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马铃薯细胞壁蛋白基因的克隆及表达

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
英文缩略表第9-10页
1 绪论第10-16页
    1.1 前言第10-11页
        1.1.1 马铃薯的简述第10页
        1.1.2 青枯菌的危害第10页
        1.1.3 马铃薯的抗性研究及意义第10-11页
    1.2 植物细胞壁蛋白研究进展第11-15页
        1.2.1 植物细胞壁蛋白的分类与功能概述第11-12页
        1.2.2 植物细胞壁蛋白的防御功能的研究进展第12-15页
        1.2.3 马铃薯细胞壁蛋白的研究进展第15页
    1.3 本论文的研究内容与拟解决的关键问题第15-16页
2 材料与方法第16-22页
    2.1 材料第16页
        2.1.1 植物材料第16页
        2.1.2 菌种材料第16页
        2.1.3 设备第16页
    2.2 方法第16-21页
        2.2.1 材料培养第16-17页
        2.2.2 接种第17页
        2.2.3 植物激素处理第17-18页
        2.2.4 总RNA的提取第18页
        2.2.5 SMART反转录第18页
        2.2.6 cDNA纯化第18-19页
        2.2.7 cDNA文库的构建第19页
        2.2.8 克隆细胞壁蛋白基因特异序列第19页
        2.2.9 筛选测序及验证克隆PCR第19页
        2.2.10 生物信息学分析第19-20页
        2.2.11 Real-time PCR第20-21页
        2.2.12 原位杂交第21页
    2.3 统计学分析第21-22页
3 结果与分析第22-38页
    3.1 TOTAL RNA质量检测第22-23页
        3.1.1 纯度检测第22页
        3.1.2 电泳检测第22-23页
    3.2 CDNA双链电泳检测第23-24页
    3.3 细胞壁蛋白基因CDNA的克隆第24页
    3.4 细胞壁蛋白基因CDNA序列分析第24-28页
        3.4.1 核苷酸序列分析第24-25页
        3.4.2 氨基酸一、二、三级结构预测、分析第25-28页
    3.5 系统发育树的构建第28-29页
    3.6 青枯菌诱导的CWP基因表达模式第29-30页
    3.7 不同植物激素影响细胞壁蛋白基因的表达第30-36页
    3.8 CWP基因表达的组织定位第36-38页
4 讨论第38-42页
    4.1 马铃薯细胞壁蛋白的序列相似性显示其为同一个家族的成员第38页
    4.2 马铃薯细胞壁蛋白受激发子诱导参与青枯病抗性第38-39页
    4.3 CWP防卫相关基因可能参与的生物学途径第39-42页
5 结论第42-44页
参考文献第44-50页
附录第50-56页
    1.SMART反转录(Clontech试剂盒)第50页
    2.cDNA纯化(Clontech试剂盒)第50-51页
    3.cDNA文库的构建第51页
    4.筛选测序及5′-RACE法克隆细胞壁蛋白基因序列第51-52页
    5.Real-time PCR第52页
    6.原位杂交第52-56页
在校期间研究成果第56-58页
致谢第58页

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