| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略语表 | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 外源基因瞬时表达 | 第11-16页 |
| 1.1.1 植物外源基因瞬时表达概述 | 第11页 |
| 1.1.2 瞬时表达系统中常用的报告基因 | 第11-16页 |
| 1.2 瞬时表达外源基因的方法 | 第16-19页 |
| 1.2.1 裸露DNA直接导入法 | 第17页 |
| 1.2.2 农杆菌介导法 | 第17-19页 |
| 1.2.3 病毒介导的转化法 | 第19页 |
| 1.3 植物诱导型启动子 | 第19-21页 |
| 1.4 人工合成启动子研究进展 | 第21-22页 |
| 1.5 本课题研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第2章 以eGFP为报告基因的棉花瞬时表达系统的建立 | 第23-41页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第23-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌种材料 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 菌种培养及鉴定 | 第27-30页 |
| 2.2.2 子叶注射及共培养 | 第30页 |
| 2.2.3 eGFP荧光检测 | 第30页 |
| 2.2.4 半定量PCR | 第30-32页 |
| 2.2.5 免疫组织化学检测eGFP蛋白 | 第32-34页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第34-38页 |
| 2.3.1 35S启动子与eGFP融合表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.3.2 棉花子叶瞬时表达eGFP的荧光检测 | 第35-37页 |
| 2.3.3 瞬时表达eGFP的定量分析 | 第37-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-41页 |
| 第3章 棉花诱导型启动子的人工构建及活性分析 | 第41-67页 |
| 3.1 实验材料与设备 | 第41-42页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 3.1.2 菌种材料 | 第41-42页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.4 主要仪器和设备 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-51页 |
| 3.2.1 棉花DREB1启动子融合eGFP表达载体的构建 | 第42-46页 |
| 3.2.2 D-7系列启动子融合eGFP植物表达载体的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.3 含28 nt的植物表达载体的构建 | 第47-49页 |
| 3.2.4 瞬时表达分析启动子活性 | 第49页 |
| 3.2.5 转基因拟南芥的获得 | 第49-50页 |
| 3.2.6 各类启动子的干旱诱导活性分析 | 第50-51页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第51-63页 |
| 3.3.1 载体构建 | 第51-58页 |
| 3.3.2 棉花子叶瞬时表达系统分析各类启动子活性 | 第58-59页 |
| 3.3.3 转基因拟南芥的启动子活性分析 | 第59-63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-67页 |
| 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第83页 |
