摘要 | 第1-5页 |
SUMMARY | 第5-12页 |
第一章文献综述 | 第12-33页 |
1 模式植物遗传转化和基因表达的研究 | 第13-14页 |
·模式植物的特点 | 第13页 |
·新型模式植物—二穗短柄草(Brachypodium distachyon) | 第13-14页 |
2 二穗短柄草的生物学特性、基因组大小和分类地位 | 第14-15页 |
3 植物转基因技术的研究进展 | 第15-26页 |
·植物转基因技术 | 第15-17页 |
·间接遗传转化方法 | 第15-16页 |
·直接遗传转化方法 | 第16-17页 |
·遗传转化的受体系统 | 第17-20页 |
·分生组织培养 | 第18页 |
·愈伤组织的培养 | 第18-19页 |
·花药培养及单倍体的获得 | 第19页 |
·原生质体培养及植株再生 | 第19-20页 |
·悬浮细胞的培养 | 第20页 |
·植物的遗传转化方法 | 第20-23页 |
·原生质体转化法 | 第20-21页 |
·硅碳纤维介导法 | 第21页 |
·微粒轰击法 | 第21-22页 |
·农杆菌介导转化法 | 第22-23页 |
·花粉管通道法 | 第23页 |
·电激法 | 第23页 |
·PEG 法 | 第23页 |
·外源基因在转基因植株中的表达 | 第23-24页 |
·转基因植物的筛选和鉴定 | 第24-26页 |
·报告基因 | 第24-25页 |
·选择标记基因 | 第25页 |
·转基因植物的分子生物学检测 | 第25-26页 |
4 转基因研究的主要目标 | 第26-30页 |
·品种改良 | 第26-27页 |
·提高病虫害抗性 | 第27-28页 |
·控制花粉过敏性 | 第28页 |
·提高抗逆性 | 第28-29页 |
·生物反应器 | 第29页 |
·改良抗除草剂性能 | 第29-30页 |
5 草坪草及牧草遗传转化中所存在的问题及应用前景 | 第30-31页 |
6 研究目的与意义 | 第31-33页 |
第二章材料与方法 | 第33-40页 |
1 试验材料 | 第33页 |
·植物材料 | 第33页 |
·培养基 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-40页 |
·二穗短柄草未成熟胚离体再生体系的建立 | 第33-34页 |
·未成熟种子的消毒 | 第33页 |
·愈伤组织的诱导和继代 | 第33-34页 |
·愈伤组织的再生 | 第34页 |
·数据统计 | 第34页 |
·对二穗短柄草进行bar 基因的遗传转化 | 第34-36页 |
·植物材料及菌株 | 第34页 |
·质粒载体的构造 | 第34页 |
·转化理化条件的确立 | 第34-36页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因表达检测 | 第36页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的瞬时表达分析 | 第36页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因的永久表达分析 | 第36页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(GUS)基因在转化植株中的表达分析 | 第36页 |
·转化植物的叶片测试 | 第36-37页 |
·转基因植株分子检测 | 第37-39页 |
·植物 RNA 的提取 | 第37-38页 |
·将RNA 反转录成cDNA | 第38页 |
·PCR 扩增 | 第38-39页 |
·T1 代的BASTA 检测 | 第39-40页 |
第三章结果与分析 | 第40-49页 |
1 二穗短柄草离体再生体系的建立 | 第40-44页 |
2 转化方法的优化 | 第44-45页 |
·农杆菌液体培养基的确立 | 第44页 |
·转化共培养时间的选择 | 第44页 |
·抗性愈伤及转基因植株的筛选 | 第44页 |
·乙酰丁香酮对转化效率的影响 | 第44-45页 |
3 转基因植株的鉴定 | 第45-49页 |
·GUS 基因表达 | 第45页 |
·T_0 代的再生与分化 | 第45-47页 |
·RT-PCR 扩增 | 第47-48页 |
·T_1 代的抗性分离 | 第48-49页 |
第四章 讨论 | 第49-52页 |
1 愈伤组织的诱导和植株再生 | 第49页 |
2 转化方法的建立 | 第49-50页 |
3 转化植株的检测 | 第50-51页 |
4 目的基因在后代中的表达 | 第51-52页 |
第五章 结论 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-65页 |
个人简介 | 第65-66页 |
导师简介 | 第66页 |