中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-19页 |
1 前言 | 第19-24页 |
2 材料与方法 | 第24-47页 |
·实验动物 | 第24页 |
·含尾蚴的阳性钉螺 | 第24-25页 |
·引物设计与合成 | 第25页 |
·药物及试剂 | 第25-27页 |
·部分主要试剂的配制 | 第27-29页 |
·仪器与设备 | 第29-30页 |
·尾蚴诱导的日本血吸虫病肝纤维化小鼠模型的制备 | 第30页 |
·动物分组、给药方案与标本采集处理 | 第30页 |
·肝组织匀浆羟脯氨酸(Hyp)含量测定 | 第30-32页 |
·试剂配制 | 第30-31页 |
·标准曲线的绘制 | 第31页 |
·胃酶酸解法肝组织羟脯氨酸的测定 | 第31-32页 |
·结果计算的判断 | 第32页 |
·肝组织匀浆胶原I(ColI)含量测定 | 第32-33页 |
·肝组织匀浆胶原III(ColIII)含量测定 | 第33页 |
·肝组织匀浆IL-13含量测定 | 第33-34页 |
·肝组织匀浆 IL-13Rα2 含量测定 | 第34-35页 |
·肝脏组织病理学观察及评分标准 | 第35-38页 |
·病理切片的制作 | 第35-36页 |
·HE染色步骤 | 第35-36页 |
·Masson染色步骤 | 第36页 |
·病理组织学观察及分级标准 | 第36页 |
·小鼠肝脏 α-SMA 免疫组化染色定量分析 | 第36-37页 |
·小鼠肝脏ColI免疫组化染色定量分析 | 第37-38页 |
·小鼠HSCs的分离、培养 | 第38-39页 |
·原代HSC增值实验的检测方法 | 第39页 |
·PAE对IL-13刺激小鼠HSCs分泌ColI的影响 | 第39-40页 |
·细胞分组 | 第39页 |
·ELISA检测HSCs上清中ColI浓度 | 第39-40页 |
·RT-PCR 法检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 胞核内 IL-4Rα、IL-13Rα1、IL-13Rα2 基因表达的影响 | 第40-42页 |
·总RNA的提取 | 第40-42页 |
·去RNase处理 | 第40页 |
·HSC总RNA提取 | 第40-41页 |
·HSC总RNA纯度及浓度测定 | 第41页 |
·HSC总RNA完整性检测 | 第41页 |
·cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
·PCR扩增 | 第42页 |
·电泳鉴定及凝胶图像分析 | 第42页 |
·RT-PCR 法检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 胞核内 Col Iα1、Col Iα2 基因表达的影响 | 第42页 |
·RT-PCR 法检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 胞核内 SOCS-1 基因表达的影响 | 第42-43页 |
·蛋白免疫印迹(Western blotting)检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 胞浆内 Col I蛋白表达的影响 | 第43-46页 |
·HSC细胞层蛋白的提取 | 第43页 |
·蛋白定量 | 第43-44页 |
·Western blotting 操作步骤 | 第44-46页 |
·制备聚丙烯酰胺凝胶并蛋白电泳 | 第44-45页 |
·半干式电转移 | 第45页 |
·免疫反应 | 第45页 |
·化学发光、显影、定影 | 第45-46页 |
·照片图像分析 | 第46页 |
·Western blotting检测PAE对rIL-13刺激的HSC胞浆内STAT6、p-STAT6 蛋白表达的影响 | 第46页 |
·蛋白免疫印迹(Western blotting)检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 内 SOCS-1 蛋白表达的影响 | 第46页 |
·统计学处理 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-62页 |
·PAE 对血吸虫性肝纤维化小鼠肝脏组织病理学的影响 | 第47-50页 |
·HE染色 | 第47页 |
·Masson染色 | 第47页 |
·免疫组织化学染色 | 第47-50页 |
·ColI免疫组织化学染色 | 第47页 |
·α-SMA 免疫组织化学染色 | 第47-50页 |
·PAE对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织匀浆羟脯氨酸的影响 | 第50页 |
·PAE 对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织 Col I 和 Col III 表达的影响 | 第50-51页 |
·PAE对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织匀浆IL-13表达的影响 | 第51-52页 |
·PAE 对血吸虫性肝纤维化小鼠肝组织匀浆 IL-13Rα2 表达的影响 | 第52页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的小鼠 HSC 增值的影响 | 第52-53页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 胶原 I 表达的影响 | 第53-56页 |
·ELISA 检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 上清中胶原 I 蛋白含量的影响 | 第53-54页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC 内 Col I 蛋白转录和翻译水平的影响 | 第54-56页 |
·Western blotting 检测 PAE 对 IL-13 刺激的 HSC Col I 蛋白转录水平的影响 | 第54页 |
·RT-PCR检测PAE对IL-13刺激的HSC内ColI蛋白翻译水平的影响 | 第54-56页 |
·PAE 对 IL-13 刺激 HSC 的受体成分的影响 | 第56-57页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC JAK-STAT6 通路的变化及对 SOCS-1 表达的影响 | 第57-62页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC STAT6 磷酸化水平的影响 | 第57-59页 |
·IL-13 刺激的 HSC STAT6 磷酸化水平的变化 | 第57页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC STAT6 磷酸化水平的影响 | 第57-59页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC SOCS-1 表达的影响 | 第59-62页 |
·IL-13 刺激的 HSC SOCS-1 表达水平的变化 | 第59-60页 |
·PAE 对 IL-13 刺激的 HSC SOCS-1 表达水平的影响 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
6 参考文献 | 第73-84页 |
附录一 个人简历 | 第84-86页 |
附录二 致谢 | 第86-87页 |
附录三 综述 | 第87-98页 |