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大白菜DREB类转录因子cDNA的克隆及植物表达载体的构建

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-17页
   ·DREB 转录因子的发现第10-11页
   ·AP2/EREBP 转录因子分类及功能第11-12页
   ·DREB 基因的结构特征第12页
   ·DREB 转录因子在逆境应答中的作用第12-13页
   ·DREB 信号传导途径第13-14页
     ·不依赖ABA 的信号传导途径第13页
     ·依赖ABA 的信号传导途径第13-14页
   ·DREB 转录因子在植物抗逆基因工程中的应用第14-15页
   ·本研究的目的、意义第15-17页
2 大白菜DREB 类转录因子cDNA 的克隆及分析第17-30页
   ·材料与试剂第17页
     ·植物材料的培养与处理第17页
     ·菌株和载体第17页
     ·试剂及试剂盒第17页
   ·试验方法第17-23页
     ·大白菜叶片总RNA 的提取及检测第17-18页
     ·mRNA 的反转录第18-19页
     ·RT-PCR 扩增第19页
     ·目的片段的回收第19-20页
     ·目的片段与T 载体的连接第20页
     ·连接产物的转化第20-21页
     ·阳性克隆的筛选第21-22页
     ·阳性克隆的序列测定及其分析第22页
     ·半定量RT-PCR 分析第22-23页
   ·结果与分析第23-30页
     ·大白菜叶片总RNA 的提取第23页
     ·大白菜DREB 类转录因子cDNA 的RT-PCR 扩增第23-24页
     ·阳性克隆的PCR 鉴定第24页
     ·大白菜DREB 基因cDNA 序列的获得第24-25页
     ·大白菜BcDREB1、BcDREB2 的序列比对分析第25-26页
     ·大白菜BcDREB1、BcDREB2 基因的同源性分析第26-27页
     ·大白菜BcDREB1、BcDREB2 基因的结构域分析第27-28页
     ·大白菜BcDREB1、BcDREB2 基因的理化性质预测第28页
     ·大白菜DREB 基因表达模式分析第28-30页
3 大白菜DREB 类转录因子植物表达载体的构建第30-38页
   ·材料与试剂第30页
     ·菌株和表达载体第30页
     ·试剂第30页
   ·试验方法第30-33页
     ·正反义基因片段的引物设计第30页
     ·目的片段的PCR 扩增第30-31页
     ·目的片段的回收第31页
     ·目的片段及载体的酶切第31页
     ·目的片段与载体的连接及转化第31-32页
     ·阳性克隆的筛选及鉴定第32页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第32页
     ·表达载体向农杆菌的转化第32页
     ·转化子的鉴定第32-33页
   ·结果与分析第33-38页
     ·正义片段与反义片段的PCR 扩增第33页
     ·大白菜BcDREB1 基因正反义植物表达载体的鉴定第33-35页
     ·大白菜BcDREB2 基因反义植物表达载体的鉴定第35-36页
     ·农杆菌中表达载体的菌液PCR 鉴定第36-38页
4 讨论第38-41页
   ·大白菜DREB 类转录因子的结构特征第38页
   ·关于半定量RT-PCR第38-39页
   ·DREB 转录因子的逆境表达模式第39-40页
   ·植物表达载体构建的影响因素第40-41页
5 结论第41-42页
参考文献第42-47页
在读期间发表的学术论文第47-48页
作者简历第48-49页
致谢第49页

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