中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分 MDRA-6 对人白血病细胞凋亡诱导作用 | 第13-23页 |
1. 材料、试剂与仪器 | 第13-15页 |
·细胞系 | 第13页 |
·主要试剂及配制 | 第13-14页 |
·主要仪器 | 第14-15页 |
2. 实验方法及步骤 | 第15-18页 |
·细胞培养 | 第15页 |
·白血病细胞表面DR5 的表达检测 | 第15-16页 |
·mDRA-6 细胞毒性测定(MTT 法) | 第16页 |
·mDRA-6 诱导4 种白血病细胞凋亡的形态学变化 | 第16-17页 |
·DNA ladder 检测细胞凋亡 | 第17页 |
·Annexin Ⅴ/PI 双染法检测细胞凋亡情况 | 第17-18页 |
3. 实验结果 | 第18-21页 |
·白血病细胞表面DR5 表达 | 第18页 |
·mDRA-6 对4 种白血病细胞凋亡的毒性测定 | 第18-19页 |
·细胞形态变化 | 第19-20页 |
·流式细胞术检测细胞凋亡结果 | 第20页 |
·DNA ladder 检测细胞凋亡 | 第20-21页 |
4. 讨论 | 第21-23页 |
第二部分 抗人DR5 单克隆抗体MDRA-6 诱导白血病细胞凋亡机制研究 | 第23-42页 |
1. 材料、试剂与仪器 | 第24-27页 |
·细胞系 | 第24页 |
·主要试剂及配制 | 第24-26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
2. 实验步骤和方法 | 第27-32页 |
·细胞培养 | 第27页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第27页 |
·总蛋白定量(BCA 法) | 第27-28页 |
·间接ELISA 检测NF-κB 活性方法 | 第28页 |
·mDRA-6 作用后白血病细胞NF-κB 活性测定 | 第28页 |
·蛋白质凝胶电泳 | 第28-29页 |
·Western blotting 蛋白转印 | 第29-30页 |
·Western blotting 检测凋亡蛋白Caspase8 | 第30-31页 |
·Western blotting 检测其它参与凋亡的蛋白 | 第31页 |
·caspase 抑制剂对细胞凋亡的影响 | 第31-32页 |
·细胞凋亡线粒体膜电位的检测 | 第32页 |
·统计学分析 | 第32页 |
3. 实验结果 | 第32-38页 |
·蛋白标准曲线 | 第32-33页 |
·间接ELISA 检测NF-κB 活性 | 第33页 |
·mDRA-6 作用白血病细胞后NF-κB 蛋白测定 | 第33-34页 |
·Western blot | 第34-36页 |
·线粒体膜电位的检测结果 | 第36-37页 |
·caspase 抑制剂对mDRA-6 诱导细胞凋亡的影响 | 第37-38页 |
4. 讨论 | 第38-42页 |
第三部分 小结 | 第42-62页 |
1. TNF 家族的受体和配体 | 第47-48页 |
2. TNF 受体和配体家族的结构特征 | 第48页 |
3. TNF 受体和配体间相互作用 | 第48-49页 |
4. TRAIL 及其受体 | 第49-51页 |
5. TRAIL 诱导凋亡的分子机制 | 第51-55页 |
·caspase-10 在TRAIL 凋亡信号传导途径中的作用 | 第52-54页 |
·Bcl-2 家族在TRAIL 诱导凋亡中的作用 | 第54-55页 |
6. TRAIL 诱导凋亡的抑制途径 | 第55-57页 |
7. TRAIL 控制肿瘤生长的作用 | 第57-59页 |
8. TRAIL 与放疗和化疗的联合应用 | 第59页 |
9. TRAIL 的安全性 | 第59-60页 |
10. TRAIL 和TRAIL 受体生理作用 | 第60-62页 |
总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
附:英文缩略词表 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录 | 第70页 |