中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
英文缩略表 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-16页 |
1.1 前言 | 第10-11页 |
1.1.1 马铃薯的简述 | 第10页 |
1.1.2 青枯菌的危害 | 第10页 |
1.1.3 马铃薯的抗性研究及意义 | 第10-11页 |
1.2 植物细胞壁蛋白研究进展 | 第11-15页 |
1.2.1 植物细胞壁蛋白的分类与功能概述 | 第11-12页 |
1.2.2 植物细胞壁蛋白的防御功能的研究进展 | 第12-15页 |
1.2.3 马铃薯细胞壁蛋白的研究进展 | 第15页 |
1.3 本论文的研究内容与拟解决的关键问题 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-22页 |
2.1 材料 | 第16页 |
2.1.1 植物材料 | 第16页 |
2.1.2 菌种材料 | 第16页 |
2.1.3 设备 | 第16页 |
2.2 方法 | 第16-21页 |
2.2.1 材料培养 | 第16-17页 |
2.2.2 接种 | 第17页 |
2.2.3 植物激素处理 | 第17-18页 |
2.2.4 总RNA的提取 | 第18页 |
2.2.5 SMART反转录 | 第18页 |
2.2.6 cDNA纯化 | 第18-19页 |
2.2.7 cDNA文库的构建 | 第19页 |
2.2.8 克隆细胞壁蛋白基因特异序列 | 第19页 |
2.2.9 筛选测序及验证克隆PCR | 第19页 |
2.2.10 生物信息学分析 | 第19-20页 |
2.2.11 Real-time PCR | 第20-21页 |
2.2.12 原位杂交 | 第21页 |
2.3 统计学分析 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-38页 |
3.1 TOTAL RNA质量检测 | 第22-23页 |
3.1.1 纯度检测 | 第22页 |
3.1.2 电泳检测 | 第22-23页 |
3.2 CDNA双链电泳检测 | 第23-24页 |
3.3 细胞壁蛋白基因CDNA的克隆 | 第24页 |
3.4 细胞壁蛋白基因CDNA序列分析 | 第24-28页 |
3.4.1 核苷酸序列分析 | 第24-25页 |
3.4.2 氨基酸一、二、三级结构预测、分析 | 第25-28页 |
3.5 系统发育树的构建 | 第28-29页 |
3.6 青枯菌诱导的CWP基因表达模式 | 第29-30页 |
3.7 不同植物激素影响细胞壁蛋白基因的表达 | 第30-36页 |
3.8 CWP基因表达的组织定位 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
4.1 马铃薯细胞壁蛋白的序列相似性显示其为同一个家族的成员 | 第38页 |
4.2 马铃薯细胞壁蛋白受激发子诱导参与青枯病抗性 | 第38-39页 |
4.3 CWP防卫相关基因可能参与的生物学途径 | 第39-42页 |
5 结论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-50页 |
附录 | 第50-56页 |
1.SMART反转录(Clontech试剂盒) | 第50页 |
2.cDNA纯化(Clontech试剂盒) | 第50-51页 |
3.cDNA文库的构建 | 第51页 |
4.筛选测序及5′-RACE法克隆细胞壁蛋白基因序列 | 第51-52页 |
5.Real-time PCR | 第52页 |
6.原位杂交 | 第52-56页 |
在校期间研究成果 | 第56-58页 |
致谢 | 第58页 |