页
     ·干扰素基因第23-24页
     ·大肠杆菌F18受体第24页
   ·抗病育种的途径第24-25页
     ·直接选择第24-25页
     ·间接选择第25页
 4 拟分离基因的研究进展第25-27页
   ·免疫相关蛋白家族C(immunity-related GTPase family,cinema,IRGC)基因第25-26页
   ·抗黏病毒1(myxovirus resistance 1,MXI)基因第26-27页
 5 本研究的目的和意义第27-29页
第二章 材料与方法第29-38页
 1 试验材料第29-31页
   ·试验样品及性状测定第29页
     ·DNA样品第29页
     ·组织样品第29页
     ·试验猪群及性状测定第29页
   ·主要仪器和设备第29页
   ·主要药品及试剂第29-30页
   ·缓冲液和常用试剂的配制第30-31页
 2 试验方法第31-37页
   ·猪基因组DNA的提取第31页
   ·基因组DNA的浓度测定和质量检测第31页
   ·利用RT-PCR方法扩增cDNA片段第31-32页
     ·总RNA的提取第31-32页
     ·cDNA第一链的合成第32页
     ·RT-PCR反应第32页
     ·RT-PCR反应产物的检测第32页
   ·候选基因的确定及引物设计第32-34页
     ·候选基因的确定第33页
     ·引物设计第33-34页
   ·PCR产物的回收、纯化、克隆测序第34-35页
     ·PCR产物回收与纯化第34页
     ·回收DNA片段与载体的连接第34页
     ·感受态细胞的制备(CaCl_2法制备感受态)第34-35页
     ·连接产物的转化第35页
     ·阳性克隆子鉴定及测序第35页
   ·生物信息学分析相应软件第35-36页
   ·猪候选基因组序列的扩增及部分SNP的PCR-RFLP检测第36页
     ·引物设计第36页
     ·PCR产物的酶切及检测第36页
   ·组织表达谱分析第36-37页
 3 统计分析第37-38页
   ·分子标记在不同猪种中的等位基因频率及基因型频率计算第37页
   ·分子标记的基因效应分析第37-38页
第三章 结果与分析第38-65页
 1 总RNA的提取第38页
 2 猪IRGC基因第38-47页
   ·根据猪EST信息设计特异性引物及RT-PCR扩增结果第38页
   ·猪IRGC基因cDNA序列生物信息学分析结果第38-41页
   ·推导的IRGC蛋白质的基本特征分析第41-45页
     ·蛋白质的结构及功能域分析第41-42页
     ·IRGC编码氨基酸的保守结构域及3-D结构预测结果第42-43页
     ·猪IRGC蛋白与部分物种IRGC的进化关系第43-45页
   ·猪IRGC基因组序列的克隆、测序和序列分析第45-46页
   ·猪IRGC基因的组织表达谱分析第46-47页
 3 猪MX1基因第47-57页
   ·根据猪EST信息设计特异性引物及RT-PCR扩增结果第47页
   ·猪MX1基因cDNA序列生物信息学分析结果第47-50页
   ·推导的MX1蛋白质的基本特征分析第50-54页
     ·蛋白质的结构及功能域分析第50-51页
     ·MX1编码氨基酸的保守结构域及3-D结构预测结果第51页
     ·猪MX1蛋白与部分物种MX1的进化关系第51-54页
   ·猪MX1基因的组织表达谱分析第54-55页
   ·猪MX1基因组序列的克隆、测序和序列分析第55-56页
   ·猪MX1基因第12内含子遗传变异多态性检测第56-57页
 4 猪MX1基因在优质猪品系中的应用研究第57-65页
   ·猪MX1基因多态性在不同猪群中的分布及应用第57页
   ·猪MX1基因在大梅F2代生产中的应用第57-60页
   ·MX1基因标记辅助选择技术在大白猪选育中的应用第60-62页
     ·大白猪繁殖性能与抗病性能的选育第60-61页
     ·大白后备猪生长发育后备猪生长发育测定结果第61-62页
     ·MX1分子标记在大白猪群体中的应用第62页
   ·MX1基因标记辅助选择在杜洛克中选育中的应用第62-65页
     ·杜洛克繁殖性能的选育第62-63页
     ·杜洛克后备猪生长发育测定结果第63页
     ·MX1分子标记在杜洛克猪群体中的应用第63-65页
第四章 讨论第65-69页
 1 分离猪基因cDNA序列的策略第65页
 2 候选基因序列以及基因结构的分析第65-66页
 3 候选基因预测的蛋白结构域、功能位点的分析第66页
 4 候选基因的SNPs研究第66页
 5 SNPs的生物学效应第66-67页
 6 猪MX1在不同群体中基因型频率分布和遗传效应分析第67页
 7 关于IRGC和MX1蛋白的进化树分析第67-68页
 8 组织表达谱分析第68页
 9 分子标记辅助选择在优质猪品系选育中的应用第68-69页
小结第69-70页
参考文献第70-75页
附录第75-80页
 猪IRGC基因的基因组序列第75-78页
 猪IRGC基因的eDNA序列第78-80页
致谢第80页

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