| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 縮略词对照表 | 第10-12页 |
| 引言 | 第12-22页 |
| 1 昆虫的免疫反应 | 第12-14页 |
| ·昆虫的体液免疫 | 第13-14页 |
| ·昆虫的细胞免疫 | 第14页 |
| 2 血细胞粘附状态的研究 | 第14-16页 |
| ·哺乳动物中血小板粘附的研究概况 | 第14-15页 |
| ·昆虫血细胞粘附的研究概况 | 第15-16页 |
| 3 hemichannel的研究概括 | 第16-18页 |
| ·hemichannel的结构 | 第16-17页 |
| ·脊椎动物hemichannel的研究概况 | 第17-18页 |
| ·昆虫hemichannel的研究概况 | 第18页 |
| 4. innexins蛋白家族的研究 | 第18-19页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第19-22页 |
| 材料与方法 | 第22-44页 |
| 1 材料 | 第22-26页 |
| ·斜纹夜蛾 | 第22页 |
| ·昆虫细胞 | 第22页 |
| ·质粒载体和受体菌株 | 第22页 |
| ·限制性内切酶和其他酶类 | 第22页 |
| ·试剂盒 | 第22-23页 |
| ·其他主要试剂 | 第23页 |
| ·仪器设备及耗材 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24-26页 |
| 2 方法 | 第26-44页 |
| ·cDNA的获得 | 第26-28页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·T-spli-inx2和T-spli-inx3的构建 | 第29-32页 |
| ·SpliINX2和SpliINX3的跨膜结构域和系统树的构建 | 第32-36页 |
| ·Spli-inx2和Spli-inx3基因的真核表达载体构建 | 第36-38页 |
| ·pIZT/V5-His-Spli-inx2和pIZT/V5-His-Spli-inx3质粒的转染 | 第38-39页 |
| ·细胞的免疫荧光 | 第39-40页 |
| ·Dye uptake实验 | 第40页 |
| ·博来霉素Zeocin筛选稳定表达细胞系 | 第40页 |
| ·细胞蛋白的提取 | 第40-42页 |
| ·Western blot | 第42-44页 |
| 结果 | 第44-62页 |
| 1 inx2和inx3基因的扩增 | 第44-46页 |
| ·inx2和inx3基因细胞中的扩增情况 | 第44页 |
| ·inx2和inx3基因在斜纹夜蛾不同组织中的扩增情况 | 第44-46页 |
| 2 Spli-inx2 和Spli-inx3基因的分析 | 第46-54页 |
| ·pMD19-Spli-inx2和pMD19-Spli-inx3的克隆 | 第46-49页 |
| ·蛋白结构及保守性分析 | 第49-51页 |
| ·序列比对及系统树构建 | 第51-54页 |
| 3. 大量表达SpliINX2和SpliINX3蛋白导致不同细胞系的生理变化 | 第54-62页 |
| ·pIZT/V5-His-Spli-inx2质粒和pIZT/V5-His-Spli-inx3质粒的鉴定 | 第54-55页 |
| ·pIZT/V5-His-Spli-inx2质粒和pIZT/V5-His-Spli-inx3质粒的转染 | 第55页 |
| ·细胞中的表达情况 | 第55-59页 |
| ·不同细胞系的生理变化 | 第59-62页 |
| 讨论 | 第62-65页 |
| 结论 | 第65-67页 |
| 1 Spli-inx2和Spli-inx3基因属于保守的innexin基因家族 | 第65页 |
| 2 SpliINX2 和SpliINX3蛋白的表达和定位 | 第65页 |
| 3 对不同细胞生理的影响 | 第65-66页 |
| 4. 对下一步工作的建议 | 第66-67页 |
| 附录1 pET28-k-Spli-inx2的原核表达 | 第67-73页 |
| 附录2 Ecto-ATPase基因的扩增 | 第73-76页 |
| 附录3 实时荧光PCR特异引物的扩增 | 第76-77页 |
| 附录4 其他引物的设计 | 第77-80页 |
| 附录5 斜纹夜蛾组织的解剖 | 第80-82页 |
| 附录6 主要试剂配方 | 第82-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 在读期间发表论文及获奖情况 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
