| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1.1 高等植物花粉发育的研究进展 | 第14-18页 |
| 1.1.1 植物花粉的发育过程 | 第14-15页 |
| 1.1.2 细胞周期进程对植物花粉发育影响 | 第15-16页 |
| 1.1.3 花粉中基因的表达 | 第16-18页 |
| 1.2 高等植物丙酮酸脱氢酶复合体的研究 | 第18-22页 |
| 1.2.1 丙酮酸脱氢酶复合体的组成 | 第18-19页 |
| 1.2.2 丙酮酸脱氢酶复合体活性的调控 | 第19-21页 |
| 1.2.3 丙酮酸脱氢酶复合体的表达 | 第21页 |
| 1.2.4 丙酮酸脱氢酶复合体的调控及应用 | 第21-22页 |
| 1.3 高等植物蛋白质相互作用的研究 | 第22-27页 |
| 1.3.1 酵母双杂交技术 | 第22-25页 |
| 1.3.2 双分子荧光互补技术 | 第25-27页 |
| 1.4 化学杂交剂诱导小麦雄性不育杂种优势利用的研究 | 第27-29页 |
| 1.4.1 化学杂交剂的特点 | 第27页 |
| 1.4.2 化学杂交剂研究的进展 | 第27-29页 |
| 1.5 化学杂交剂诱导小麦雄性不育机理的研究进展 | 第29-33页 |
| 1.5.1 CHA的结构与小麦雄性不育 | 第29-30页 |
| 1.5.2 CHA诱导小麦雄性不育的细胞学研究 | 第30页 |
| 1.5.3 CHA诱导小麦雄性不育泛素/蛋白酶体途径的研究 | 第30-31页 |
| 1.5.4 CHA诱导小麦雄性不育活性氧代谢的研究 | 第31页 |
| 1.5.5 CHA诱导小麦雄性不育的能量代谢研究 | 第31-33页 |
| 1.6 本研究目的意义及技术路线 | 第33-36页 |
| 1.6.1 目的意义 | 第33-34页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第34-36页 |
| 第二章 SQ-1诱导的小麦生理型不育雄配子体发育的细胞学观察及丙酮酸含量测定 | 第36-42页 |
| 2.1 材料和方法 | 第36-38页 |
| 2.1.1 实验材料与处理 | 第36页 |
| 2.1.2 小麦花药的石蜡切片制作 | 第36-37页 |
| 2.1.3 小麦花粉发育的细胞学观察 | 第37页 |
| 2.1.4 小麦花药丙酮酸含量测定 | 第37-38页 |
| 2.2 结果 | 第38-41页 |
| 2.2.1 小麦花药发育的细胞学观察 | 第38-40页 |
| 2.2.2 小麦花药样品中丙酮酸含量分析 | 第40-41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 小麦TAPDK基因的分子特征分析 | 第42-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.2 主要实验试剂 | 第42-43页 |
| 3.3 实验仪器 | 第43页 |
| 3.4 实验中所涉及的引物 | 第43页 |
| 3.5 实验方法 | 第43-50页 |
| 3.5.1 小麦花药总RNA的提取 | 第44页 |
| 3.5.2 小麦花药总RNA的纯化 | 第44-45页 |
| 3.5.3 一链cDNA的合成 | 第45页 |
| 3.5.4 小麦TaPDK基因的克隆 | 第45-46页 |
| 3.5.5 小麦TaPDK扩增片段的回收 | 第46页 |
| 3.5.6 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| 3.5.7 小麦TaPDK扩增片段的连接与转化 | 第47-48页 |
| 3.5.8 小麦TaPDK启动子序列的hiTAIL-PCR过程 | 第48-49页 |
| 3.5.9 小麦TaPDK及其启动子序列的比较分析 | 第49-50页 |
| 3.5.10 小麦TaPDK蛋白的原核表达分析 | 第50页 |
| 3.6 结果与分析 | 第50-56页 |
| 3.6.1 小麦总RNA质量检测 | 第50-51页 |
| 3.6.2 小麦TaPDK基因的cDNA扩增结果 | 第51页 |
| 3.6.3 小麦TaPDK的序列结构分析 | 第51-53页 |
| 3.6.4 小麦TaPDK的启动子序列分析 | 第53-55页 |
| 3.6.5 小麦TaPDK的原核表达 | 第55-56页 |
| 3.7 讨论 | 第56-59页 |
| 3.7.1 小麦TaPDK的序列结构与其功能的关系 | 第56-57页 |
| 3.7.2 hiTAIL-PCR克隆TaPDK启动子序列 | 第57-59页 |
| 第四章 小麦生理型雄性不育TAPDK及其底物蛋白基因的表达特征 | 第59-65页 |
| 4.1 材料和方法 | 第59-61页 |
| 4.1.1 供试材料及处理 | 第59-60页 |
| 4.1.2 小麦花药总RNA的提取和纯化 | 第60页 |
| 4.1.3 第一链cDNA的合成 | 第60页 |
| 4.1.4 半定量RT-PCR分析 | 第60-61页 |
| 4.2 结果与分析 | 第61-63页 |
| 4.2.1 基因在相同遗传背景小麦不育系中的表达分析 | 第61-62页 |
| 4.2.2 基因在不同遗传背景小麦不育系中的表达分析 | 第62-63页 |
| 4.3 讨论 | 第63-65页 |
| 4.3.1 SQ-1诱导的小麦雄性不育系其能量代谢途径更容易受到影响 | 第63-64页 |
| 4.3.2 SQ-1诱导的生理型不育系与遗传型不育系在对TaPDK进行调节的上游信号机制不一致 | 第64-65页 |
| 第五章 小麦生理型雄性不育TAPDK互作蛋白的筛选与分析 | 第65-81页 |
| 5.1 实验材料及处理 | 第65页 |
| 5.2 主要实验试剂 | 第65-66页 |
| 5.3 酵母培养基 | 第66-67页 |
| 5.4 实验方法 | 第67-74页 |
| 5.4.1 酵母双杂交诱饵质粒的构建 | 第67页 |
| 5.4.2 诱饵质粒转化酵母宿主细胞 | 第67-68页 |
| 5.4.3 诱饵蛋白的自激活及毒性检测 | 第68页 |
| 5.4.4 小麦花药酵母双杂交cDNA文库的构建 | 第68-72页 |
| 5.4.5 小麦TaPDK互作蛋白的筛选 | 第72-73页 |
| 5.4.6 阳性克隆酵母质粒的提取 | 第73页 |
| 5.4.7 阳性文库质粒的分离及插入cDNA片段大小的鉴定 | 第73-74页 |
| 5.4.8 回转验证蛋白相互作用 | 第74页 |
| 5.4.9 阳性克隆的序列分析 | 第74页 |
| 5.5 结果 | 第74-78页 |
| 5.5.1 BD-TaPDK诱饵载体的构建 | 第74页 |
| 5.5.2 诱饵蛋白的自激活实验和毒性检测结果 | 第74-75页 |
| 5.5.3 小麦花药酵母双杂交cDNA文库构建 | 第75-76页 |
| 5.5.4 小麦TaPDK互作蛋白的筛选 | 第76-78页 |
| 5.6 讨论 | 第78-81页 |
| 第六章 小麦TAPDK互作蛋白的序列特性及表达分析 | 第81-93页 |
| 6.1 材料与方法 | 第81-82页 |
| 6.1.1 供试材料及其处理 | 第81页 |
| 6.1.2 小麦花药总RNA的提取和纯化 | 第81页 |
| 6.1.3 第一链cDNA的合成 | 第81页 |
| 6.1.4 序列特征分析 | 第81-82页 |
| 6.1.5 实时定量PCR分析 | 第82页 |
| 6.2 结果 | 第82-90页 |
| 6.2.1 互作蛋白基因的序列分析 | 第82-88页 |
| 6.2.2 TaPUbi在相同遗传背景小麦不育系中的表达分析 | 第88页 |
| 6.2.3 TaPCNA在西农1376和近等基因系两类不同材料中的表达分析 | 第88-89页 |
| 6.2.4 TaCBS和TanLTP在西农1376中的表达分析 | 第89-90页 |
| 6.3 讨论 | 第90-93页 |
| 第七章 结论 | 第93-97页 |
| 7.1 结论 | 第93-96页 |
| 7.1.1 SQ-1诱导小麦花粉败育的细胞学形态 | 第93页 |
| 7.1.2 小麦TaPDK的分子特征 | 第93页 |
| 7.1.3 小麦TaPDK及其底物蛋白基因TaPDC-E1α的表达特征 | 第93页 |
| 7.1.4 小麦TaPDK互作蛋白的筛选 | 第93-94页 |
| 7.1.5 TaPDK的候选互作蛋白的序列特性与表达分析 | 第94-96页 |
| 7.2 本研究的创新点 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-108页 |
| 附件 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简介 | 第111页 |
