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金银花内生真菌的分离鉴定和抗菌性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 前言第11-22页
   ·目的及研究意义第11-12页
   ·课题相关背景介绍第12-13页
     ·植物内生真菌的概念第12页
     ·植物内生真菌与宿主植物的关系第12页
     ·药用植物内生真菌及其产生物活性物质的理论基础第12-13页
   ·国内外研究进展第13-19页
     ·植物内生真菌分离方法的研究第13-14页
     ·内生真菌的形态学及种属鉴定第14-15页
     ·植物内生真菌的种类及活性成分第15-16页
     ·药用植物内生真菌的多样性研究第16-18页
     ·内生真菌中次生代谢产物的有效成分第18页
     ·药用植物内生真菌的筛选方法及活性物质的鉴定第18-19页
   ·中草药植物第19-20页
     ·中草药植物的介绍第19页
     ·金银花及其药用化学成分第19-20页
   ·选题依据及论文设计思路第20-22页
第二章 内生真菌的分离和形态学鉴定第22-33页
   ·实验材料第22页
     ·植物材料第22页
     ·培养基及主要溶液的配制第22页
   ·主要仪器设备第22-23页
   ·实验方法第23-24页
     ·表面消毒时间的确定第23页
     ·内生真菌的分离第23-24页
     ·内生真菌的形态学鉴定第24页
   ·结果与分析第24-31页
     ·内生真菌的分离结果第24-26页
     ·金银花内生真菌的形态学鉴定结果第26-31页
   ·讨论第31-33页
     ·植物材料的选择第31页
     ·消毒效果的检测第31页
     ·内生真菌的分离纯化第31-32页
     ·内生真菌的分类鉴定第32-33页
第三章 高效抑菌JY2 和JY9 菌株的分子生物学鉴定第33-45页
   ·实验材料第33页
     ·鉴定菌种第33页
     ·PCR 引物第33页
   ·实验试剂和器材第33-34页
     ·实验试剂第33-34页
     ·主要仪器设备第34页
   ·实验方法第34-39页
     ·实验所用试剂配置方法第34-35页
     ·内生真菌的活化第35-36页
     ·基因组总DNA 的提取第36页
     ·基因组总DNA 的检测第36页
     ·目的片段的PCR 扩增第36-37页
     ·PCR 扩增产物的回收第37页
     ·感受态细胞的制备第37-38页
     ·PCR 产物的连接及转化第38-39页
     ·穿刺培养第39页
     ·PCR 克隆产物的序列测定第39页
     ·DNA 序列分析及系统发育树的构建第39页
   ·结果与分析第39-43页
     ·PCR 获得的ITS 产物第39-40页
     ·PCR 扩增纯化回收第40页
     ·重组质粒PCR 鉴定第40-41页
     ·rDNA-ITS 序列测序第41-42页
     ·系统发育树的构建第42-43页
   ·讨论第43-45页
第四章 高效抑菌菌株的筛选及发酵条件的优化第45-55页
   ·实验材料第45页
     ·金银花内生真菌第45页
     ·供试菌第45页
     ·培养基第45页
   ·主要仪器设备第45-46页
   ·实验方法第46-48页
     ·抗菌内生菌的初步筛选和抑菌活性测定第46页
     ·产抑菌活性物质的发酵条件优化第46-48页
   ·结果与分析第48-53页
     ·抑菌能力的测定第48页
     ·产抑菌活性物质的发酵条件优化第48-53页
   ·讨论第53-55页
第五章 JY2 和JY9 菌株活性物质的初步研究第55-70页
   ·实验材料第55-56页
     ·菌种第55页
     ·培养基第55页
     ·实验药品及主要试剂的配制第55-56页
   ·主要仪器设备第56页
   ·实验方法第56-60页
     ·抑菌活性物质的特性初步研究第56-57页
     ·抑菌活性物质成分的鉴定第57页
     ·多糖含量的测定(苯酚-硫酸法)第57-58页
     ·抗菌物质的初步分离第58页
     ·硅胶柱层析第58-59页
     ·高效液相色谱(HPLC)第59页
     ·结构分析第59-60页
   ·结果与分析第60-68页
     ·抑菌活性物质的特性第60-62页
     ·发酵液抑菌活性成分的初步鉴定第62页
     ·多糖含量的测定第62-63页
     ·抑菌活性成分的初步极性分析第63-64页
     ·JY2 和JY9 活性物质的分离第64-65页
     ·高效液相色谱第65-66页
     ·JY2-50 和JY9-80 的红外光谱分析第66-67页
     ·JY2-50 和JY9-80 的液质联用分析第67-68页
   ·讨论第68-70页
第六章 结论第70-72页
参考文献第72-77页
致谢第77-78页
个人简历第78页

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