| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 逆境对植物的影响 | 第10-11页 |
| 1.1.1 干旱、高盐、低温对植物的影响 | 第10-11页 |
| 1.1.2 重金属对植物的影响 | 第11页 |
| 1.2 硒的自然分布与作用 | 第11-13页 |
| 1.2.1 硒的自然分布与富硒植物 | 第11-12页 |
| 1.2.2 硒对癌症、疾病的作用 | 第12-13页 |
| 1.3 硒代半胱氨酸甲基转移酶研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 硒在植物体内的吸收、转化机制 | 第13-14页 |
| 1.3.2 硒代半胱氨酸甲基转移酶 | 第14-15页 |
| 1.4 AP2/EREBP家族转录因子 | 第15-16页 |
| 1.5 RNA-Seq技术 | 第16-18页 |
| 1.6 本研究的意义 | 第18-19页 |
| 第一部分 印度芥菜BjSMT基因的功能鉴定 | 第19-37页 |
| 本章概述 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-25页 |
| 2.1 供试材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 BjSMT转基因烟草植株的鉴定和胁迫 | 第21-23页 |
| 2.2.1 转基因烟草的鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.2 转基因烟草的硒胁迫处理 | 第22-23页 |
| 2.3 转基因烟草功能分析 | 第23-25页 |
| 2.3.1 BjSMT转基因烟草和空载体烟草表型、鲜重和株高测定 | 第23页 |
| 2.3.2 BjSMT转基因烟草和空载体烟草谷胱甘肽酶活性测定 | 第23页 |
| 2.3.3 BjSMT转基因烟草和空载体烟草叶绿素含量测定 | 第23-24页 |
| 2.3.4 BjSMT转基因烟草和空载体烟草硒富集量比较 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-34页 |
| 3.1 BjSMT转基因烟草鉴定与生物信息学分析 | 第25-27页 |
| 3.1.1 转基因烟草鉴定 | 第25页 |
| 3.1.2 基因生物信息学分析 | 第25-27页 |
| 3.2 BjSMT在转基因烟草中的功能鉴定 | 第27-34页 |
| 3.2.1 BjSMT转基因烟草和空载体烟草表型、鲜重和株高 | 第27-30页 |
| 3.2.2 BjSMT转基因烟草和空载体烟草谷胱甘肽酶活性测定 | 第30-31页 |
| 3.2.3 BjSMT转基因烟草和空载体烟草叶绿素含量测定 | 第31-32页 |
| 3.2.4 BjSMT转基因烟草和空载体烟草硒富集量比较 | 第32-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 4.1 关于硒代半胱氨酸甲基转移酶 | 第34页 |
| 4.2 关于植物体内硒形态研究 | 第34-36页 |
| 5 本章结论 | 第36-37页 |
| 第二部分 EeAP2.1和EeAP2.2烟草转化和RNA-Seq分析 | 第37-70页 |
| 本章概述 | 第37-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-49页 |
| 2.1 供试材料 | 第38页 |
| 2.1.1 植物材料与培养 | 第38页 |
| 2.1.2 菌株及质粒材料 | 第38页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第38页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-49页 |
| 2.2.1 EeAP2.1和EeAP2.2烟草表达载体的构建 | 第38-42页 |
| 2.2.2 烟草的培养与转化 | 第42-43页 |
| 2.2.3 转基因烟草的筛选与鉴定 | 第43页 |
| 2.2.4 野生型长穗偃麦草qRT-PCR分析 | 第43-46页 |
| 2.2.5 转基因烟草的RNA-Seq分析 | 第46-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-66页 |
| 3.1 EeAP2.1和EeAP2.2烟草表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.1.1 EeAP2.1和EeAP2.2基因PCR扩增结果 | 第49页 |
| 3.1.2 EeAP2.1和EeAP2.2烟草表达载体的PCR鉴定 | 第49-50页 |
| 3.1.3 EeAP2.1和EeAP2.2烟草表达载体的酶切鉴定 | 第50页 |
| 3.1.4 测序序列比对结果 | 第50-51页 |
| 3.1.5 EeAP2.1和EeAP2.2烟草表达载体农杆菌EHA105的PCR鉴定 | 第51页 |
| 3.2 EeAP2.1和EeAP2.2 转基因烟草的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
| 3.3 野生型长穗偃麦草中EeAP2.1/EeAP2.2基因表达谱分析 | 第52-55页 |
| 3.3.1 电泳检测RNA提取质量 | 第52页 |
| 3.3.2 qRT-PCR分析长穗偃麦草基因表达水平 | 第52-55页 |
| 3.4 EeAP2.1和EeAP2.2转基因烟草的RNA-Seq分析 | 第55-66页 |
| 3.4.1 测序数据质量分析 | 第55-57页 |
| 3.4.2 基因定量分析和差异基因筛选 | 第57-58页 |
| 3.4.3 差异表达基因GO分析 | 第58-64页 |
| 3.4.4 差异表达基因KEGG分析 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-69页 |
| 4.1 关于长穗偃麦草苗期基因EeAP2.1和EeAP2.2的转录表达谱分析 | 第66页 |
| 4.2 关于转录组学分析 | 第66-69页 |
| 5 本章结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 在读期间发表论文及申报专利 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 详细摘要 | 第79-80页 |
