| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-42页 |
| 1 核盘菌研究进展 | 第18-23页 |
| 1.1 核盘菌的危害 | 第18页 |
| 1.2 核盘菌的形态、生物学特性和生态学特性 | 第18-19页 |
| 1.3 核盘菌的致病机理 | 第19-21页 |
| 1.3.1 草酸 | 第19-20页 |
| 1.3.2 细胞壁降解酶 | 第20-21页 |
| 1.4 油菜菌核病的防治 | 第21-23页 |
| 2 生防菌盾壳霉研究进展 | 第23-27页 |
| 2.1 盾壳霉生物学及生态学特性 | 第24-26页 |
| 2.2 盾壳霉防治核盘菌的机理 | 第26-27页 |
| 2.2.1 重寄生作用 | 第26页 |
| 2.2.2 抗生作用 | 第26-27页 |
| 2.3 盾壳霉降解核盘菌草酸的研究 | 第27页 |
| 3 草酸(OA) | 第27-32页 |
| 3.1 OA对植物的危害 | 第28-29页 |
| 3.2 OA的生物合成 | 第29页 |
| 3.3 草酸的降解 | 第29-32页 |
| 3.3.1 草酸氧化酶(OXO) | 第30-31页 |
| 3.3.2 草酰-辅酶A脱羧酶(OXC) | 第31页 |
| 3.3.3 草酸脱羧酶(OXDC) | 第31-32页 |
| 4 草酸脱羧酶(OXDC)的研究进展 | 第32-40页 |
| 4.1 OXDC酶学性质及检测 | 第32-33页 |
| 4.2 细菌草酸脱羧酶 | 第33-34页 |
| 4.3 真菌草酸脱羧酶 | 第34-38页 |
| 4.3.1 丝状真菌OXDC的来源 | 第34-35页 |
| 4.3.2 OXDC分子生物学研究 | 第35-38页 |
| 4.4 OXDC的应用 | 第38-40页 |
| 4.4.1 在工业中的应用 | 第38-39页 |
| 4.4.2 在生物检测中的应用 | 第39页 |
| 4.4.3 在农业中的应用 | 第39-40页 |
| 5 本研究的意义和主要研究内容 | 第40-42页 |
| 5.1 研究意义 | 第40-41页 |
| 5.2 研究内容 | 第41-42页 |
| 第二章 盾壳霉草酸脱羧酶基因的克隆和序列分析 | 第42-59页 |
| 1 材料和方法 | 第42-47页 |
| 1.1 试验材料 | 第42-43页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第42页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第43页 |
| 1.2 试验方法 | 第43-47页 |
| 1.2.1 核酸的提取 | 第43页 |
| 1.2.2 盾壳霉草酸脱羧酶基因(Cmoxdcs)同源序列的克隆 | 第43-44页 |
| 1.2.3 盾壳霉Cmoxdcs基因全长及侧翼的克隆 | 第44-46页 |
| 1.2.4 克隆和测序 | 第46页 |
| 1.2.5 Southern杂交分析 | 第46页 |
| 1.2.6 Oxdcs多基因现象分析 | 第46页 |
| 1.2.7 子囊菌和担子菌草酸脱羧酶基因内含子数目分析 | 第46-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-53页 |
| 2.1 盾壳霉草酸脱羧酶基因(Cmoxdcs)的克隆 | 第47-49页 |
| 2.1.1 盾壳霉草酸脱羧酶基因(Cmoxdcs)同源序列的克隆 | 第47-49页 |
| 2.2 盾壳霉草酸脱羧酶基因(Cmoxdcs)的序列分析 | 第49-51页 |
| 2.3 盾壳霉草酸脱羧酶基因(Cmoxdcs)的Southern杂交分析 | 第51-52页 |
| 2.4 Oxdcs多基因现象分析 | 第52-53页 |
| 2.5 子囊菌和担子菌草酸脱羧酶基因内含子数目的保守性 | 第53页 |
| 3 结论和讨论 | 第53-59页 |
| 3.1 结论 | 第53页 |
| 3.2 讨论 | 第53-59页 |
| 第三章 盾壳霉草酸脱羧酶基因表达模式分析 | 第59-68页 |
| 1 材料和方法 | 第59-62页 |
| 1.1 试验材料 | 第59-60页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第59页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第59页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第59-60页 |
| 1.2 试验方法 | 第60-62页 |
| 1.2.1 菌丝的准备 | 第60页 |
| 1.2.2 核酸的提取 | 第60页 |
| 1.2.3 cDNA的合成 | 第60-61页 |
| 1.2.4 RT-PCR分析 | 第61-62页 |
| 1.2.5 实时定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第62页 |
| 2 结果和分析 | 第62-66页 |
| 2.1 Cmoxdc1表达模式 | 第62-63页 |
| 2.2 Cmoxdc2表达模式 | 第63-66页 |
| 3 结论和讨论 | 第66-68页 |
| 3.1 结论 | 第66页 |
| 3.2 讨论 | 第66-68页 |
| 第四章 盾壳霉草酸脱羧酶基因的功能研究 | 第68-83页 |
| 1 材料和方法 | 第68-71页 |
| 1.1 试验材料 | 第68-69页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第68页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第68页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 1.2 试验方法 | 第69-71页 |
| 1.2.1 核酸的提取 | 第69页 |
| 1.2.2 Cmoxdc1和Cmoxdc2敲除和互补转化子的获得 | 第69-70页 |
| 1.2.3 敲除转化子和互补转化子表达量检测 | 第70页 |
| 1.2.4 敲除转化子和互补转化子生物学特性分析 | 第70-71页 |
| 1.2.5 敲除转化子和互补转化子对草酸耐受性检测 | 第71页 |
| 1.2.6 敲除转化子和互补转化子降解草酸的定量检测 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-80页 |
| 2.1 Cmoxdc1和Cmoxdc2敲除和互补转化子的筛选与鉴定 | 第71-74页 |
| 2.2 敲除突变体Cmoxdcl和Cmoxdc2表达量检测 | 第74-75页 |
| 2.3 敲除突变体的生物学特性 | 第75-77页 |
| 2.4 Cmoxdc1和Cmoxdc2对草酸耐受性的影响 | 第77-79页 |
| 2.5 Cmoxdc1和Cmoxdc2对草酸降解的影响 | 第79-80页 |
| 3 结论和讨论 | 第80-83页 |
| 3.1 结论 | 第80页 |
| 3.2 讨论 | 第80-83页 |
| 第五章 Cmoxdc1和Cmoxdc2对盾壳霉重寄生作用和抗生作用的影响 | 第83-97页 |
| 1 材料和方法 | 第83-87页 |
| 1.1 试验材料 | 第83-84页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第83-84页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第84页 |
| 1.2 试验方法 | 第84-87页 |
| 1.2.1 突变体转化子和互补转化子寄生核盘菌能力检测 | 第84-86页 |
| 1.2.2 盾壳霉液体振荡培养 | 第86页 |
| 1.2.3 盾壳霉重寄生相关酶基因表达或胞外酶活性分析 | 第86-87页 |
| 1.2.4 盾壳霉产生抗真菌物质(AFS)检测 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-94页 |
| 2.1 Cmoxdc1和Cmoxdc2对寄生核盘菌的影响 | 第87-90页 |
| 2.1.1 Cmoxdc1和Cmoxdc2对寄生核盘菌菌丝的影响 | 第87-88页 |
| 2.1.2 Cmoxdc1和Cmoxdc2对寄生核盘菌菌核的影响 | 第88-90页 |
| 2.2 Cmoxdc1和Cmoxdc2对盾壳霉寄生相关酶基因表达或酶活性的影响 | 第90-93页 |
| 2.2.1 几丁质酶基因和葡聚糖酶基因表达 | 第90-91页 |
| 2.2.2 Cmoxdc1和Cmoxdc2对盾壳霉胞外蛋白酶产生的影响 | 第91-93页 |
| 2.3 Cmoxdc1和Cmoxdc2对盾壳霉产生AFS的影响 | 第93-94页 |
| 3 小结和讨论 | 第94-97页 |
| 3.1 小结 | 第94页 |
| 3.2 讨论 | 第94-97页 |
| 第六章 CMOXDC1蛋白原核表达及定位研究 | 第97-104页 |
| 1 材料和方法 | 第97-100页 |
| 1.1 试验材料 | 第97-98页 |
| 1.1.1 供试菌株 | 第97页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第97页 |
| 1.1.3 主要仪器设备 | 第97-98页 |
| 1.2 试验方法 | 第98-100页 |
| 1.2.1 CMOXDC1原核表达 | 第98-99页 |
| 1.2.2 CMODC1细胞定位 | 第99-100页 |
| 2 结果 | 第100-102页 |
| 2.1 CMOXDC1原核表达 | 第100-101页 |
| 2.1.1 CMOXDC1原核表达 | 第100页 |
| 2.1.2 CMOXDC1原核表达荧光检测 | 第100-101页 |
| 2.2 CMODC1细胞定位 | 第101-102页 |
| 3 小结和讨论 | 第102-104页 |
| 3.1 小结 | 第102页 |
| 3.2 讨论 | 第102-104页 |
| 第七章 结论和展望 | 第104-106页 |
| 7.1 主要结论 | 第104页 |
| 7.2 展望 | 第104-105页 |
| 7.3 论文主要创新点 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-123页 |
| 附录1 本实验所涉及到的引物序列 | 第123-125页 |
| 附录2 本实验克隆得到的序列 | 第125-132页 |
| 附录3 本论文涉及到的载体 | 第132-135页 |
| 附录4 试验方法及试剂 | 第135-153页 |
| 附录5 在读期间发表论文 | 第153-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
