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杀念菌素高产菌株的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-16页
   ·抗生素概述第9页
   ·大环内酯多烯类抗真菌素简介第9-10页
   ·抗生素杀念菌素的研究进展第10-11页
   ·抗生素高产育种技术第11-12页
   ·本论文的主要研究内容第12-13页
   ·本论文涉及的相关基因第13-16页
2 材料与方法第16-20页
   ·实验材料第16-17页
     ·菌株第16页
     ·使用质粒第16页
     ·引物第16-17页
     ·培养基第17页
     ·抗生素使用第17页
   ·实验方法第17-20页
3 结果与分析第20-44页
   ·正调节基因adpAc 对杀念菌素的合成具有正调控作用第20-23页
     ·链霉菌FR-008 中本身是否含有adpA 基因的验证第20页
     ·天蓝色链霉菌adpAc 基因转入链霉菌FR-008 及工程菌株ZYJ-6第20-21页
     ·全局性正调节因子adpAc 的高效表达对杀念菌素合成的影响第21-23页
   ·链霉菌FR-008 中nsdAF基因的敲除对杀念菌素的生物合成没有影响第23-28页
     ·链霉菌FR-008 基因组中nsdA 基因第23-24页
     ·链霉菌FR-008 中nsdA 基因的敲除第24-26页
     ·nsdAF基因同框缺失菌株的构建第26-27页
     ·nsdAF基因的敲除对杀念菌素的生物合成没有影响第27-28页
   ·透明颤菌血红蛋白合成基因在ZYJ6 中的表达可以提高抗生素的产量第28-30页
     ·透明颤菌血红蛋白合成基因vgb 转入工程菌株ZYJ-6第28页
     ·VHb 蛋白对菌株ZYJ6 细胞生长和抗生素合成的影响第28-30页
   ·S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因metK 在ZYJ-6 中的表达可以促进抗生素产量的提高第30-34页
     ·硫腺苷甲硫氨酸合成酶基因metK 转入工程菌株ZYJ-6第30-32页
     ·metK基因的高效表达对杀念菌素合成的影响第32-34页
   ·链霉素抗性基因突变筛选工程菌株ZYJ-6 高产菌株第34-35页
     ·链霉素抗性基因突变株的制备第34-35页
     ·链霉素抗性基因突变株的筛选第35页
   ·metK 和vgb 整合基因的高效表达大大促进了杀念菌素的高产第35-37页
   ·metK 和adpA 整合基因的高效表达进一步提高了杀念菌素合成量第37-40页
     ·metK,adpA 整合基因转入ZYJ6 及链霉菌FR-008第37-38页
     ·metK,adpA 整合基因对杀念菌素合成的作用第38页
     ·STR-4::pJTU3956 菌株中杀念菌素产量的变化第38-40页
   ·杀念菌素高产菌株的构建第40-44页
     ·metK,vgb,adpA 整合基因转入ZYJ6 中第40-41页
     ·metK,vgb,adpA 整合基因对杀念菌素合成的作用第41-42页
     ·杀念菌素高产菌株的构建第42页
     ·高产菌株TW4 中杀念菌素产量的变化第42-44页
4 讨论第44-46页
   ·nsdAF 基因的敲除第44页
   ·透明颤菌血红蛋白提高杀念菌素产量第44页
   ·链霉素抗性突变筛选杀念菌素高产菌株第44页
   ·野生型菌株链霉菌FR-008 和双突变菌株ZYJ6第44-45页
   ·metK,vgb,adpA 的整合基因第45页
   ·通用宿主的构建第45-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-54页
 附录第54-56页
 作者简介第56页

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