| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1. 文献综述 | 第8-17页 |
| ·CRISP 家族蛋白概况 | 第8页 |
| ·CRISP 家族蛋白成员及其分布 | 第8-11页 |
| ·哺乳动物中的CRISPs | 第8-9页 |
| ·非哺乳动物中的CRISPs | 第9-11页 |
| ·CRISP家族蛋白的结构特点 | 第11-14页 |
| ·PR-1结构特征 | 第12-13页 |
| ·铰链区结构特征 | 第13页 |
| ·CRD结构特征 | 第13-14页 |
| ·CRISP家族蛋白的功能 | 第14-16页 |
| ·Helothermine | 第14页 |
| ·Tex31 | 第14-15页 |
| ·BGSP-2/lethenteron japonicum | 第15页 |
| ·蛇毒中CRISP的生物学功能 | 第15-16页 |
| ·阻断Ca2+通道 | 第15-16页 |
| ·阻断K+通道 | 第16页 |
| ·阻断环核苷酸门控通道 | 第16页 |
| ·CRISP 的应用展望 | 第16-17页 |
| 2 基因序列进化分析，L251蛋白的表达及纯化 | 第17-29页 |
| ·材料和方法 | 第17-26页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-26页 |
| ·功能基因的EST搜索 | 第17页 |
| ·序列比对及进化分析 | 第17-21页 |
| ·总RNA的提取 | 第21页 |
| ·调取目的基因并构建至质粒表达载体 | 第21-22页 |
| ·将获取目的cDNA的pET236载体转化入表达菌Rosetta后进行阳性转化子的筛选鉴定 | 第22-23页 |
| ·对阳性重组子进行终浓度为1mmol/L的IPTG诱导表达 | 第23页 |
| ·采用 SDS-PAGE 法对可溶性蛋白进行分析 | 第23-24页 |
| ·对表达的重组蛋白进行变性条件下的组氨酸亲和层析纯化 | 第24-25页 |
| ·L251蛋白的复性 | 第25-26页 |
| ·蛋白含量测定 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-27页 |
| ·L251 的重组表达及纯化 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 3 中性粒细胞的分离 | 第29-32页 |
| ·材料和方法 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30页 |
| ·结果讨论 | 第30-32页 |
| 4 HUVEC 内皮细胞的培养 | 第32页 |
| ·材料和方法 | 第32页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32页 |
| 5 中性粒细胞跨血管内皮细胞迁移 | 第32-34页 |
| ·材料和方法 | 第32页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32页 |
| ·实验结果 | 第32-33页 |
| ·结果讨论 | 第33-34页 |
| 6 pEGFP-L251 载体构建 | 第34-37页 |
| ·材料和方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·实验结果 | 第36-37页 |
| ·结果讨论 | 第37页 |
| 7 转染HUVEC 细胞 | 第37-40页 |
| ·材料和方法 | 第37-38页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-39页 |
| ·结果讨论 | 第39-40页 |
| 8 Western blotting 检测 | 第40-41页 |
| ·材料和方法 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41页 |
| ·结果讨论 | 第41页 |
| 9 跨单层细胞膜迁移实验 | 第41-45页 |
| ·材料和方法 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-42页 |
| ·实验结果 | 第42-43页 |
| ·结果讨论 | 第43-45页 |
| 10 讨论 | 第45-47页 |
| 11 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 附录 | 第55-61页 |
| 发表论文 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
