摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-8页 |
缩略词表 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1 高等植物成花发育概述 | 第10-12页 |
·成花诱导的相关理论 | 第10-12页 |
·成花相关基因的调控 | 第12页 |
2 控制植物花发育的基因种类 | 第12-18页 |
·成花计时基因 | 第13页 |
·分生组织特性基因 | 第13-14页 |
·定域基因 | 第14页 |
·调控花器官形成的基因 | 第14-18页 |
·MADS-box基因 | 第15-16页 |
·ABC模型 | 第16-17页 |
·ABCD模型 | 第17页 |
·ABCDE模型及四因子模型 | 第17-18页 |
3 苹果基因组研究的困难与遗传转化研究现状 | 第18-19页 |
第二章 苹果MdFT基因的克隆及其功能的初步鉴定 | 第19-35页 |
1 材料 | 第19-22页 |
·植物材料 | 第19页 |
·菌株和质粒 | 第19页 |
·化学试剂和工具酶类 | 第19-20页 |
·引物合成与测序 | 第20-21页 |
·培养基 | 第21-22页 |
2 试验方法 | 第22-27页 |
·试验流程 | 第22-23页 |
·核酸的提取 | 第23-27页 |
·CTAB法提取拟南芥和番茄的DNA | 第23页 |
·CTAB法提取苹果幼叶和愈伤组织的RNA | 第23-25页 |
·改良热硼酸法提取苹果果实RNA | 第25-26页 |
·Trizol法提取拟南芥和番茄叶片总RNA | 第26-27页 |
·RNA的检测 | 第27页 |
3 目的基因的扩增 | 第27-29页 |
·cDNA链的合成 | 第27页 |
·PCR扩增MdFT和AtFT基因 | 第27-28页 |
·PCR扩增产物的回收 | 第28-29页 |
4 回收产物的克隆 | 第29-30页 |
5 质粒DNA的提取 | 第30-31页 |
6 植物表达载体的构建、转化及鉴定 | 第31-32页 |
·表达载体构建方法 | 第31-32页 |
·表达载体构建的操作步骤 | 第32页 |
7 拟南芥的转化和筛选 | 第32-33页 |
·渗透法转化拟南芥 | 第32-33页 |
·转化子的筛选 | 第33页 |
8 叶盘法转化番茄 | 第33-34页 |
9 MdFT蛋白的亚细胞定位 | 第34-35页 |
·MdFT-GFP融合蛋白表达载体的构建 | 第34页 |
·洋葱表皮细胞的浸染和转化 | 第34页 |
·MdFT蛋白的亚细胞定位观察 | 第34-35页 |
第三章 结果与分析 | 第35-47页 |
·目的基因的克隆 | 第35页 |
·MdFT的序列分析 | 第35页 |
·MdFT蛋白的聚类分析 | 第35-39页 |
·转基因拟南芥的获得和鉴定 | 第39-41页 |
·转MdFT和AtFT基因拟南芥的获得 | 第39-40页 |
·转MdFT和AtFT基因拟南芥的PCR鉴定 | 第40页 |
·转MdFT和AtFT基因拟南芥的形态鉴定 | 第40-41页 |
·转基因番茄的PCR检测和半定量RT-PCR分析 | 第41-43页 |
·转基因番茄出现早花 | 第43-44页 |
·MdFT基因通过调节下游开花相关基因诱导拟南芥开花 | 第44页 |
·MdFT基因的组织特异性表达检测 | 第44-46页 |
·MdFT蛋白的亚细胞定位 | 第46-47页 |
第四章 讨论和结论 | 第47-50页 |
·高等植物各成花调控途径之间存在着共同的整合因子 | 第47页 |
·内源基因和转化材料的选择 | 第47页 |
·“开花素”的物质本质已经被证明 | 第47-48页 |
·苹果成花相关基因的分离及其特征的初步研究 | 第48页 |
·鉴定MdFT基因功能的下一步研究方向 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
作者简介 | 第58-59页 |
导师简介 | 第59-61页 |