| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-33页 |
| 1 灰霉病与灰霉病菌 | 第15-17页 |
| ·灰霉病概况 | 第15页 |
| ·灰霉病病害循环 | 第15-16页 |
| ·灰霉病菌侵染过程 | 第16-17页 |
| 2 杀菌剂的作用机制和抗性机理 | 第17-23页 |
| ·杀菌剂介绍 | 第17-18页 |
| ·杀菌剂抗药性 | 第18-19页 |
| ·二甲酰亚胺类杀菌剂抗性机制 | 第19-23页 |
| 3 双组分信号途径 | 第23-30页 |
| ·双组分信号系统的概念 | 第23-25页 |
| ·渗透胁迫有关的双组分信号途径 | 第25-26页 |
| ·植物病原真菌的TCHK信号途径 | 第26-29页 |
| ·TCHK信号途径的负调控元件 | 第29-30页 |
| 4 灰霉病菌研究的分子生物学方法 | 第30-32页 |
| 5 本研究的目的和内容 | 第32-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-54页 |
| 1 试验材料 | 第33-36页 |
| ·菌株和质粒 | 第33页 |
| ·供试植物 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·常用试剂和仪器 | 第34-36页 |
| 2 试验方法 | 第36-54页 |
| ·灰霉菌种的保存与培养 | 第36页 |
| ·灰霉基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
| ·PCR技术 | 第37-38页 |
| ·DNA的琼脂糖电泳 | 第38页 |
| ·PCR产物纯化 | 第38-39页 |
| ·E.Coli DH5a感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| ·DNA克隆技术 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定与提取 | 第41页 |
| ·质粒酶切 | 第41-42页 |
| ·农杆菌电击法转化 | 第42-43页 |
| ·灰霉病菌T-DNA转化 | 第43页 |
| ·灰霉基因组DNA Southern blot分析 | 第43-47页 |
| ·RNA提取与表达量分析 | 第47-48页 |
| ·Western blot分析 | 第48-51页 |
| ·生长速率测定 | 第51-52页 |
| ·产孢量分析 | 第52页 |
| ·灰霉病菌抗胁迫压力的测定 | 第52页 |
| ·灰霉病菌致病性分析 | 第52-54页 |
| 第三章 结果与分析 | 第54-102页 |
| 1 灰霉BOS1基因的分离及其功能研究 | 第54-61页 |
| ·灰霉BOS1基因的分离 | 第54-55页 |
| ·灰霉BOS1点突变菌株的野生型基因转化 | 第55页 |
| ·BOS1基因敲除突变体的获得 | 第55-57页 |
| ·突变体表型分析 | 第57-59页 |
| ·小结 | 第59-61页 |
| 2 灰霉BRRG-1基因的分离及其功能研究 | 第61-73页 |
| ·灰霉病菌BRRG-1基因的克隆及序列分析 | 第61-63页 |
| ·BRRG-1基因缺失突变体和互补转化子的获得 | 第63-66页 |
| ·突变体表型分析 | 第66-71页 |
| ·小结 | 第71-73页 |
| 3 灰霉BOS4基因的分离及其功能研究 | 第73-83页 |
| ·灰霉病菌BOS4基因的克隆及序列分析 | 第73-74页 |
| ·BOS-4基因缺失突变体和互补转化子的获得 | 第74-77页 |
| ·突变体表型分析 | 第77-82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| 4 灰霉BOS5基因的分离及其功能研究 | 第83-97页 |
| ·灰霉病菌BOS5基因的克隆及序列分析 | 第83页 |
| ·BOS5基因缺失突变体和互补转化子的获得 | 第83-87页 |
| ·突变体表型分析 | 第87-96页 |
| ·小结 | 第96-97页 |
| 5 灰霉BOS2基因的分离及其功能研究 | 第97-102页 |
| ·灰霉病菌BOS2基因的克隆及序列分析 | 第97页 |
| ·BOS-2基因缺失突变体的获得 | 第97-98页 |
| ·突变体表型分析 | 第98-100页 |
| ·小结 | 第100-102页 |
| 第四章 全文讨论及后续研究展望 | 第102-108页 |
| 1 全文讨论 | 第102-107页 |
| ·TCHK信号途径调控药剂敏感性 | 第102-103页 |
| ·TCHK信号途径参与渗透压敏感性调控 | 第103-104页 |
| ·TCHK信号途径参与氧化压力反应 | 第104页 |
| ·TCHK信号途径与致病性相关 | 第104-105页 |
| ·TCHK信号途径与菌体生长发育有关 | 第105页 |
| ·总结 | 第105-107页 |
| 2 本研究创新点 | 第107页 |
| 3 后续研究展望 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-116页 |
| 附录 | 第116-120页 |
| 附录A:引物 | 第116-119页 |
| 附录B:个人简历和博士期间发表的学术论文 | 第119-120页 |