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红肉脐橙和‘国庆四号温州蜜柑中CHS和CHI基因的克隆与表达及其对类黄酮积累的调控机制

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略语表第12-13页
第一章 前言第13-25页
 1 课题的提出第13-14页
 2 类黄酮研究进展第14-22页
   ·类黄酮的结构特点和种类第14-15页
   ·类黄酮的合成途径第15-16页
   ·类黄酮的生物功能及应用第16-18页
     ·抗氧化第16-17页
     ·参与植物胁迫保护第17页
     ·抗炎抗病毒第17页
     ·抗癌抗肿瘤第17-18页
     ·对心血管系统的作用第18页
     ·在食品工业中的应用第18页
   ·类黄酮的提取方法第18-20页
     ·传统提取法第18-19页
     ·微波提取法第19页
     ·超声波提取法第19-20页
     ·超临界液体提取法第20页
     ·酶提取法第20页
   ·黄酮类成分的检测技术第20-22页
     ·光谱分析法第20-21页
     ·高效液相色谱法第21页
     ·毛细管电泳法第21-22页
     ·色谱-质谱联用法第22页
 3 查尔酮合成酶和查尔酮异构酶研究进展第22-24页
   ·查尔酮合成酶第22-23页
     ·编码基因及特征第22-23页
     ·CHS基因的表达特性第23页
   ·查尔酮异构酶第23-24页
     ·编码基因及特征第23-24页
     ·CHI催化反应机理第24页
 4 本课题研究的内容、目的及意义第24-25页
第二章 红肉脐橙和‘国庆四号’温州蜜柑果实成熟过程中类黄酮的积累第25-35页
 1 材料与方法第25-27页
   ·试验材料第25页
   ·主要试剂第25页
   ·主要仪器第25-26页
   ·总黄酮的测定方法第26页
   ·三种主要类黄酮组分的测定方法第26-27页
     ·样品溶液的制备第26页
     ·标准溶液的配制第26页
     ·检测波长的确定第26-27页
     ·洗脱条件的选择第27页
     ·标准曲线的绘制第27页
   ·数据处理第27页
 2 结果与分析第27-33页
   ·果实成熟过程中总黄酮含量的变化第27-29页
     ·红肉脐橙总黄酮含量的变化第27-28页
     ·‘国庆四号’温州蜜柑总黄酮含量的变化第28-29页
   ·果实成熟过程中三种主要类黄酮组分含量的变化第29-33页
     ·红肉脐橙反式查尔酮含量的变化第29-30页
     ·红肉脐橙橙皮苷含量的变化第30页
     ·红肉脐橙柚皮素-7-β-芸香糖苷含量的变化第30-31页
     ·‘国庆四号’温州蜜柑反式查尔酮含量的变化第31-32页
     ·‘国庆四号’温州蜜柑橙皮苷含量的变化第32页
     ·‘国庆四号’温州蜜柑柚皮素-7-β-芸香糖苷的含量变化第32-33页
 3 讨论第33-35页
   ·果实成熟过程中总黄酮含量的变化第33页
   ·果实成熟过程中三种主要类黄酮组分含量的变化第33-35页
第三章 查尔酮合成酶和查尔酮异构酶基因的克隆第35-42页
 1 材料与方法第35-38页
   ·试验材料第35页
   ·主要试剂第35页
   ·总RNA提取第35-36页
   ·cDNA第一链合成第36页
   ·PCR扩增第36页
   ·PCR产物回收第36-37页
   ·连接与转化第37页
   ·阳性克隆 PCR鉴定及测序第37-38页
 2 结果与分析第38-40页
   ·总RNA提取第38页
   ·CHS、CHI基因克隆与分析第38-40页
     ·红肉脐橙中的PCR结果第38-39页
     ·‘国庆四号’中的 PCR结果第39-40页
     ·菌落 PCR检测第40页
     ·测序结果及同源性分析第40页
 3 讨论第40-42页
第四章 CHS和CHI基因的相对表达量第42-50页
 1 材料和方法第42-43页
   ·试验材料第42页
   ·试验方法第42-43页
     ·总黄酮的测定第42页
     ·总RNA提取第42页
     ·第一链cDNA反转录第42页
     ·Real-time PCR第42-43页
   ·数据统计分析第43页
 2 结果与分析第43-48页
   ·CHS和CHI基因在红肉脐橙果皮中的相对表达量第43-44页
   ·CHS和CHI基因在红肉脐橙果肉中的相对表达量第44页
   ·CHS和CHI基因在‘国庆四号’果皮中的表达量第44-45页
   ·CHS和CHI基因在‘国庆四号’果肉中的表达量第45-46页
   ·红肉脐橙和‘国庆四号’各组织和器官中总类黄酮含量的变化第46页
   ·CHS和CHI基因在红肉脐橙各组织和器官中的相对表达量第46-47页
   ·CHS和CHI基因在‘国庆四号’各组织和器官中的相对表达量第47-48页
 3 讨论第48-50页
   ·CHS和CHI基因在果实成熟过程中的相对表达量第48页
   ·不同器官和组织中的总黄酮含量第48-49页
   ·CHS和CHI基因在不同器官和组织中的相对表达量第49-50页
参考文献第50-59页
致谢第59-60页
附录Ⅰ:课题资助项目第60页
附录Ⅱ:论文发表情况第60页

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