缩略语表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-17页 |
前言 | 第17-19页 |
文献回顾 | 第19-33页 |
正文 | 第33-72页 |
实验一 血管内皮特异性 RTEF-1 过表达转基因小鼠的建立、鉴定及其在压力负荷下的心脏变化 | 第33-50页 |
1 实验材料 | 第33-37页 |
·主要仪器设备 | 第33页 |
·实验动物 | 第33-34页 |
·主要试剂 | 第34-37页 |
·引物序列 | 第37页 |
·耗材 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-40页 |
·血管内皮特异性RTEF-1 过表达转基因小鼠的构建 | 第37-38页 |
·血管内皮特异性RTEF-1 过表达转基因小鼠的鉴定 | 第38页 |
·新生乳鼠内皮细胞的分离 | 第38页 |
·主动脉缩窄手术 | 第38-39页 |
·超声心动图 | 第39页 |
·心脏胫骨比 | 第39页 |
·心脏冰冻切片及染色 | 第39页 |
·心脏组织和细胞的RNA提取、反转录以及QPCR | 第39-40页 |
·心脏组织和细胞的蛋白提取以及Western blot | 第40页 |
3 实验结果 | 第40-47页 |
·血管内皮特异性RTEF-1 过表达转基因小鼠的建立 | 第40-42页 |
·压力负荷刺激后血管内皮特异性RTEF-1 过表达转基因小鼠的心脏改变 | 第42-45页 |
·压力负荷刺激后血管内皮特异性RTEF-1 过表达转基因小鼠心脏中血管内皮生长因子及其血管密度的变化 | 第45-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
实验二 RTEF-1 转录调节血管内皮生长因子B的表达及其可能机制 | 第50-62页 |
1 实验材料 | 第50-52页 |
·主要仪器设备 | 第50页 |
·主要试剂 | 第50-51页 |
·引物序列和siRNA序列 | 第51页 |
·耗材 | 第51-52页 |
2 实验方法 | 第52-55页 |
·细胞培养 | 第52页 |
·逆转录病毒的扩增和感染 | 第52-53页 |
·siRNA的转染 | 第53页 |
·双荧光素酶启动子活性实验 | 第53页 |
·ChIP实验 | 第53-55页 |
3 实验结果 | 第55-59页 |
·稳定过表达RTEF-1 的人真皮微血管内皮细胞系 | 第55-56页 |
·内皮细胞中RTEF-1 与血管内皮生长因子B的关系 | 第56-58页 |
·RTEF-1 上调VEGF-B启动子活性 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
实验三 RTEF-1 诱导的VEGF-B的促心肌肥厚效应及其关键信号分子 | 第62-72页 |
1 实验材料 | 第62-64页 |
·实验动物 | 第62页 |
·主要试剂 | 第62-63页 |
·QPCR引物序列和siRNA序列 | 第63-64页 |
2 实验方法 | 第64-65页 |
·细胞培养 | 第64页 |
·VEGF-B siRNA的转染 | 第64-65页 |
3 实验结果 | 第65-69页 |
·过表达RTEF-1 的内皮细胞促心肌肥厚效应分子的表达 | 第65-66页 |
·过表达RTEF-1 内皮细胞的促心肌肥厚效应分子—血管内皮生长因子B | 第66-67页 |
·血管内皮生长因子促心肌肥厚的关键信号转导分子—ERK1/2 | 第67-69页 |
4 讨论 | 第69-72页 |
小结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-85页 |
个人简历和研究成果 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |