致谢 | 第1-6页 |
研究背景 | 第6-11页 |
参考文献 | 第8-11页 |
中文摘要 | 第11-15页 |
Abstract | 第15-18页 |
缩略词表 | 第18-20页 |
目次 | 第20-23页 |
第一部分 观察转胶蛋白对肌动蛋白更新的影响 | 第23-43页 |
1 前言 | 第23-25页 |
2 材料和方法 | 第25-28页 |
·细胞培养、质粒构建和瞬时转染 | 第25页 |
·细胞ROS检测 | 第25页 |
·免疫荧光染色 | 第25-26页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blotting | 第26页 |
·F-actin and G-actin转变检测 | 第26-27页 |
·细胞衰老检测 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-37页 |
·转染转胶蛋白导致F-actin增加;抑制转胶蛋白表达导致F-actin减少 | 第28页 |
·转染转胶蛋白使细胞ROS上升 | 第28页 |
·转胶蛋白通过ROS升高导致DNA氧化损伤、激活ATM-Chk2-p53 DNA损伤信号传导途径 | 第28-29页 |
·转胶蛋白和细胞衰老有关 | 第29-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
5 参考文献 | 第40-43页 |
第二部分 观察转胶蛋白和p53之间的相互作用 | 第43-55页 |
1 前言 | 第43-44页 |
2 材料和方法 | 第44-46页 |
·细胞培养、质粒构建和瞬时转染 | 第44页 |
·细胞胞浆、胞核分离 | 第44页 |
·免疫荧光染色 | 第44-45页 |
·哺乳类细胞双杂交 | 第45页 |
·免疫共沉淀 | 第45页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blotting | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-52页 |
·转胶蛋白诱导p53表达并导致胞浆p53增多 | 第46页 |
·转胶蛋白影响p53细胞内分布 | 第46页 |
·细胞内转胶蛋白和p53相互作用 | 第46-52页 |
4 讨论 | 第52-53页 |
5 参考文献 | 第53-55页 |
第三部分 转胶蛋白对p53下游基因及内源性凋亡途径的影响 | 第55-67页 |
1 前言 | 第55-56页 |
2 材料和方法 | 第56-58页 |
·胞培养、质粒和瞬时转染 | 第56页 |
·细胞活力测定 | 第56页 |
·脱氧核苷酸末端转移酶-dUTP裂口端标记 | 第56页 |
·流式细胞计数分析 | 第56-57页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳和western blotting | 第57页 |
·统计学分析 | 第57-58页 |
3 结果 | 第58-63页 |
·转胶蛋白通过p53诱导PUMA蛋白表达,上调Bax表达、抑制Bcl-2蛋白 | 第58页 |
·转胶蛋白抑制LNCaP细胞生长和诱导细胞凋亡 | 第58-63页 |
4 讨论 | 第63-65页 |
5 参考文献 | 第65-67页 |
全文总结 | 第67-68页 |
综述一 | 第68-73页 |
参考文献 | 第71-73页 |
综述二 | 第73-85页 |
参考文献 | 第80-85页 |
综述三 | 第85-108页 |
参考文献 | 第97-108页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第108-109页 |