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猕猴桃、枣高效再生体系的建立及农杆菌介导的遗传转化研究

致谢第1-12页
缩略词表第12-13页
摘要第13-15页
第一章 文献综述第15-30页
   ·果树遗传转化方法第15-19页
     ·载体转化系统第15-17页
     ·直接转化系统第17-18页
     ·种质系统介导遗传转化第18-19页
   ·影响农杆菌介导果树遗传转化的主要因素第19-21页
     ·受体系统的建立第19页
     ·受体材料的预培养第19页
     ·不同的农杆菌的侵染能力第19页
     ·农杆菌菌液浓度和侵染时间第19-20页
     ·共培养时间第20页
     ·选择标记基因与转化细胞的筛选第20-21页
     ·转基因植株的鉴定第21页
   ·基因工程在果树育种中的应用第21-23页
     ·抗病、虫害新品种的培育第21-22页
     ·果实性状的改良第22页
     ·矮化品种的培育第22页
     ·提高果树抗逆性第22页
     ·其它性状的改良第22-23页
   ·猕猴桃组织培养及遗传转化研究进展第23-24页
     ·猕猴桃组织培养研究进展第23-24页
     ·猕猴桃遗传转化研究进展第24页
   ·枣叶片直接再生及遗传转化研究进展第24-26页
     ·枣叶片直接再生的研究进展第24-25页
     ·枣遗传转化的研究进展第25-26页
   ·抗菌肽及其在果树抗病基因工程中的应用第26页
     ·抗菌肽的产生第26页
     ·抗菌肽在植物基因工程中的应用第26页
   ·果树遗传转化研究的优势及存在的问题第26-27页
     ·果树遗传转化研究的优势第26-27页
     ·果树遗传转化研究存在的问题第27页
   ·研究意义与技术路线第27-30页
     ·研究意义第27-28页
     ·技术路线第28-30页
第二章 中华猕猴桃叶片再生体系的建立第30-36页
 1 材料与方法第30-31页
   ·材料第30-31页
     ·植物材料第30页
     ·药品试剂第30页
     ·仪器设备第30-31页
   ·方法第31页
     ·中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片愈伤组织及不定芽的诱导第31页
     ·叶片诱导不定芽的增殖培养第31页
     ·叶片诱导不定芽的生根培养第31页
     ·培养条件第31页
     ·数据统计与分析第31页
 2 结果与分析第31-34页
   ·愈伤组织的诱导与不定芽再生第31-33页
   ·不定芽的增殖培养第33页
   ·不定芽的生根培养第33-34页
 3 结论与讨论第34-35页
 图版第35-36页
第三章 抗生素对中华猕猴桃外植体生长的影响第36-45页
 1 材料与方法第36-37页
   ·材料第36页
   ·培养基及主要试剂第36-37页
   ·方法第37页
     ·抗生素对叶片愈伤组织及不定芽诱导的影响第37页
     ·抗生素对生根的影响第37页
     ·遗传转化选择培养中抗菌素及浓度的确定第37页
   ·数据处理第37页
 2 结果与分析第37-41页
   ·抗生素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片愈伤组织及不定芽诱导的影响第37-40页
     ·卡那霉素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片愈伤组织及不定芽诱导的影响第37-38页
     ·抑菌抗生素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片愈伤组织及不定芽诱导的影响第38-40页
   ·抗生素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’不定芽生根的影响第40-41页
     ·卡那霉素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’不定芽生根的影响第40页
     ·头孢霉素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’不定芽生根的影响第40-41页
   ·选择培养中抑菌素及浓度的确定第41页
 3 结论与讨论第41-43页
 图版第43-45页
第四章 农杆菌介导中华猕猴桃遗传转化体系的建立第45-55页
 1 材料与方法第45-50页
   ·材料第45-46页
     ·植物材料与质粒第45-46页
     ·培养基第46页
   ·主要仪器、试剂及溶液配制第46-47页
     ·主要仪器第46页
     ·试剂第46页
     ·主要试剂配制方法第46-47页
   ·方法第47-50页
     ·外植体准备第47页
     ·农杆菌培养和活化第47-48页
     ·转化第48页
     ·影响农杆菌转化效果的因素第48页
     ·GUS组织化学检测第48页
     ·转基因猕猴桃的分子生物学鉴定第48-50页
 2 结果与分析第50-53页
   ·不同侵染方式对GUS基因瞬时表达率的影响第50页
   ·预培养时间对GUS基因瞬时表达率的影响第50页
   ·菌液浓度对GUS基因瞬时表达率的影响第50-51页
   ·共培养时间对GUS基因瞬时表达率的影响第51页
   ·转化植株再生与分子检测第51-53页
     ·转化植株及GUS组织化学检测第51页
     ·转化植株分子检测第51-53页
 3 结论与讨论第53-55页
   ·侵染方式第53页
   ·预培养时间第53页
   ·菌液浓度第53-54页
   ·共培养时间第54-55页
第五章 农杆菌介导抗菌肽D基因转化中华猕猴桃的研究第55-64页
 1 材料与方法第55-60页
   ·材料第55页
   ·转化第55-56页
     ·菌液制备第55页
     ·遗传转化第55-56页
     ·不同筛选方式对遗传转化的影响第56页
   ·猕猴桃基因组DNA的提取及酶切第56-57页
     ·猕猴桃基因组DNA的提取第56页
     ·猕猴桃基因组DNA的酶切第56-57页
   ·转基因植株PCR检测第57页
   ·转基因植株的Southern印迹杂交检测第57-60页
     ·主要仪器第57页
     ·溶液配制第57-58页
     ·样品制备第58页
     ·探针的制备第58页
     ·转膜(高盐转移法)第58-59页
     ·杂交第59页
     ·洗膜和免疫检测第59-60页
 2. 结果与分析第60-62页
   ·筛选方式对转化率的影响第60页
   ·转抗菌肽D基因植株的获得第60页
   ·转基因猕猴桃的PCR检测第60-61页
   ·转基因植株的Southern杂交检测第61-62页
     ·PCR-Southern blot检测第61-62页
     ·Southern blot检测第62页
 3. 结论与讨论第62-64页
第六章 灰枣组培快繁体系的建立第64-75页
 1 材料与方法第64-66页
   ·材料第64-65页
   ·试验方法第65-66页
     ·灰枣组织培养启动培养第65页
     ·继代培养第65页
     ·生根培养第65-66页
 2 结果与分析第66-71页
   ·启动培养第66-69页
     ·不同灭菌时间对外植体灭菌的影响第66页
     ·抗生素对污染的抑制效果第66-67页
     ·抗生素对灰枣外植体腋芽萌芽率的影响第67-68页
     ·启动培养基的筛选第68-69页
   ·不同植物生长调节物质对继代培养的影响第69-70页
   ·不同生长素及浓度对不定芽生根的影响第70-71页
 3 结论与讨论第71-73页
   ·灰枣的启动培养第71-72页
     ·外植体的灭菌处理第71页
     ·抗生素对污染的抑制第71-72页
     ·抗生素对外植体生长的影响第72页
     ·灰枣启动培养基的筛选第72页
   ·灰枣不定芽的继代培养第72-73页
   ·灰枣不定芽的生根培养第73页
 图版第73-75页
第七章 灰枣叶片直接分化不定芽的研究第75-82页
 1 材料与方法第75-76页
   ·材料第75页
   ·试验方法第75-76页
     ·叶片再生培养基的筛选第75页
     ·影响叶片再生的因素第75页
     ·数据统计与分析第75-76页
 2 结果与分析第76-79页
   ·培养基对灰枣叶片再生不定芽的影响第76-77页
   ·不同部位叶片对灰枣叶片再生不定芽的影响第77页
   ·同一叶片不同部位对灰枣叶片再生不定芽的影响第77-78页
   ·接种方向对灰枣叶片再生不定芽的影响第78页
   ·蔗糖浓度对灰枣叶片再生不定芽的影响第78-79页
   ·暗培养时间对灰枣叶片再生不定芽的影响第79页
 3 结论与讨论第79-81页
   ·外植体对灰枣叶片再生不定芽的影响第79-80页
   ·培养基对灰枣叶片再生不定芽的影响第80页
   ·光照条件对灰枣叶片再生的影响第80页
   ·蔗糖对灰枣叶片再生的影响第80-81页
 图版第81-82页
第八章 乙烯抑制剂对灰枣叶片再生的影响第82-85页
 1 材料与方法第82-83页
   ·材料第82页
   ·试验方法第82-83页
     ·硝酸银对枣不定芽再生的影响第82页
     ·硫代硫酸银对枣不定芽再生的影响第82页
     ·数据统计与分析第82-83页
 2 结果与分析第83-84页
   ·硝酸银对灰枣叶片不定芽再生的影响第83页
   ·硫代硫酸银对枣不定芽再生的影响第83-84页
 3 结论与讨论第84-85页
第九章 灰枣对抗生素敏感性及遗传转化的研究第85-91页
 1 材料与方法第85-86页
   ·材料第85页
   ·试验方法第85-86页
     ·灰枣对Kan敏感性试验第85页
     ·农杆菌菌液的制备第85页
     ·转化第85-86页
     ·抑菌抗生素对外植体共培养后抑菌效果第86页
     ·转化植株的获得与检测第86页
 2 结果与分析第86-88页
   ·灰枣对卡那霉素的敏感性试验第86页
   ·不同浓度头孢霉素抑菌效果第86-87页
   ·共培养时间对抗性芽再生的影响第87页
   ·转GUS基因植株的获得及检测第87-88页
 3 结论与讨论第88-89页
   ·灰枣遗传转化中卡那霉素浓度的筛选第88页
   ·灰枣遗传转化中抑菌素浓度的筛选第88页
   ·灰枣遗传转化中共培养时间的筛选第88页
   ·转化植株的获得与检测第88-89页
 图版第89-90页
 图版说明第90-91页
参考文献第91-104页
英文摘要第104-107页
在博士研究生学习期间发表相关论文情况第107页

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