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转胶蛋白Transgelin诱导人前列腺癌细胞系LNCaP凋亡和衰老的初步研究

致谢第1-6页
研究背景第6-11页
 参考文献第8-11页
中文摘要第11-15页
Abstract第15-18页
缩略词表第18-20页
目次第20-23页
第一部分 观察转胶蛋白对肌动蛋白更新的影响第23-43页
 1 前言第23-25页
 2 材料和方法第25-28页
   ·细胞培养、质粒构建和瞬时转染第25页
   ·细胞ROS检测第25页
   ·免疫荧光染色第25-26页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting第26页
   ·F-actin and G-actin转变检测第26-27页
   ·细胞衰老检测第27-28页
 3 结果第28-37页
   ·转染转胶蛋白导致F-actin增加;抑制转胶蛋白表达导致F-actin减少第28页
   ·转染转胶蛋白使细胞ROS上升第28页
   ·转胶蛋白通过ROS升高导致DNA氧化损伤、激活ATM-Chk2-p53 DNA损伤信号传导途径第28-29页
   ·转胶蛋白和细胞衰老有关第29-37页
 4 讨论第37-40页
 5 参考文献第40-43页
第二部分 观察转胶蛋白和p53之间的相互作用第43-55页
 1 前言第43-44页
 2 材料和方法第44-46页
   ·细胞培养、质粒构建和瞬时转染第44页
   ·细胞胞浆、胞核分离第44页
   ·免疫荧光染色第44-45页
   ·哺乳类细胞双杂交第45页
   ·免疫共沉淀第45页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blotting第45-46页
 3 结果第46-52页
   ·转胶蛋白诱导p53表达并导致胞浆p53增多第46页
   ·转胶蛋白影响p53细胞内分布第46页
   ·细胞内转胶蛋白和p53相互作用第46-52页
 4 讨论第52-53页
 5 参考文献第53-55页
第三部分 转胶蛋白对p53下游基因及内源性凋亡途径的影响第55-67页
 1 前言第55-56页
 2 材料和方法第56-58页
   ·胞培养、质粒和瞬时转染第56页
   ·细胞活力测定第56页
   ·脱氧核苷酸末端转移酶-dUTP裂口端标记第56页
   ·流式细胞计数分析第56-57页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blotting第57页
   ·统计学分析第57-58页
 3 结果第58-63页
   ·转胶蛋白通过p53诱导PUMA蛋白表达,上调Bax表达、抑制Bcl-2蛋白第58页
   ·转胶蛋白抑制LNCaP细胞生长和诱导细胞凋亡第58-63页
 4 讨论第63-65页
 5 参考文献第65-67页
全文总结第67-68页
综述一第68-73页
 参考文献第71-73页
综述二第73-85页
 参考文献第80-85页
综述三第85-108页
 参考文献第97-108页
作者简历及在学期间所取得的科研成果第108-109页

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