| 摘要 | 第1-5页 |
| SUMMARY | 第5-12页 |
| 第一章文献综述 | 第12-33页 |
| 1 模式植物遗传转化和基因表达的研究 | 第13-14页 |
| ·模式植物的特点 | 第13页 |
| ·新型模式植物—二穗短柄草(Brachypodium distachyon) | 第13-14页 |
| 2 二穗短柄草的生物学特性、基因组大小和分类地位 | 第14-15页 |
| 3 植物转基因技术的研究进展 | 第15-26页 |
| ·植物转基因技术 | 第15-17页 |
| ·间接遗传转化方法 | 第15-16页 |
| ·直接遗传转化方法 | 第16-17页 |
| ·遗传转化的受体系统 | 第17-20页 |
| ·分生组织培养 | 第18页 |
| ·愈伤组织的培养 | 第18-19页 |
| ·花药培养及单倍体的获得 | 第19页 |
| ·原生质体培养及植株再生 | 第19-20页 |
| ·悬浮细胞的培养 | 第20页 |
| ·植物的遗传转化方法 | 第20-23页 |
| ·原生质体转化法 | 第20-21页 |
| ·硅碳纤维介导法 | 第21页 |
| ·微粒轰击法 | 第21-22页 |
| ·农杆菌介导转化法 | 第22-23页 |
| ·花粉管通道法 | 第23页 |
| ·电激法 | 第23页 |
| ·PEG 法 | 第23页 |
| ·外源基因在转基因植株中的表达 | 第23-24页 |
| ·转基因植物的筛选和鉴定 | 第24-26页 |
| ·报告基因 | 第24-25页 |
| ·选择标记基因 | 第25页 |
| ·转基因植物的分子生物学检测 | 第25-26页 |
| 4 转基因研究的主要目标 | 第26-30页 |
| ·品种改良 | 第26-27页 |
| ·提高病虫害抗性 | 第27-28页 |
| ·控制花粉过敏性 | 第28页 |
| ·提高抗逆性 | 第28-29页 |
| ·生物反应器 | 第29页 |
| ·改良抗除草剂性能 | 第29-30页 |
| 5 草坪草及牧草遗传转化中所存在的问题及应用前景 | 第30-31页 |
| 6 研究目的与意义 | 第31-33页 |
| 第二章材料与方法 | 第33-40页 |
| 1 试验材料 | 第33页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| 2 试验方法 | 第33-40页 |
| ·二穗短柄草未成熟胚离体再生体系的建立 | 第33-34页 |
| ·未成熟种子的消毒 | 第33页 |
| ·愈伤组织的诱导和继代 | 第33-34页 |
| ·愈伤组织的再生 | 第34页 |
| ·数据统计 | 第34页 |
| ·对二穗短柄草进行bar 基因的遗传转化 | 第34-36页 |
| ·植物材料及菌株 | 第34页 |
| ·质粒载体的构造 | 第34页 |
| ·转化理化条件的确立 | 第34-36页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因表达检测 | 第36页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的瞬时表达分析 | 第36页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的永久表达分析 | 第36页 |
| ·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因在转化植株中的表达分析 | 第36页 |
| ·转化植物的叶片测试 | 第36-37页 |
| ·转基因植株分子检测 | 第37-39页 |
| ·植物 RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·将RNA 反转录成cDNA | 第38页 |
| ·PCR 扩增 | 第38-39页 |
| ·T1 代的BASTA 检测 | 第39-40页 |
| 第三章结果与分析 | 第40-49页 |
| 1 二穗短柄草离体再生体系的建立 | 第40-44页 |
| 2 转化方法的优化 | 第44-45页 |
| ·农杆菌液体培养基的确立 | 第44页 |
| ·转化共培养时间的选择 | 第44页 |
| ·抗性愈伤及转基因植株的筛选 | 第44页 |
| ·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第44-45页 |
| 3 转基因植株的鉴定 | 第45-49页 |
| ·GUS 基因表达 | 第45页 |
| ·T_0 代的再生与分化 | 第45-47页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第47-48页 |
| ·T_1 代的抗性分离 | 第48-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-52页 |
| 1 愈伤组织的诱导和植株再生 | 第49页 |
| 2 转化方法的建立 | 第49-50页 |
| 3 转化植株的检测 | 第50-51页 |
| 4 目的基因在后代中的表达 | 第51-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-65页 |
| 个人简介 | 第65-66页 |
| 导师简介 | 第66页 |