摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-29页 |
1.1 研究问题的由来 | 第12-13页 |
1.2 文献综述 | 第13-28页 |
1.2.1 自交不亲和概述 | 第13-15页 |
1.2.2 自交不亲和识别因子的发现及其功能 | 第15-19页 |
1.2.3 芸薹属ARC1的发现及其功能 | 第19-21页 |
1.2.4 芸薹属MLPK的发现及其功能 | 第21-22页 |
1.2.5 ARC1与MLPK之间的互作研究 | 第22-23页 |
1.2.6 芸薹属自交不亲和其它基因的发现及其功能 | 第23-25页 |
1.2.7 芸薹属自交不亲和信号传导反应 | 第25-27页 |
1.2.8 芸薹属自交不亲和细胞学反应 | 第27-28页 |
1.3 研究目的 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-40页 |
2.1 实验材料 | 第29页 |
2.1.1 植物材料 | 第29页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第29页 |
2.2 研究方法 | 第29-40页 |
2.2.1 序列比对和分析 | 第29页 |
2.2.2 转录本分析 | 第29-30页 |
2.2.3 进化树分析 | 第30页 |
2.2.4 CTAB法提取油菜DNA | 第30-31页 |
2.2.5 片段扩增、TA克隆及测序 | 第31-32页 |
2.2.6 构建载体及载体扩增 | 第32-35页 |
2.2.7 农杆菌介导的遗传转化 | 第35-36页 |
2.2.8 转基因植株种植及阳性鉴定 | 第36-37页 |
2.2.9 转基因植株表型鉴定 | 第37-38页 |
2.2.10 油菜RNA提取和反转录 | 第38-39页 |
2.2.11 表达量检测 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-67页 |
3.1 甘蓝型油菜BnMLPK和BnARC1拷贝数分析 | 第40-41页 |
3.2 BnMLPK的克隆及序列分析 | 第41-47页 |
3.2.1 BnMLPK的克隆 | 第41-42页 |
3.2.2 BnMLPK转录本分析 | 第42-46页 |
3.2.3 BnMLPK进化树分析 | 第46-47页 |
3.3 BnARC1的克隆及序列分析 | 第47-50页 |
3.3.1 BnARC1的扩增 | 第47页 |
3.3.2 BnARC1序列分析 | 第47-48页 |
3.3.3 BnARC1进化树分析 | 第48-50页 |
3.4 BnMLPK和BnARC1表达模式和遗传转化分析 | 第50-55页 |
3.4.1 BnMLPK和BnARC1的表达模式分析 | 第50-52页 |
3.4.2 载体构建及遗传转化 | 第52-53页 |
3.4.3 阳性植株鉴定结果 | 第53-55页 |
3.5 表型考察结果及分析结果 | 第55-67页 |
3.5.1 BnMLPK是甘蓝型油菜柱头端自交不亲和因子 | 第55-59页 |
3.5.2 RNA干涉BnMLPK可部分打破自交不亲和反应 | 第59-61页 |
3.5.3 BnMLPK影响自交不亲和相关因子的表达量 | 第61-62页 |
3.5.4 CRISPR编辑BnARC1没有打破甘蓝型油菜“S-70”自交不亲和 | 第62-65页 |
3.5.5 RNA干涉BnARC1部分打破自交不亲和反应 | 第65页 |
3.5.6 BnARC1对自交不亲和相关基因表达量的影响 | 第65-67页 |
4 讨论 | 第67-72页 |
4.1 BnMLPK作为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶与SRK形成能磷酸化多种蛋白的复合体 | 第67-68页 |
4.2 BnMLPK与其他相关因子的关系 | 第68-69页 |
4.3 CRISPR编辑ARC1没有打破甘蓝型油菜“S-70”自交不亲和的原因分析 | 第69-70页 |
4.4 总结与展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-83页 |
附录Ⅰ | 第83-85页 |
附录Ⅱ | 第85-88页 |
附录Ⅲ | 第88-96页 |
附录IV 作者简介 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |