摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 昆虫滞育研究进展 | 第13-15页 |
1.1.1 昆虫滞育概述 | 第13页 |
1.1.2 昆虫滞育的影响因子 | 第13-14页 |
1.1.3 昆虫滞育的生理生化变化 | 第14-15页 |
1.1.4 滞育关联蛋白 | 第15页 |
1.2 七星瓢虫研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 七星瓢虫研究概况 | 第15-16页 |
1.2.2 七星瓢虫及其近缘物种滞育的研究进展 | 第16-17页 |
1.3 转录组学研究 | 第17-20页 |
1.3.1 测序技术的发展 | 第17-18页 |
1.3.2 高通量测序 | 第18-20页 |
1.4 保幼激素 | 第20-21页 |
1.4.1 保幼激素研究进展 | 第20-21页 |
1.4.2 保幼激素在滞育中的研究 | 第21页 |
1.5 实时荧光定量技术 | 第21-23页 |
1.5.1 荧光定量的发展及基本原理 | 第21-22页 |
1.5.2 荧光定量PCR技术在昆虫研究中的应用 | 第22-23页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
第二章 七星瓢虫转录组测序及差异表达分析 | 第24-39页 |
2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
2.1.1 供试虫源 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.1.3 温光组合处理 | 第25页 |
2.1.4 总RNA提取 | 第25页 |
2.1.5 RNA质量检测 | 第25-26页 |
2.1.6 文库构建及测序 | 第26页 |
2.1.7 转录组测序数据处理及分析 | 第26-29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-37页 |
2.2.1 RNA质检结果 | 第29页 |
2.2.2 测序结果和质控情况 | 第29-30页 |
2.2.3 转录组数据从头测序组装 | 第30-31页 |
2.2.4 基因功能注释 | 第31-35页 |
2.2.5 差异表达基因筛选 | 第35页 |
2.2.6 差异表达基因GO富集分析 | 第35-37页 |
2.2.7 差异表达基因KEGG通路富集分析 | 第37页 |
2.3 小结与讨论 | 第37-39页 |
2.3.1 七星瓢虫转录组测序试虫的筛选及改进方法 | 第37-38页 |
2.3.2 转录组测序结果说明 | 第38-39页 |
第三章 七星瓢虫滞育关联基因的筛选及验证 | 第39-58页 |
3.1 材料与方法 | 第39-43页 |
3.1.1 供试虫源 | 第39页 |
3.1.2 荧光定量PCR试验材料 | 第39页 |
3.1.3 主要试剂和仪器 | 第39-40页 |
3.1.4 滞育关联基因的筛选 | 第40页 |
3.1.5 滞育关联基因的KEGG代谢通路分析 | 第40页 |
3.1.6 荧光定量PCR验证 | 第40-43页 |
3.2 结果与分析 | 第43-50页 |
3.2.1 滞育关联基因筛选结果 | 第43页 |
3.2.2 滞育关联基因的KEGG通路分析 | 第43-47页 |
3.2.3 RNA质检结果 | 第47-48页 |
3.2.4 滞育关联基因qPCR验证 | 第48-50页 |
3.3 小结与讨论 | 第50-58页 |
3.3.1 滞育关联基因KEGG分类 | 第50-53页 |
3.3.2 滞育关联通路 | 第53-54页 |
3.3.3 滞育关联基因 | 第54-58页 |
第四章 七星瓢虫保幼激素酯酶基因克隆及生物信息学分析 | 第58-74页 |
4.1 材料与方法 | 第58-64页 |
4.1.1 供试虫源 | 第58页 |
4.1.2 主要试剂和仪器 | 第58-59页 |
4.1.3 引物设计 | 第59页 |
4.1.4 RNA抽提 | 第59-60页 |
4.1.5 RNA中基因组DNA的去除 | 第60页 |
4.1.6 cDNA第一链合成 | 第60-61页 |
4.1.7 中间序列调取 | 第61-62页 |
4.1.8 3'RACE实验步骤 | 第62页 |
4.1.9 5'RACE实验步骤 | 第62-64页 |
4.1.10 生物信息学分析 | 第64页 |
4.2 结果与分析 | 第64-73页 |
4.2.1 RNA提取结果 | 第64-65页 |
4.2.2 中间序列调取PCR结果 | 第65页 |
4.2.3 3'RACE和5'RACE结果 | 第65-66页 |
4.2.4 保幼激素酯酶基因全长cDNA序列获得 | 第66-67页 |
4.2.5 保幼激素酯酶氨基酸序列分析 | 第67-68页 |
4.2.6 保幼激素酯酶编码蛋白的二级结构预测 | 第68-69页 |
4.2.7 保幼激素酯酶编码蛋白的三级结构预测 | 第69页 |
4.2.8 保幼激素酯酶编码蛋白的保守结构域预测 | 第69页 |
4.2.9 保幼激素酯酶编码蛋白的信号肽预测 | 第69-70页 |
4.2.10 保幼激素酯酶编码蛋白的跨膜结构预测 | 第70页 |
4.2.11 保幼激素酯酶编码蛋白的亲疏水性预测 | 第70-71页 |
4.2.12 保幼激素酯酶氨基酸序列比对及进化分析 | 第71-73页 |
4.3 小结与讨论 | 第73-74页 |
第五章 总结与讨论 | 第74-76页 |
5.1 转录组测序数据分析及差异表达基因的筛选 | 第74页 |
5.2 滞育关联基因的鉴定及qPCR验证 | 第74-75页 |
5.3 保幼激素酯酶基因的克隆 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89页 |