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农杆菌真空渗透转化棉花的研究及转SuSy基因棉花后代的功能验证

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 文献综述第9-24页
   ·农杆菌真空渗透法的研究现状第10-13页
     ·花粉作为基因转化受体的研究第11-12页
     ·农杆菌真空渗透转化花粉的研究第12-13页
     ·农杆菌真空渗透转化方法的特点及技术评价第13页
   ·提高棉花纤维品质育种的研究现状和对策第13页
   ·棉花遗传转化的主要成就第13-14页
   ·棉花纤维品质的转基因育种现状第14-16页
     ·棉纤维发育基因的克隆第14-16页
     ·外源纤维基因的导入与棉纤维品质的改良第16页
   ·蔗糖合成酶基因及其在棉花育种上的应用第16-21页
     ·蔗糖合成酶基因发现第17页
     ·蔗糖合成酶的生物学功能第17-19页
     ·SuSy 基因及其表达调控第19-20页
     ·SuSy 基因遗传转化研究第20-21页
     ·蔗糖合成酶(SuSy)在棉纤维品质育种中的应用第21页
   ·转基因棉花变异性状研究第21-23页
     ·转基因变异在其他植物中的研究情况第21-22页
     ·转基因棉花变异研究现状第22-23页
   ·立题依据及意义第23-24页
第二章 农杆菌真空渗透法将 SuSy 基因导入棉花的研究第24-41页
   ·试验材料第24-27页
     ·受体材料第24页
     ·菌株与质粒第24页
     ·酶和生化试剂第24页
     ·引物设计第24-25页
     ·主要溶液成分第25-27页
     ·主要仪器设备第27页
   ·实验方法第27-32页
     ·感受态细胞的制备与转化第27-28页
     ·质粒DNA 的小量提取第28-29页
     ·农杆菌真空渗透法转化棉花第29-31页
     ·幼苗抗性培养基不同卡那霉素浓度的筛选第31页
     ·棉花基因组DNA 的提取第31页
     ·阳性植株的PCR 检测第31-32页
   ·结果与分析第32-38页
     ·不同蔗糖浓度花粉培养基对花粉破损的影响第32页
     ·不同真空渗入时间对花粉的影响第32-34页
     ·不同真空渗入时间及菌液浓度对花粉的GUS 瞬间转化率的影响第34页
     ·抽真空后花粉在柱头上的萌发第34-35页
     ·农杆菌真空渗透法转化棉花及T_0代的获得第35页
     ·幼苗鉴定法不同卡那霉素浓度的筛选第35-36页
     ·真空渗透转化法获得T_0代种子的卡那霉素抗性筛选第36-37页
     ·真空渗透转化阳性植株的PCR 检测第37-38页
   ·讨论第38-41页
     ·农杆菌真空渗透转化棉花第38-39页
     ·转化植株后代卡那霉素抗性筛选第39-40页
     ·阳性植株的分子检测第40页
     ·农杆菌真空渗透法与花粉管通道法的比较第40-41页
第三章 通过花粉管通道方法转 SuSy 基因棉花后代分子检测第41-53页
   ·材料第41-42页
     ·植物材料第41页
     ·PCR 检测的引物设计第41页
     ·酶和生化试剂第41页
     ·主要仪器设备第41-42页
   ·方法第42-48页
     ·转SuSy 基因后代田间卡那霉素抗性筛选第42页
     ·转SuSy 基因后代纯度检测第42页
     ·转SuSy 基因后代PCR 分子检测第42页
     ·Southern 印迹杂交第42-44页
     ·棉花总RNA 的提取第44-47页
     ·RNA 的反转录第47页
     ·RT-PCR 检测第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·通过花粉管方法得到转基因后代的卡那霉素抗性检测和 PCR 检测第48-49页
     ·Southern 印迹杂交第49页
     ·SuSy 基因在转基因棉花叶片和纤维中的表达第49-52页
   ·讨论第52-53页
第四章 花粉管通道法转 Su Sy 基因棉花后代农艺性状及功能验证第53-66页
   ·材料第53-54页
     ·供试植物材料第53页
     ·试验溶液配制第53-54页
     ·主要实验仪器第54页
   ·方法第54-58页
     ·转基因后代农艺性状的调查及纤维品质检测第54页
     ·观察胚珠表皮细胞的突起第54-55页
     ·未成熟纤维含糖量的测定第55-58页
   ·结果与分析第58-63页
     ·转SuSy 基因棉花后代农艺性状比较第58页
     ·转SuSy 基因后代棉花表皮茸毛增加第58-59页
     ·转SuSy 基因植株胚珠表皮细胞的纤维突起第59-60页
     ·转SuSy 基因棉纤维发育过程中含糖量比较第60-63页
     ·转SuSy 基因棉花纤维品质检测比较第63页
   ·讨论第63-66页
     ·转SuSy 基因后代的纯合系的获得第63页
     ·转SuSy 基因后代的功能表现第63-64页
     ·SuSy 基因对棉纤维的含糖量及品质的影响第64页
     ·转SuSy 基因后代优良变异性状的选择第64-66页
结论第66-67页
本研究的创新点第67-68页
参考文献第68-78页
致谢第78-79页
作者简介第79页

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