中文摘要 | 第11-13页 |
ABSTRACT | 第13-15页 |
第一章 综述 | 第16-22页 |
1.1 阿尔茨海默症(AD)的概述及其发病机理 | 第16页 |
1.2 乙酰胆碱酯酶(AChE)的概述以及AD的治疗 | 第16-18页 |
1.3 连翘的概述 | 第18-20页 |
1.4 化合物与蛋白相互作用的研究意义以及研究方法 | 第20-21页 |
1.5 本课题的研究目的及研究内容 | 第21-22页 |
1.5.1 研究目的 | 第21页 |
1.5.2 研究内容 | 第21-22页 |
第二章 青翘的提取、分离以及对乙酰胆碱酯酶的抑制研究 | 第22-36页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 实验试剂和仪器 | 第22-23页 |
2.2.1 实验试剂 | 第22-23页 |
2.2.2 实验仪器 | 第23页 |
2.3 实验方法 | 第23-25页 |
2.3.1 青翘的预处理 | 第23页 |
2.3.2 青翘的提取与分离 | 第23页 |
2.3.3 不同乙醇浓度洗脱物制备 | 第23页 |
2.3.4 液相分析 | 第23-24页 |
2.3.5 抑制AChE实验 | 第24-25页 |
2.3.6 连翘酯苷A敲除实验 | 第25页 |
2.3.7 抑制AChE动力学实验 | 第25页 |
2.4 结果与讨论 | 第25-34页 |
2.4.1 不同乙醇浓度洗脱物对AChE的抑制 | 第25-29页 |
2.4.2 连翘主要成分对AChE的抑制 | 第29-30页 |
2.4.3 剩余物或混合物抑制AChE活性研究 | 第30-33页 |
2.4.4 连翘酯苷A抑制AChE动力学研究 | 第33-34页 |
2.5 小结 | 第34-36页 |
第三章 连翘酯苷A或芦丁与乙酰胆碱酯酶相互作用研究 | 第36-50页 |
3.1 实验试剂和仪器 | 第36页 |
3.1.1 实验试剂 | 第36页 |
3.1.2 实验仪器 | 第36页 |
3.2 实验方法 | 第36-38页 |
3.2.1 荧光光谱测定 | 第36-37页 |
3.2.2 同步荧光光谱测定 | 第37页 |
3.2.3 紫外吸收光谱测定 | 第37页 |
3.2.4 分子对接 | 第37-38页 |
3.3 结果与讨论 | 第38-48页 |
3.3.1 连翘酯苷A或芦丁与AChE相互作用的荧光猝灭研究 | 第38-39页 |
3.3.2 连翘酯苷A或芦丁与AChE相互作用的同步荧光光谱测定 | 第39-41页 |
3.3.3 连翘酯苷A或芦丁与AChE相互作用的猝灭类型研究 | 第41-43页 |
3.3.4 连翘酯苷A或芦丁与AChE的结合常数和结合位点数求取 | 第43-44页 |
3.3.5 连翘酯苷A或芦丁与AChE的作用力类型分析 | 第44页 |
3.3.6 连翘酯苷A或芦丁与AChE相互作用的结合距离的计算 | 第44-46页 |
3.3.7 连翘酯苷A或芦丁与AChE相互作用的紫外吸收光谱的测定 | 第46-47页 |
3.3.8 连翘酯苷A或芦丁与AChE相互作用的分子对接研究 | 第47-48页 |
3.4 小结 | 第48-50页 |
第四章 连翘酯苷A通过下调乙酰胆碱酯酶对Aβ(25-35)诱导的细胞凋亡的保护作用研究 | 第50-62页 |
4.1 实验试剂和仪器 | 第50-51页 |
4.1.1 实验试剂 | 第50-51页 |
4.1.2 实验仪器 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-53页 |
4.2.1 PC12细胞培养 | 第51-52页 |
4.2.2 MTT法检测细胞存活率 | 第52页 |
4.2.3 ELISA测定细胞的AChE的酶活力 | 第52页 |
4.2.4 Hoechst33258染色 | 第52-53页 |
4.2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第53页 |
4.2.6 Westernblot法检测AChE和caspase-3蛋白表达水平 | 第53页 |
4.3 结果与讨论 | 第53-59页 |
4.3.1 连翘酯苷A对Aβ(25-35)诱导的PC12细胞损伤的保护作用 | 第53-55页 |
4.3.2 连翘酯苷A减弱Aβ(25-35)诱导的PC12细胞中AChE的活力及表达 | 第55-57页 |
4.3.3 连翘酯苷A对Aβ(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响 | 第57-59页 |
4.4 小结 | 第59-62页 |
第五章 总结与展望 | 第62-64页 |
5.1 总结 | 第62-63页 |
5.2 展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
个人简况及联系方式 | 第74-77页 |