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光诱导苹果果实着色相关基因的克隆和表达分析

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-26页
   ·花色素苷的生物合成及其光调控第14-18页
     ·花色素苷的结构第14-15页
     ·花青素的生物合成途径第15-16页
     ·花色素苷合成中的调控第16-18页
       ·二氢黄酮醇-4-还原酶(DFR,dihydroflavonol-4-reductase)第16-17页
       ·花青素-3-0-葡糖基转移酶(UFGT,UDPG-flavonoid-3-0-syltransferase)第17-18页
   ·MYB转录因子第18-21页
     ·MYB转录因子结构特征第18-19页
     ·MYB转录因子的功能第19-21页
   ·隐花色素对光形态建成和花青素生物合成的影响第21-24页
     ·隐花色素第21-24页
       ·隐花色素与花青素合成的关系第22-24页
         ·植物隐花色素第22-23页
         ·隐花色素结构和功能的关系第23-24页
       ·隐花色素介导花青素合成基因的表达第24页
   ·植物COP1蛋白第24-25页
   ·本项研究的目的意义第25-26页
2 材料与方法第26-42页
   ·实验材料第26-29页
     ·植物材料第26页
     ·菌株和质粒第26页
     ·酶及生化试剂第26页
     ·培养基第26-27页
     ·PCR引物第27-29页
   ·实验方法第29-42页
     ·CTAB法提取RNA第29-30页
     ·RNA含量和纯度检测第30页
     ·cDNA第一链的合成第30-31页
     ·反转录产物质量检测第31页
     ·cDNA纯化第31-32页
     ·cDNA末端加尾第32页
     ·CTAB法提取DNA第32-33页
     ·PCR扩增条件和程序第33-37页
       ·MdCRY1基因的PCR扩增条件和程序第33-34页
       ·MdCRY2 cDNA克隆第34-36页
       ·MdMYB1 cDNA克隆第36页
       ·MdCOP1-1cDNA克隆第36页
       ·MdCOP1-2 cDNA克隆第36-37页
     ·PCR扩增产物的回收第37-38页
     ·PCR产物的克隆第38-40页
       ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第38页
       ·重组载体的构建第38页
       ·重组载体转化感受态细胞第38-39页
       ·阳性克隆的筛选第39-40页
     ·cDNA序列测定第40页
     ·实时荧光定量PCR第40-41页
     ·苹果果皮中花青素的测定第41页
     ·MdMYB1-GFP融合载体构建、洋葱表皮细胞的基因枪转化和荧光观察第41-42页
3 结果与分析第42-58页
   ·RNA的提取和质量检测第42页
   ·反转录产物质量检测第42-43页
   ·苹果MdMYB1基因和MdDFR,MdUFGT启动子的克隆与表达分析第43-48页
     ·MdMYB1基因的克隆和序列分析第43-44页
     ·苹果MdMYB1蛋白的亚细胞定位第44-45页
     ·苹果DFR和UFGT启动子的克隆及序列分析第45-46页
     ·MdMYB1、MdDFR和MdUFGT基因时空表达第46-47页
     ·MdMYB1、MdDFR和MdUFGT基因在自然光处理下的表达分析第47-48页
   ·苹果隐花色素基因的克隆与表达分析第48-54页
     ·苹果MdCRY1和MdCRY2基因的克隆第48-49页
     ·MdCRY1和MdCRY2基因序列分析第49-52页
     ·MdCRY1和MdCRY2基因的时空表达分析第52-53页
     ·MdCRY1和MdCRY2基因在自然光处理下的表达分析第53-54页
   ·苹果MdCOP1-1和MdCOP1-2基因的克隆与序列分析第54-58页
     ·苹果MdCOP1-1和MdCOP1-2基因的克隆第54-55页
     ·苹果MdCOP1-1和MdCOP1-2基因的序列分析第55-57页
     ·MdCOP1-1和MdCOP1-2基因在自然光处理下的表达分析第57-58页
4 讨论第58-59页
   ·苹果果实花青素合成的调节模式第58页
   ·苹果隐花色素、COP1与果实花青素合成第58-59页
5 结论第59-62页
参考文献第62-71页
致谢第71-72页
攻读学位期间发表的学术论文第72页

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