中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1. 影响花椰菜再生体系建立的主要因素 | 第12-14页 |
·基因型的影响 | 第12-13页 |
·外植体类型及部位 | 第13页 |
·苗龄和苗态 | 第13页 |
·培养基 | 第13页 |
·激素成分 | 第13-14页 |
·AgNO_3 的影响 | 第14页 |
·其他因素的影响 | 第14页 |
2. 植物遗传转化研究进展 | 第14-17页 |
·遗传转化的意义 | 第14-15页 |
·遗传转化方法 | 第15页 |
·导入目的基因及性状改良 | 第15-16页 |
·存在的主要问题 | 第16-17页 |
3. 影响农杆菌介导的花椰菜遗传转化体系的主要因素 | 第17-20页 |
·农杆菌的菌株及浸染力 | 第17-18页 |
·受体的生理状态 | 第18页 |
·再生体系 | 第18-19页 |
·筛选标记 | 第19页 |
·抗生素的选择 | 第19页 |
·较高的遗传稳定性 | 第19-20页 |
4. 本试验研究主要内容及其预期的目标 | 第20-21页 |
第二章 花椰菜离体再生体系的建立 | 第21-28页 |
1. 材料与方法 | 第21-22页 |
·材料 | 第21页 |
·培养基 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-22页 |
·花椰菜无菌苗的准备 | 第21页 |
·不同苗龄的外植体的获得 | 第21-22页 |
·基因型对花椰菜再生能力的影响 | 第22页 |
·6-BA、IAA 和NAA 对不定芽分化的影响 | 第22页 |
·AgNO_3 对不定芽分化的影响 | 第22页 |
·不定芽的生根培养及再生植株的移栽 | 第22页 |
·再生频率与每块外植体再生芽数的计算 | 第22页 |
2. 结果与分析 | 第22-25页 |
·花椰菜的苗龄对不定芽分化的影响 | 第22-23页 |
·不同基因型对不定芽分化的影响 | 第23页 |
·激素浓度对不定芽分化的影响 | 第23-24页 |
·AgNO_3 对外植体分化能力的影响 | 第24-25页 |
·再生苗的生根与移栽 | 第25页 |
3. 讨论 | 第25-28页 |
·供试苗状态对花椰菜不定芽再生的影响 | 第25-26页 |
·基因型对花椰菜不定芽再生的影响 | 第26页 |
·不同激素对花椰菜不定芽再生的影响 | 第26页 |
·玻璃化的克服 | 第26-27页 |
·移栽实验 | 第27-28页 |
第三章 花椰菜遗传转化系统的优化及其应用 | 第28-41页 |
1. 材料与方法 | 第28-32页 |
·试验材料 | 第28-29页 |
·供试植物材料 | 第28页 |
·供试菌株和质粒 | 第28页 |
·花椰菜转基因培养基 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-32页 |
·花椰菜无菌苗的准备 | 第29页 |
·花椰菜遗传转化体系的建立 | 第29页 |
·利用农杆菌介导的遗传转化 | 第29-30页 |
·转化植株的移栽 | 第30页 |
·转化植株的PCR 鉴定 | 第30-31页 |
·转基因植株抗核盘菌功能表型鉴定 | 第31-32页 |
2. 结果与分析 | 第32-37页 |
·潮霉素、卡那霉素对花椰菜下胚轴外植体芽分化能力的影响 | 第32-33页 |
·下胚轴外植体对Kan 胁迫的反应 | 第32页 |
·下胚轴外植体对Hyg 胁迫的反应 | 第32-33页 |
·Cb 抑菌剂浓度对抑菌效果对芽分化的影响 | 第33页 |
·农杆菌介导的转化对花椰菜分化的影响因素 | 第33-35页 |
·预培养对花椰菜分化效率的影响 | 第33-34页 |
·菌液浓度对花椰菜分化效率的影响 | 第34页 |
·侵染时间对花椰菜分化效率的影响 | 第34页 |
·共培养时间对花椰菜分化效率的影响 | 第34-35页 |
·延迟培养对花椰菜遗传转化的影响 | 第35页 |
·抗性植株的获得 | 第35页 |
·抗性植株的移栽 | 第35-36页 |
·抗性植株的PCR 检测 | 第36页 |
·转BpERF1 基因花椰菜抗核盘菌表型初步鉴定 | 第36-37页 |
·转基因花椰菜生物学性状观察 | 第37页 |
3. 讨论 | 第37-41页 |
·筛选压浓度的确定 | 第37-38页 |
·抑菌剂的选择 | 第38页 |
·预培养时间对花椰菜转化率的影响 | 第38页 |
·农杆菌浓度对花椰菜转化率的影响 | 第38-39页 |
·侵染时间对花椰菜转化率的影响 | 第39页 |
·共培养时间对花椰菜转化率的影响 | 第39页 |
·筛选方式对花椰菜转化率的影响 | 第39页 |
·PCR 检测假阳性和非特异性 | 第39-40页 |
·草酸处理对花椰菜转基因植株抗病性的鉴定 | 第40-41页 |
结论 | 第41-44页 |
1. 花椰菜离体再生体系 | 第41页 |
2. 农杆菌介导的花椰菜遗传转化 | 第41-42页 |
3. 花椰菜遗传转化体系的应用 | 第42页 |
4. 下一步展望 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
图版 | 第47-50页 |
附录 | 第50-56页 |
致谢 | 第56页 |