摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-25页 |
1.1 长链非编码RNA(LncRNA)的概述 | 第12-15页 |
1.1.1 LncRNA的结构与分类 | 第12-13页 |
1.1.2 LncRNA的生物学功能 | 第13-15页 |
1.2 LncRNA与肿瘤 | 第15-19页 |
1.2.1 LncRNA在表观遗传学中的作用 | 第16-17页 |
1.2.2 LncRNA在肿瘤中发挥抑癌作用 | 第17-18页 |
1.2.3 LncRNA在肿瘤中发挥促癌作用 | 第18-19页 |
1.3 LncRNA与胃癌 | 第19-22页 |
1.3.1 LncRNA调节胃癌细胞的增殖 | 第20-21页 |
1.3.2 LncRNA调节胃癌细胞的侵袭和转移 | 第21页 |
1.3.3 LncRNA在胃癌中的临床意义 | 第21-22页 |
1.4 LncRNA与上皮-间充质转化(EMT) | 第22-25页 |
1.4.1 EMT的概述 | 第22-23页 |
1.4.2 EMT与LncRNA | 第23-25页 |
第二章 研究目的、方案设计和意义 | 第25-28页 |
2.1 研究目的 | 第25页 |
2.2 研究方案设计 | 第25-27页 |
2.3 研究意义 | 第27-28页 |
第三章 LINC00978在胃癌中的表达和临床意义 | 第28-41页 |
3.1 材料 | 第28-31页 |
3.1.1 临床样本来源 | 第28-29页 |
3.1.2 细胞株 | 第29页 |
3.1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
3.1.4 主要仪器和耗材 | 第30页 |
3.1.5 引物设计与合成 | 第30-31页 |
3.2 方法 | 第31-35页 |
3.2.1 细胞培养 | 第31页 |
3.2.2 细胞总RNA的提取 | 第31-32页 |
3.2.3 组织、血清样本采集 | 第32页 |
3.2.4 组织样本总RNA提取 | 第32-33页 |
3.2.5 血清样本总RNA提取 | 第33-34页 |
3.2.6 逆转录PCR | 第34-35页 |
3.2.7 实时荧光定量PCR | 第35页 |
3.2.8 统计分析 | 第35页 |
3.3 结果 | 第35-39页 |
3.3.1 数据库分析LINC00978在胃癌组织中的表达 | 第35-36页 |
3.3.2 LINC00978在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达的检测及临床意义分析 | 第36-38页 |
3.3.3 LINC00978在胃癌患者血清中表达检测 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
第四章 shRNA干扰LINC00978后对胃癌细胞生长的影响 | 第41-57页 |
4.1 材料 | 第41-42页 |
4.1.1 细胞株 | 第41页 |
4.1.2 实验动物 | 第41页 |
4.1.3 主要试剂 | 第41-42页 |
4.1.4 主要仪器和耗材 | 第42页 |
4.2 方法 | 第42-49页 |
4.2.1 细胞培养 | 第42页 |
4.2.2 质粒的提取 | 第42-43页 |
4.2.3 质粒转染 | 第43-44页 |
4.2.4 细胞总RNA提取 | 第44页 |
4.2.5 逆转录PCR | 第44页 |
4.2.6 实时定量PCR | 第44页 |
4.2.7 细胞生长曲线测定 | 第44页 |
4.2.8 细胞克隆形成实验 | 第44-45页 |
4.2.9 裸鼠皮下荷瘤模型 | 第45页 |
4.2.10 免疫组织化学染色 | 第45-46页 |
4.2.11 肿瘤组织病理分析 | 第46页 |
4.2.12 细胞周期测定 | 第46-47页 |
4.2.13 细胞凋亡检测 | 第47页 |
4.2.14 细胞总蛋白提取 | 第47-48页 |
4.2.15 Westernblot | 第48-49页 |
4.2.16 统计分析 | 第49页 |
4.3 结果 | 第49-55页 |
4.3.1 MGC-803及SGC-7901直接干扰LINC00978效率的检测 | 第49-50页 |
4.3.2 LINC00978干扰对胃癌细胞体外增殖能力的影响 | 第50-51页 |
4.3.3 LINC00978干扰MGC-803细胞对裸鼠体内成瘤能力的影响 | 第51-52页 |
4.3.4 免疫组织化学染色对肿瘤进行组织病理学分析 | 第52-53页 |
4.3.5 LINC00978对胃癌细胞细胞周期及细胞凋亡的影响 | 第53-55页 |
4.4 讨论 | 第55-57页 |
第五章 shRNA干扰LINC00978后对胃癌细胞转移和EMT的影响 | 第57-64页 |
5.1 材料 | 第57页 |
5.1.1 细胞株 | 第57页 |
5.1.2 主要试剂 | 第57页 |
5.1.3 主要仪器和耗材 | 第57页 |
5.2 方法 | 第57-59页 |
5.2.1 细胞培养 | 第57-58页 |
5.2.2 细胞转染 | 第58页 |
5.2.3 细胞总RNA提取 | 第58页 |
5.2.4 逆转录PCR | 第58页 |
5.2.5 实时荧光定量PCR | 第58页 |
5.2.6 Transwell细胞迁移和侵袭实验 | 第58-59页 |
5.2.7 细胞总蛋白提取 | 第59页 |
5.2.8 Westernblot | 第59页 |
5.2.9 统计分析 | 第59页 |
5.3 结果 | 第59-63页 |
5.3.1 LINC00978干扰对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响 | 第59-60页 |
5.3.2 LINC00978干扰胃癌细胞后EMT相关基因的表达水平 | 第60-62页 |
5.3.3 LINC00978对TGF-β/SMAD信号通路的影响 | 第62页 |
5.3.4 LINC00978干扰后MGC-803和SGC-7901细胞形态的改变 | 第62-63页 |
5.4 讨论 | 第63-64页 |
第六章 结论与展望 | 第64-65页 |
6.1 结论 | 第64页 |
6.2 展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
致谢 | 第72-74页 |
攻读硕士学位期间发表的科研成果 | 第74页 |