| 英文缩写 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一部分 LEPCs的分选与鉴定 | 第16-27页 |
| 材料与方法 | 第16-21页 |
| 1 实验材料 | 第16页 |
| 2 仪器和试剂 | 第16-17页 |
| ·仪器 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16-17页 |
| 3 脐带血单形核细胞的分离 | 第17-21页 |
| ·Ficoll液与血液的稀释 | 第17页 |
| ·单形核细胞分离 | 第17-18页 |
| ·LEPCs的分选和鉴定 | 第18-19页 |
| ·LEPCs的分选 | 第18页 |
| ·分选后细胞的免疫荧光鉴定 | 第18-19页 |
| ·LEPCs的诱导分化和分化细胞的免疫荧光鉴定 | 第19-21页 |
| ·LEPCs的诱导分化 | 第19页 |
| ·分化细胞的免疫荧光鉴定 | 第19-21页 |
| 结果 | 第21-24页 |
| 讨论 | 第24-27页 |
| 第二部分 VEGFR-3 siRNA纳米粒载体PEI-alginate的制备与检测 | 第27-46页 |
| 材料和方法 | 第27-37页 |
| 1 实验材料 | 第27页 |
| 2 仪器和试剂 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27-28页 |
| 3 实验方法 | 第28-37页 |
| ·VEGFR-3 siRNA的设计合成 | 第28-29页 |
| ·PEI-alginate纳米粒的制备 | 第29页 |
| ·PEI溶液的配制 | 第29页 |
| ·alginate溶液的配制 | 第29页 |
| ·PEI-alginate及PEI-alginate/siRNA纳米粒的合成 | 第29页 |
| ·PEI-alginate及PEI-alginate/siRNA纳米粒表征分析 | 第29页 |
| ·噻唑蓝(MTT)法检测转染后的LEPCs的增殖活性 | 第29-30页 |
| ·siRNA凝胶阻滞分析试验 | 第30-31页 |
| ·体外转染实验 | 第31-32页 |
| ·扫描电镜检测 | 第32页 |
| ·透射电镜检测 | 第32-33页 |
| ·VEGFR-3基因抑制效率的检测 | 第33-37页 |
| ·RT-PCR分析 | 第33-36页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·总RNA浓度分析和电泳鉴定 | 第34页 |
| ·RT-PCR检测 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR结果分析 | 第35-36页 |
| ·Western blot检测 | 第36-37页 |
| ·制备细胞全蛋白 | 第36页 |
| ·Western blot检测 | 第36-37页 |
| 结果 | 第37-43页 |
| 1 PEI-alginate及PEI-alginate/siRNA纳米粒表征分析 | 第37-38页 |
| 2 PEI-alginate/siRNA凝胶阻滞结果分析 | 第38-39页 |
| 3 MTT法检测转染后的LEPCs的增殖活性 | 第39-40页 |
| 4 扫描电镜检测 | 第40页 |
| 5 透射电镜检测 | 第40-41页 |
| 6 体外转染实验结果 | 第41页 |
| 7 RT-PCR结果分析 | 第41-42页 |
| 8 Western blot检测结果分析 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 第三部分 VEGFR-3 siRNA干扰LEPCs抗肿瘤淋巴管新生 | 第46-55页 |
| 材料和方法 | 第46-49页 |
| 1 实验材料 | 第46页 |
| 2 仪器和试剂 | 第46-47页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-47页 |
| 3 实验方法 | 第47-49页 |
| ·人脐带血单形核细胞的分离 | 第47页 |
| ·单形核细胞的分离 | 第47页 |
| ·LEPCs的分选和标志物检测 | 第47页 |
| ·S180细胞培养 | 第47-48页 |
| ·PEI-alginate/siRNA转染LEPCs | 第48页 |
| ·S180肿瘤模型建立与LEPCs移植实验 | 第48页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第48页 |
| ·统计学分析 | 第48-49页 |
| 结果 | 第49-52页 |
| 1 移植瘤的形成 | 第49页 |
| 2 肿瘤组织内移植的LEPCs的鉴定 | 第49-50页 |
| 3 肿瘤组织中的淋巴管新生 | 第50-52页 |
| 讨论 | 第52-55页 |
| 全文小结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 综述 | 第63-70页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 在校期间发表论文 | 第71-72页 |
